[发明专利]固定化α-氨基酸酯水解酶及其制备与应用有效
| 申请号： | 200810044881.1 | 申请日： | 2008-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN101525603A | 公开（公告）日： | 2009-09-09 |
| 发明（设计）人： | 熊辉;斯克利亚仁科·安娜;蒋用;库偌什金娜·瓦连金娜;王明蓉;萨塔偌娃·热尼;胡远辉;克列斯季安洛瓦·伊琳娜 | 申请（专利权）人： | 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所;俄罗斯联邦国营企业工业微生物遗传育种国家研究所 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N11/02;C12P35/00;C12P37/00 |
| 代理公司： | 成都信博专利代理有限责任公司 | 代理人： | 陶 红 |
| 地址： | 610051四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 固定 氨基酸 水解 及其 制备 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种把红纹黄单胞菌(Xanthomonas rubrilineans)胞内α-氨基酸酯水解酶制成非均相生物催化剂的制备方法，其步骤由破裂红纹黄单胞菌的细胞生物量，分步法破碎细胞，即先用低温效应，将细胞生物量冷冻至-25℃～-30℃破坏细胞的完整性，再用乙酸丁酯处理解冻细胞的水悬浮溶液，水性悬浮液的浓度为20～100mg(干重)/ml，乙酸丁酯浓度为2～6％(v/v)；细胞悬浮液的加热处理的温度范围为25～35℃，先在自发pH梯度再在恒定pH下进行；恒定pH靠加入滴定溶液来维持，滴定溶液消耗速度的变化水平是选择滴定终止点的判据；分离掉破碎的细胞生物量的无细胞提取液无需任何纯化，经由聚乙二醇以酶聚集体形式的沉淀和其后的交联化而直接用于酶的固定化而组成。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于使用必要量的分子量4000～10,000的聚乙二醇从无细胞提取液中把酶聚集体沉淀出来。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于酶聚集体交联使用的戊二醛的相对浓度为1×10-2～5×10-2mmol/mg蛋白。
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