[发明专利]红景天及红景天苷在干细胞定向分化为肝系细胞中的应用有效
申请号: | 200810059516.8 | 申请日: | 2008-01-25 |
公开(公告)号: | CN101225374A | 公开(公告)日: | 2008-07-23 |
发明(设计)人: | 李连达;欧阳竞锋;吴理茂;乔洪翔 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06;A61K36/41;A61P1/16 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人: | 黄美娟;冷红梅 |
地址: | 310027浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红景天 干细胞 定向 化为 细胞 中的 应用 | ||
1.红景天在制备诱导干细胞定向分化为肝系细胞诱导剂中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于红景天中提取的红景天苷在制备诱导干细胞定向分化为肝系细胞诱导剂中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述的干细胞为成体干细胞。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述成体干细胞为骨髓间充质干细胞。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述应用为:红景天苷与细胞生长因子FGF-4组合作为诱导剂用于诱导骨髓间充质干细胞定向分化为肝系细胞。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述应用为:取大鼠骨髓间充质干细胞进行传代培养,取稳定传代的骨髓间充质干细胞于诱导培养基中,进行诱导培养,获得成熟肝细胞样细胞;所述诱导培养基为添加有红景天苷与细胞生长因子FGF-4的基础培养基,所述基础培养基中红景天苷与细胞生长因子FGF-4添加量为:红景天苷终浓度为1~5μM,细胞生长因子FGF-4终浓度为5~20ng/mL。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述的应用为:取大鼠骨髓间充质干细胞,进行传代培养,取第3代的骨髓间充质干细胞,接种于MSC培养基,37℃、5%CO2条件下培养至细胞汇合率大于90%,将细胞培养基更换为添加有2μM红景天苷与10ng/mL细胞生长因子FGF-4的基础培养基,诱导培养14天,得到成熟肝细胞样细胞。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于所述MSC培养基为:含10%胎牛血清、2mM谷氨酰胺、10mM Hepes、100U/ml青霉素、100U/ml链霉素的低糖DMEM培养基;
所述基础培养基为:含2%胎牛血清、2mM谷氨酰胺、10mM Hepes、1×胰岛素-转铁蛋白-硒、200μg/L地塞米松、100U/ml青霉素、100U/ml链霉素的高糖DMEM培养基。
9.一种诱导干细胞定向分化为肝系细胞的诱导剂,其特征在于所述的诱导剂含有红景天。
10.如权利要求10所述的诱导剂,其特征在于所述的诱导剂含红景天苷元或红景天苷。
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