[发明专利]热带假丝酵母ZD－3菌株及其用途及用以生产生物蛋白饲料的方法

说明书

技术领域

本发明属生物技术领域，具体地说是一种热带假丝酵母ZD-3菌株(Candidatropicalis ZD-3)及其用途及将该菌株用以生产生物蛋白饲料的方法。

背景技术

棉籽饼粕是棉花加工业的主要副产品，我国年产量高达400多万吨。它富含蛋白质(30％～45％)，是重要的蛋白饲料资源。在国内外，棉籽饼粕可较多量地替代豆粕安全地应用于反刍动物，尤其是在奶牛饲养中已大量地推广应用，但是对单胃动物而言，饲喂棉籽饼粕时，由于含有有毒物质棉酚(450～1500mg/kg)，会对动物生长、发育和繁殖等方面产生明显的不良影响，因而限制了其安全而有效的用作畜禽蛋白饲料，部分地区甚至将其贬作肥料，造成饲料资源的严重浪费。针对这一难题，我国科研人员(吴小月等，1989；钟英长等，1989)首先提出了用微生物发酵脱毒的途径，就是将特定微生物接种到棉籽饼粕培养基中，在一定的条件下利用微生物在饲料原料中的生长繁殖和新陈代谢，棉酚被分解利用或与蛋白质氨基酸结合形成结合棉酚，从而达到脱毒的目的。

棉酚的分子式为C₃₀H₃₀O₈，化学结构是8，8’-二醛基-1，1’，6，6’，7，7’-六羟基-5，5’-二异丙基-3，3’-二甲基-2，2’-联萘。它的分子量为518.54。棉株体内棉酚的存在形式有两种，即结合棉酚(bound gossypol)和游离棉酚(free gossypol)。通常认为在棉花组织中呈游离状态存在的棉酚称为游离棉酚，而与其他物质(蛋白质、氨基酸和磷脂)结合的棉酚称为结合棉酚。一般认为，只有游离棉酚对人畜具有毒性。猪、鸡、兔等长期摄食含高剂量游离棉酚的棉籽饼会损害动物繁殖机能，导致呼吸吃力、困难，生长速度降低以及厌食等症状。棉酚可引起鸡蛋蛋黄变色，由淡黄色变为棕黄色。动物中毒症状表现为食欲减退或厌食、日渐消瘦、四肢无力、抽搐、腹泻、粪便颜色变淡等症状。

发明内容

本发明的目的是提供一种热带假丝酵母ZD-3菌株(Candida tropicalis ZD-3)及其用途，同时还提供一种将上述菌株用以生产生物蛋白饲料的方法。

本发明的热带假丝酵母ZD-3菌株(Candida tropicalis ZD-3)于2008年3月1日保藏在中国典型培养物保藏中心，登记入册编号为：CCTCC N₀ M208024。

本发明的热带假丝酵母ZD-3菌株(Candida tropicalis ZD-3)细胞呈卵圆形，大小为3～4×4～5μm，出芽繁殖。用麦芽汁液体培养该菌，菌体沉淀于管底。在麦芽汁琼脂斜面或平皿上培养24～48h，菌落呈奶油色，无光泽或稍有光泽，软而平滑，有皱纹。培养时间久的菌落较硬。在加盖片的玉米粉琼脂培养基上培养，可见大量假菌丝，包括伸长的分枝假菌丝，上面带有芽分生孢子。

上述的热带假丝酵母ZD-3菌株(Candida tropicalis ZD-3)CCTCC N₀ M208024可在棉籽饼粕及类似物上生长，变性底物中游离棉酚含量极低，同时底物中产生大量代谢产物蛋白酶。因此，它可用于棉籽饼粕及类似物的发酵脱毒，进而生产优质生物蛋白饲料。

上述的热带假丝酵母ZD-3菌株(Candida tropicalis ZD-3)CCTCC N₀ M208024用以生产生物蛋白饲料的方法如下：用热带假丝酵母ZD-3菌株(Candida tropicalisZD-3)CCTCC N₀ M208024对棉籽饼粕发酵脱毒，在温度为25～35℃环境下发酵30～60h。

用上述的热带假丝酵母ZD-3菌株(Candida tropicalis ZD-3)CCTCC N₀ M208024生产生物蛋白饲料过程中，最好在棉籽饼粕中加入10～30％的豆粕、玉米粉、小麦麸中的至少一种作为发酵底料。

上述的用热带假丝酵母ZD-3菌株(Candida tropicalis ZD-3)CCTCC N₀ M208024生产生物蛋白饲料方法中，其优选的菌种制作过程如下：

(1).一级种子(试管斜面种子)：从原始菌种接种至试管麦芽汁固体培养基，28～32℃培养16～36小时；

(2).二级种子(试管液体种子)：从一级种子接种至试管麦芽汁液体培养基，28～32℃培养16～36小时；