[发明专利]宫颈癌遗传检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学和医学领域，更具体的，本发明涉及一种检测个体宫颈癌遗传易感性的试剂盒，通过同时检测与宫颈癌密切相关的肿瘤蛋白基因(P53)、谷胱甘肽硫转移酶M1基因(GSTM1)、谷胱甘肽硫转移酶T1基因(GSTT1)、5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A基因(P21)、白细胞介素18基因(IL-18)上的单核苷酸多态性位点基因型来评估个体宫颈癌遗传易感性。

背景技术

宫颈癌是指宫颈上皮的细胞不断异常分裂，造成上皮组织的异常增生，并逐渐发生癌变，形成位于子宫阴道部及宫颈管的恶性肿瘤。宫颈癌是危害女性健康的第二大癌症，发病仅在乳腺癌之后。宫颈癌的高发年龄段为35至39岁和60至64岁，20岁以前发病比较少见。但是现在随着女性生活习惯的改变，宫颈癌有逐年上升和年轻化的趋势，特别是在城市女性人群中。

子宫颈是女性生殖系统中重要组织器官之一，它关系到女性的健康、家庭幸福、经济和社会问题，也与性和生殖等关系十分密切。然而，子宫颈易受外来细菌、病毒侵袭，加上分娩、流产等造成的创伤，可能发生多种疾病。另外由于宫颈上皮组织的特殊形态性改变，导致其易有炎症向恶性肿瘤转化的倾向。

宫颈癌以鳞状上皮细胞癌为主，约占90％～95％，腺癌仅占5％～10％。但两者在外观上并无特殊差别，且均发生在宫颈阴道部或颈管内。宫颈癌最常见的症状为白带增多和阴道出血，白带可为米汤样或粉红色，且有恶臭，但无外阴瘙痒不适症状；阴道出血常见于性交后、排便后或妇科检查后，绝经后出现阴道流血更应注意；也有患者出现泌尿道症状(如尿急、尿频、排尿不畅)、下腹隐痛等。

P53失活被认为在许多恶性肿瘤产生中起重要作用。野生型P53基因在维持细胞正常生长，抑制肿瘤细胞恶性增生过程中起着重要作用，当细胞受放射线或者某些药物作用致DNA损伤时，P53可以使细胞分裂终止在不同分裂时期，如G1/S期，以便有足够的时间修复损伤，恢复正常状态。Arg72Pro是P53基因第4号外显子处的一个G/C多态，引起该基因编码的第72位密码子由Arg变为Pro。该多态位点有三种基因型：GG(Arg/Arg)、GC(Arg/Pro)、CC(Pro/Pro)，其中GG(Arg/Arg)和GC(Arg/Pro)为宫颈癌的风险基因型。P53基因第72位密码子遗传多态对P53蛋白生物学功能的影响目前尚不清楚。体外研究表明，在由HPV的E6蛋白所介导的P53蛋白的降解方面，Arg/Arg基因型对应P53蛋白的降解速度比Pro/Pro基因型对应P53蛋白快。体内P53蛋白的减少，将会导致由P53调控的基因损伤修复、细胞分裂、细胞凋亡过程出现异常，让正常的细胞转化为肿瘤细胞。

GSTM1基因位于第1号染色体的1p13.3段，编码的谷胱甘肽硫转移酶M1是体内生物转化II相代谢酶的重要组成成员之一，它通过直接结合于化学致癌物或通过与谷胱甘肽结合而发挥解毒功能。Null/Present是GSTM1最常见的多态现象，纯合型缺失(Null)在人群中占到40％左右，该多态导致GSTM1酶活性显著下降。该位点有三种基因型：+/+、+/-和--，分别代表无等位基因缺失、缺失一个等位基因、缺失两个等位基因(完全缺失型)，其中完全缺失型(Null)与宫颈癌的发生有关。当GSTM1基因发生完全缺失时，宫颈上皮细胞内无GSTM1表达，因此也无GSTM1的解毒活性，对环境毒素和致癌物质的敏感性提高，在接触大量致癌物时，机体的解毒功能降低，这主要是由于该酶的缺失，使得致癌物不能转化为毒性低、水溶性强的代谢产物而及时有效地排出体外。这些未排除体外的致癌物可能与机体内重要的抑癌基因形成DNA加合物，导致DNA突变和染色体畸变，从而增加了包括宫颈癌在内的多种肿瘤的发生风险。