[发明专利]基于内皮细胞表面抗原的肿瘤疫苗的制备方法

权利要求书

1、一种肿瘤疫苗的制备方法，包括：

用蛋白酶在不使细胞死亡的温和条件下处理活的内皮细胞；

收集释放的细胞表面抗原；

用蛋白酶重复处理所述活的内皮细胞，间隔的时间足以使得表面抗原被所 述内皮细胞恢复；

积聚释放的抗原，直至达到所需的抗原数量；

控制疫苗质量。

2、如权利要求1所述的制备方法，其中，所述内皮细胞为激活的内皮细 胞。

3、如权利要1或2所述的制备方法，其中，所述内皮细胞为从肿瘤组织 血管中新分离出来的内皮细胞。

4、如权利要求1所述的制备方法，其中，所述内皮细胞经过培养使其增 殖。

5、如权利要求1所述的制备方法，其中，所述蛋白酶为胰蛋白酶。

6、如权利要求1、2、4中任意一项所述的制备方法，其中，激活的所述 内皮细胞是从肿瘤血管中分离的，并在保持所述内皮细胞激活状态的条件下培 养。

7、如权利要求1、2、4、6中任意一项所述的制备方法，其中，培养过程 中所述内皮细胞的激活状态是通过与肿瘤细胞共同培养而维持的。

8、如权利要求1、2、4、6中任意一项所述的制备方法，其中，培养过程 中所述内皮细胞的激活状态是通过与肿瘤组织片段共同培养而维持的。

9、如权利要求1、2、4中任意一项所述的制备方法，其中，激活的所述 内皮细胞为取自病人自身肿瘤血管的内皮细胞。

10、如权利要求1、2、4中任意一项所述的制备方法，其中，激活的所述 内皮细胞为取自其他病人肿瘤血管的内皮细胞。

11、如权利要求1、2、4中任意一项所述的制备方法，其中，所述内皮细 胞的培养是通过体外与肿瘤细胞共同培养而激活的。

12、如权利要求1、2、4、11中任意一项所述的制备方法，其中，所述内 皮细胞是被患者自身的肿瘤细胞激活的。

13、如权利要求1、2、4、11中任意一项所述的制备方法，其中，所述内 皮细胞是被其他患者的肿瘤细胞激活的。

14、如权利要求1、2、4、11中任意一项所述的制备方法，其中，所述内 皮细胞是被肿瘤细胞系激活的。

15、如权利要求1、2、4中任意一项所述的制备方法，其中，所述内皮细 胞的培养是通过体外在生长培养基中加入激活物质而激活的。

16、如权利要求1、2、4、15中任意一项所述的制备方法，其中，所述内 皮细胞被至少一种激活因子激活。

17、如权利要求1、2、4、16中任意一项所述的制备方法，其中，所述内 皮细胞是被血管内皮生长因子激活的。

18、如权利要求1、2、4中任意一项所述的制备方法，其中，所述内皮细 胞的培养是通过体外加入来自肿瘤细胞培养的条件培养液而激活的。

19、如权利要求1所述的方法，其中，所述表面抗原中加入佐剂。