[发明专利]一种在医疗器械表面固定抗体的方法

说明书

技术领域

本发明属于医疗器械领域，涉及一种在医疗器械表面固定抗体的方法。

背景技术

将生物制品，如蛋白质、抗体、生长因子以及基因质粒等固定在固体表 面，如金属表面、陶瓷表面以及高分子材料表面已经在生物芯片中广泛应用。 随着医疗器械的发展，尤其是含药医疗器械的出现，将生物制品固定在医疗 器械表面已经成为一种广泛深入研究的课题。生物制品中的抗体相对于一般 的蛋白质而言具有稳定性高，不易失活以及抗原抗体反应的特异性等优点， 已经广泛应用于体外诊断试剂，并且已经应用于药物治疗。因此将抗体牢固 固定在医疗器械表面，包括金属表面以及各种高分子涂层表面，并且不损坏 抗体活性就成为一项很关键的科技攻关技术。

目前将抗体固定在固体表面的一般包括化学键合和物理吸附两种方法。 化学键合方法一般采用首先对固体表面进行醛基化、羧基化处理，再利用化 学接枝的方法固定抗体；在将抗体固定在固体表面时需要解决的两个关键问 题是：1抗体在固体表面固定的牢固程度，2抗体在固体表面活性的保持。 目前在生物芯片上，最常采用的方法是采用首先对固体表面，如玻璃，金属 以及塑料表面进行醛基化或者羧基化处理，然后采用化学接枝的方法将抗体 固定在固体表面，这种方法牢固程度高，虽然能够很好固定抗体，但是抗体 的活性会有所降低；物理吸附方法虽然能很好保持抗体在固体表面活性，但 是很难保持抗体固定的牢固度。因此如何将这些生物制品很好的固定在医疗 器械表面是一个呈待解决的重要关键技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种在医疗器械表面固定抗体的方法，可提高抗 体在器械表面固定的牢固程度，并保持抗体在医疗器械表面具有很高的活性。

本发明采用的技术方案：一种在医疗器械表面固定抗体的方法，主要包 括①器械本体表面的预处理、②制备孔洞、③器械本体表面的后处理、④固 定抗体工艺步骤，所述的②制备孔洞是采用化学或物理方法在器械本体表面 制备大小均一的孔洞；所述的④固定抗体是将表面带有孔洞的器械本体浸没 在含有生物制品抗体的溶液中，调节抗体缓冲液的pH值使抗体溶液带正电荷， 通过正负电荷相吸将生物制品抗体固定在器械本体表面。

所述的①器械本体表面的预处理：利用超声波对器械本体表面清洗清除 杂质，使用浓度为99.5％的丙酮分析纯溶液，或浓度为75％的医用乙醇溶剂， 利用频率为28～100khz超声波清洗支架本体材料，清洗5-15min，去除本体 材料表面的杂质，将清洗后的本体材料放置在干燥机中，温度设定在30～40 ℃，干燥30～60min后取出备用。

所述的②制备孔洞：采用化学腐蚀、电化学腐蚀、阳极氧化、微弧氧化、 微弧氮化方法在器械本体上直接制备大小均一的多晶相结构孔洞；将器械本 体材料浸泡在0～100℃温度的腐蚀液中，所述的腐蚀液优选浓度为1～38％ 的盐酸，或含有1～38％的盐酸混合1～98％的硫酸成分的盐酸混酸溶液，腐 蚀时间根据浓度、温度不同控制在1min～480h后形成单尺寸纳米级孔洞。

所述的③器械本体表面的后处理：将上述处理好的器械本体材料先使用 浓度为99.5％的丙酮分析纯溶液，再经蒸馏水利用频率为28～100khz超声波 清洗本体材料5-15min；最后将清洗后的本体材料放置在干燥机中，温度设定 在30～40℃，干燥30～60min后取出备用；或用蒸馏水配制浓度为1～38％ 的盐酸溶液，将本体材料浸泡在配好的溶液中，放置在恒温箱中，温度设定 在20℃左右，放置30min～48h取出。

所述的器械本体包括支架、导管、导丝、心脏起搏器、心脏瓣膜、外科 植入材料、植入硬组织，以及基材为陶瓷、有机聚合物、无机物、金属氧化 物的非金属医疗器械；所述的支架为球囊扩张型支架、自膨胀型支架、血管 支架、非血管支架，基材为不锈钢、镍钛记忆合金、钴基合金、纯钛、钛合 金的支架，以及丝材编织、管材激光切割、模铸、焊接的支架。

所述的生物制品抗体包括下述一种或多种物质：肝素、抗血小板膜糖蛋 白(GPIIb/IIIa)受体剂拮抗、抗体治癌药物、阿昔单抗、生物多肽、CD34 抗体、CD31抗体、CD133抗体。

所述的④固定抗体：

(1).将表面带有孔洞的支架浸没在含有0.1～10μg/mL CD34抗体磷酸 盐缓冲液溶液中，25～37℃温育20～30min后取出；