[发明专利]新的具有取代活化序列的经修饰的corin分子及其用途

说明书

本申请是2004年6月9日提交的，发明名称为“新的具有取代活 化序列的经修饰的corin分子及其用途”的中国专利申请 200480023009.9的分案申请。

本申请是一项非临时性申请，基于35 U.S.C§119要求享有申请 日为2003年6月11日的临时申请No.60/477,683的优先权

发明领域

本发明涉及新的经修饰的corin分子或其片段或衍生物，其含有 取代活化序列。

发明背景

丝氨酸蛋白酶对于包括食物消化、激素加工、凝血、补体激活、 伤口愈合和胚胎发育在内的多种生物学过程而言必不可少(Davie，E. W.等人(1991)Biochemistry 30：10463-10370；Kraut，J.(1977)Annu. Rev.Biochem.46：331-358；Neurath，H.(1986)J.Cell Biochem.32： 35-49；和Stroud，R.M.(1974)Sci.Am.231-74-88)。多数胰蛋白酶样 丝氨酸蛋白酶是分泌蛋白质，但是现在已经描述了有一些在胞外C- 末端含有胰蛋白酶样蛋白酶结构域的II型跨膜蛋白(Hooper，J.D.等 人(2001)J.Biol.Chem.276：857-860)。

Corin是胰蛋白酶超家族的II型跨膜丝氨酸蛋白酶类成员，由多 个结构上不同的结构域组成(Yan，W.等人(1999)J.Biol.Chem.274： 14926-14935)。成熟的corin是一种1042个氨基酸的多肽，其由在N 末端的胞质尾区、其后的跨膜区(TM，第46位至66位氨基酸)、由 两个卷曲样半胱氨酸富集结构域(CRD，第134位至259位氨基酸和 第450位至573位氨基酸)组成的主干区、8个低密度脂蛋白受体重复 序列(LDLR，第268位至415位氨基酸和第579位至690位氨基酸)、 巨噬细胞清道夫受体样结构域(Scavenger Receptor-like domain， SRCR，第713位至800位氨基酸)、和在其C末端的丝氨酸蛋白酶催 化结构域(CAT，氨基酸802至1042)(Yan，W.等人(1999)同上)组 成。Corin的整体拓扑结构与其它例如hepsin(Leytus，S.P.等人(1988) Biochemistry 27：1067-1074)和肠激酶(Kitamoto，Y.等人(1994)Proc. Natl.Acad.Sci.USA91：7588-7592)这样的II型跨膜丝氨酸蛋白酶相 似；然而corin中的结构域结构的组合看上去是独特的。

Corin含有两个LDLR基序和一个SRCR基序，其中一个LDLR 基序有5个重复序列，另一个有3个重复序列。在其它II型跨膜丝氨 酸蛋白酶例如肠激酶、matriptase和TMPRSS2-4中也发现了这种 LDLR和SRCR基序(Hooper，J.D.等人(2001)同上)。作为目前唯一 的含有卷曲样半胱氨酸富集结构域的胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶，corin 有两个这种CRD重复序列，每一个约有120个氨基酸长且其中含有 10个保守半胱氨酸残基。Corin中的CRD、LDLR和SRCR基序的 功能仍然有待研究。