[发明专利]监测酶混合物无效
申请号: | 200780010339.8 | 申请日: | 2007-02-08 |
公开(公告)号: | CN101405402A | 公开(公告)日: | 2009-04-08 |
发明(设计)人: | 弗雷德里克·约翰·罗威尔;莱瑟·散达尔 | 申请(专利权)人: | 分析纳米技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/37 | 分类号: | C12Q1/37;C12M1/34 |
代理公司: | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 王达佐;韩克飞 |
地址: | 英国塞*** | 国省代码: | 英国;GB |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 监测 混合物 | ||
1.同时检测样品中至少两种酶存在与否的方法,所述方法包括以 下步骤:
(i)使第一酶的用第一荧光团标记的第一底物(a)和第二酶的用第 二荧光团标记的第二底物(b)暴露于所述样品,以使所述样品中存在的 所述第一和第二酶,如果存在的话,与单独的第一和第二荧光团标记 的底物相互作用,从而形成单独的第一和第二荧光团标记的底物片段;
(ii)检测所述荧光团标记的底物片段的存在。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述方法用于检测至少两种空 气传播的酶的水平,并且所述方法包括以下步骤:
(i)在将所述底物暴露于所述样品之前,获得第一大气空气样品; 以及
(ii)捕获存在于所述第一样品中的任意酶颗粒。
3.如权利要求2所述的方法,所述方法还包括将所捕获的酶颗粒 与液体混合以形成所述样品。
4.如权利要求3所述的方法,其中所述液体是水性缓冲液。
5.如权利要求4所述的方法,所述方法还包括将所述样品从第一 样品与所述液体混合的区域传送至使所述样品暴露于所述底物的反应 区域。
6.如前述任一项权利要求所述的方法,其中将使所述样品暴露于 所述底物的步骤实施足够的时间,使得所述第一和/或第二酶与所述单 独的底物之间相互作用,从而形成荧光团标记的底物片段。
7.如前述任一项权利要求所述的方法,其中所述检测步骤涉及检 测由所述第一和/或第二荧光团标记的底物片段发射的信号。
8.如前述任一项权利要求所述的方法,其中所述第一和/或第二底 物是蛋白或多肽。
9.如权利要求8所述的方法,其中所述蛋白或多肽选自明胶、猪 甲状腺球蛋白、胶原、免疫球蛋白或其片段和牛血清白蛋白。
10.如前述任一项权利要求所述的方法,其中至少一种所述底物 由支持物所承载。
11.如权利要求10所述的方法,其中所述支持物是固相支持物。
12.如权利要求10或权利要求11所述的方法,其中所述支持物 产生自或包括玻璃珠、溶胶凝胶珠、纤维素纤维或硅颗粒。
13.如权利要求10至12中任一项权利要求所述的方法,其中所 述支持物是能磁化的。
14.如前述任一项权利要求所述的方法,其中所述第一和/或所述 第二酶选自蛋白酶、纤维素酶、脂酶、α-淀粉酶或胶原酶。
15.如权利要求15所述的方法,其中所述蛋白酶选自枯草杆菌蛋 白酶类型酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、益瑞蛋白酶和水解蛋白酶。
16.如前述任一项权利要求所述的方法,其中所述第一和/或所述 第二荧光团选自荧光素或其衍生物、若丹明、德州红甲酚紫和荧 光黄。
17.如前述任一项权利要求所述的方法,其中所述样品源自第一 空气样品。
18.如权利要求14至17中任一项权利要求所述的方法,其中所 述第一底物和所述第二底物中的一种或两者都是蛋白酶的底物。
19.如前述任一项权利要求所述的方法,所述方法包括首先将所 述样品暴露于所述第一或第二底物之一以及随后将所述样品暴露于所 述第一或第二底物的另一者。
20.如权利要求18或19所述的方法,其中被监测的至少一种所 述酶是蛋白酶并且所述第一底物和第二底物中的至少一种是蛋白酶的 底物。
21.如权利要求20所述的方法,其中所述酶是枯草杆菌蛋白酶类 型酶并且所述底物是α-淀粉酶。
22.如权利要求1至18中任一项权利要求所述的方法,所述方法 包括将所述样品同时暴露于所述第一底物和所述第二底物。
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