[发明专利]一种作为猪标记辅助选择的与生产性状相关的分子标记的克隆及应用无效
| 申请号: | 200810047038.9 | 申请日: | 2008-03-12 |
| 公开(公告)号: | CN101245348A | 公开(公告)日: | 2008-08-20 |
| 发明(设计)人: | 熊远著;程蕾;付亚原;任竹青;左波;徐德全 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
| 主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人: | 王敏锋 |
| 地址: | 430070湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 作为 标记 辅助 选择 生产 性状 相关 分子 克隆 应用 | ||
1、一种作为猪标记辅助选择应用的与猪生产性状相关的分子标记,它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:3所示。
2、根据权利要求1所述的分子标记,其特征在于,序列表SEQ ID NO:3所示序列的第190位碱基处有一个T190-C190的碱基突变,导致Eco130 I-RFLP多态性。
3、检测权利要求2所述碱基突变的正、反向引物的DNA序列如下所示:
正向:5’-TAGACAAGGCGGAGGATAGC-3’,
反向:5′-CGTGGGCATCTCTTACAGGC-3′。
4、一种实现权利要求1或2所述的分子标记的制备方法,其特征按照以下步骤:
用人PNLIPRP2基因cDNA为信息探针,作同源序列筛选,获得同源性90%以上的表达序列标签(EST);然后对EST进行拼接;根据拼接的序列设计引物获得猪的编码区全长,根据与人PNLIPRP2基因的cDNA序列的比对结果大致得出猪PNLIPRP2基因的3、4外显子,在第3、4外显子上分别设计正反向扩增引物,提取猪血液中的DNA,利用设计的引物PCR扩增猪PNLIPRP2基因的第三内含子、PCR产物回收,克隆,测序,获得如序列表SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。
5、权利要求1或2所述的分子标记在猪分子标记辅助选择中的应用。
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