[发明专利]一种鼠李糖脂生物发酵液的工业化制备方法

权利要求书

1.一种鼠李糖脂生物发酵液的制备方法，其特征在于：该鼠李糖脂发酵液是由在石油污染的土壤中提取并经过分离纯化得到的铜绿假单胞菌再经亚硝基胍诱变后得到铜绿假单胞菌VTS-1(Pseudomonas sp.VTS-1)保藏编号为：CGMCC2200，具体发酵培养步骤如下：

A、菌种VTS-1接入摇瓶培养，温度为32±2℃、120转/分震荡培养12～16小时，得到摇瓶菌种；

B、一级发酵培养：将A步骤中的摇瓶菌种按5％～10％的接种量转接入装有培养基的一级发酵罐中，在温度为32±2℃、pH6.5～7.5、通风比1∶0.5～1及搅拌速度为100～150转/分的条件下发酵培养10～18小时，得到一级发酵菌种；

C、二级发酵培养：将B步骤中的一级发酵菌种按5％～10％的接种量转接入装有培养基的二级发酵罐中，在温度为32±2℃、pH6.5～7.5、通风比1∶0.5～1及搅拌速度为100～150转/分的条件下发酵培养10～18小时，得到二级发酵菌种；

D、发酵培养：将C步骤中的二级发酵菌种按5％～10％的接种量转接入装有培养基的三级发酵罐中，在温度为32±2℃、pH6.5～7.5、通风比1∶0.5～1、搅拌速度为100～150转/分及补料条件下发酵培养45～55小时，再进行80℃灭菌得到鼠李糖脂发酵液。

2.根据权利要求1所述的鼠李糖脂生物发酵液的制备方法，其特征在于：斜面培养基配方：牛肉膏0.3％、蛋白胨1％、NaCl 0.5％、琼脂2％，其余为蒸馏水，pH6.2；摇瓶及发酵罐培养基配方：玉米油2～5％、尿素0.2～1.5％、糖蜜15～20％、KCl 0.05～1.0％、KH₂PO₄0.05～1.2％、K₂HPO₄0.05～1.5％、酵母膏0.005～0.1％及复合微量元素0.005～0.01％，余量为水，pH为6.5，所述的复合微量元素为Zn 1.5g/L、Cu 1.0g/L、Mn 1.0g/L、Se 1.5g/L、Co 1.0g/L及溶剂水复配而成。

3.根据权利要求1所述的鼠李糖脂生物表面活性剂的生产方法，其特征在于：步骤D中所补的料是玉米油，每次补料量为1％～5％。

4.根据权利要求1所述的鼠李糖脂生物发酵液的制备方法，其特征在于：各级发酵罐的装料系数是60～75％。