[发明专利]灯台叶药材及其制剂的药物检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物分析检测技术领域，具体地说是灯台叶药材及其制剂的药物检测方法。

背景技术

灯台树Alstonia Scholaris(L.)R.Bro.为夹竹桃科植物，主要分布云南南部，资源丰富。灯台叶是多民族使用的天然药物，用于治疗肺热咳嗽、痰多、支气管炎等呼吸系统疾病，药材已为《云南省药品标准》、《中国药典》收载。利用灯台叶为原料，已开发了灯台叶颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液等制剂产品。

对于灯台叶的化学研究，朱伟明博士论文“五种药用植物资源化学的初步研究”，朱华博士论文“五种药用植物的化学与活性成分研究”(中国科学院昆明植物研究所，2001年、2006年)中对生物碱成分进行了系统研究和文献综述。在药物质量分析方面，《云南省药品标准》对灯台叶药材仅用简单的生物碱沉淀反应进行鉴别，无含量测定项目；卫生部颁中药标准灯台叶颗粒无理化检测项目，灯台叶片采用酸碱滴定法测生物碱，并折算为指标成分鸭脚树叶碱含量，但测定方法的专属性差，已经不能适应中药现代化的技术要求。

为改进灯台叶药材及其制剂质量分析技术方法，已经有一些研究报道或相关专利申请。朱光荣申请“鸭脚树叶碱在控制灯台叶药材及其制剂质量中的应用”专利(授权，CN100356172C)；昆明振华制药厂有限公司对灯台叶主要生物碱成分鸭脚树叶碱的检测方法进行研究，申请“测定碱鸭脚树叶碱含量的高效液相色谱方法”专利(公开，CN 1975412A)；昆明植物研究所申请“治疗呼吸道相关疾病的药物及其制备方法和应用”(公开，CN101084951A)、“治疗呼吸道相关疾病的药物及其应用”专利(公开，CN 101084894A)；中国药品生物制品检定所申请“一种治疗咳嗽哮喘的中药组合物”专利(公开，CN101028323A)。这些相关的研究及专利，均只是涉及到灯台叶中含有的生物碱类成分，尤其是主要成分碱鸭脚树叶碱的分析方法及其在药物质量控制中应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种分析检测灯台叶药材以及以灯台叶为原料生产的各种制剂中有效成分化合物1和2的方法。该方法以薄层色谱定性检测灯台叶药材及其制剂中化合物1、2，并以分光光度法测定其含量来实现对灯台叶药材及其制剂的质量分析与控制。

本发明人对灯台叶的进一步研究证实，灯台叶除生物碱成分外还含有较多的黄酮苷类成分，并首次发现存在二个含量较高的黄酮苷类成分：山奈酚-3-O-β-D-半乳糖-(2--1)-O-β-D-木糖苷、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖-(2--1)-O-β-D-木糖苷(以下称化合物1、2，其结构见附图1)。经药理试验证明化合物1和2是灯台叶及其制剂抗炎、止咳、镇痛的有效成分。对化合物1和2的存在及含量进行分析和检测，可以作为控制灯台叶及其制剂质量的重要指标。

(1)用薄层色谱法检测灯台叶药材及其制剂中化合物1和2：以硅胶G为吸附剂，用乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水的混合溶液为展开剂；展开剂所含四种溶剂的体积比为乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3～5∶0.5～1∶0.5～1。其最佳配比为乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1。

其中，展开剂中的乙酸乙酯可用C₁-C₄的脂肪酸和C₁-C₄的脂肪醇形成的酯替代，丁酮可用C₃-C₆的低级脂肪酮替代，甲酸可用C₂-C₆的低级脂肪酸替代。

(2)用分光光度法测定灯台叶药材及其制剂中化合物1和2的含量：在亚硝酸钠存在下以硝酸铝为显色剂，在稀氢氧化钠溶液中显色后于510nm测定吸收值，其含量以吸收值和化合物1和2混合的标准溶液在相同显色条件下的吸收值比较而确定。

以上所述的制剂是以灯台叶为原料生产的各种制剂，包括灯台叶颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液等。

化合物1和2的可用植物化学方法从灯台叶中提取分离，用光谱分析方法测定结构，用动物实验证明其药理作用。光谱数据如表一，结构式见附图1。

表一化合物1和2的主要光谱数据

化合物1和2的药理活性证明：

(1)化合物1和2对氨水所致小鼠咳嗽的影响