[发明专利]检测性传播疾病病原体的基因芯片及检测用试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种基因芯片及包含该芯片的检测用试剂盒，尤其是涉及一种检测性传播疾病病原体的基因芯片及检测用试剂盒。

背景技术

性传播疾病(Sexually transmitted diseases，以下简称STD)是指主要经性行为而传播的一组疾病，是全球范围内最受公众关注的疾病之一，尤其是对妇女而言，STD危害程度仅次于癌症。世界卫生组织把20多种疾病归为性传播疾病，常见的有：淋病、尖锐湿疣、非淋菌性尿道炎、生殖器疱疹、梅毒、艾滋病等。我国仍习惯于把艾滋病以外的其它几种常见的性传播疾病统称为性病。据世界卫生组织统计资料显示，1999年全球新增淋病、衣原体、梅毒和阴道滴虫感染的病例达3.4亿，如果加上单纯疱疹病毒(HSV)、乳头瘤病毒(HPV)感染的病例，这个数字可能要高出三倍甚至更高。我国在1964年已宣布消灭了STD，但自1979年以来，STD又在我国重新出现。目前，我国目前性病的流行呈上升趋势，性传播疾病患者为数不少。据有关报道，仅1997年，我国30个省市报告性病约50万，实际性病患者远不止此数。

引起STD的病原体总类较多，主要有淋病奈瑟氏菌、沙眼衣原体、解脲脲原体、人型支原体、HSV、HPV、等。世界卫生组织1999年统计数据显示，由淋病奈瑟氏菌、沙眼衣原体引起的STD病例分别到达9200万例和6200万例。HSV亚型2是导致发展中国家人口秘尿生殖道感染的重要原因。HPV也是一种严重的STD病原体，每年导致50万子宫颈癌病例的发生。解脲脲原体、人型支原体是引起尿路感染和细菌性阴道炎症的主要病原体。

尽管其中大多数病种不属于致死性疾病，但它们传染性很强，引起生殖器官、附属淋巴结病变甚至全身皮肤和重要器官的病变，并能引起各种并发症与后遗症，由病毒感染所致STD有可能诱发癌症。STD患者若得不到及时治疗，将可能导致并发症和诸多后遗症的发生，包括不孕不育、宫外孕、子宫颈癌及新生儿感染等，严重影响健康。

目前医院用于诊断和检测STD病原体所采用的方法(包括金标准)主要是镜检、生化培养、抗血清反应、免疫荧光以及real time PCR等，具体分为以下几种：

(1)染色的显微镜及暗视野显微镜检测该方法适用于淋病奈瑟氏菌等病原体。此类方法的优点主要为简便，快速，但往往敏感性和特异性较差。

(2)致病菌培养：用于淋病奈瑟菌、支原体等病原体的检测。该方法是致病菌感染诊断的“金标准”，特异性较高，但费时较长，通常为2～3天，且灵敏性较PCR方法低。

(3)免疫学方法检测抗原：主要有ELISA方法、免疫荧光和免疫金标法，常用于沙眼衣原体和HSV的检测，方法特异性好，快速，但需要一定的抗原量，特殊的设备，专业的技术人员，费用比较昂贵。

(4)免疫组织化学法：主要用于HPV的诊断。该法特异性和灵敏性均较差，开展的医院较少，对其诊断和治疗主要依据临床医生的依据临床症状。有相当多的症状不典型患者，将会漏诊。70-80％宫颈癌患者可检测到乳头瘤病毒16或18型感染。所以，对乳头瘤病毒感染的诊断应引起足够的重视。

(5)聚合酶链反应(PCR)技术：敏感性和特异性均高，一般不分型，realtime PCR技术具有灵敏度高等特点，但费用较高。

由此可见，目前用于检测STD病原体的诊断技术有的耗时长，有的费用高，且均不能进行多种病原体的同时检测，因此难以达到快速、准确、高通量的目的，而这些正是芯片技术所具有的特点。

基因芯片又叫DNA芯片、DNA微阵列(DNA microarray)，是在面积不大的基片表面上以点阵的方式有序排列一系列固定于一定位置的可寻址的识别分子(DNA或RNA片段)，并以此作为探针，在一定条件下与样品中待测的靶基因片段进行结合或反应，反应结果用同位素法、化学发光法或酶标法显示，然后用精密的扫描仪或CCD摄影技术记录，通过计算机软件分析，综合成可读信息，最终实现对靶基因的存在、含量及变异等信息的快速检测。检测芯片集集约化、微型化、自动化于一体，拥有简单、快速、准确、灵敏、高通量的特点。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种用于检测STD病原体的基因芯片，以弥补传统检测STD常见病原体技术存在的费时、耗力、不能分型的缺陷，扩展病原体检测范围，提高检测灵敏度和特异性，降低劳动强度，缩短检测周期。

本发明所述的基因芯片包括固相载体和固定在该固相载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针包含下述DNA片段中的至少一种：