[发明专利]一种利用适配子快速检测水产品中孔雀石绿的方法

权利要求书

1、一种利用适配子快速检测水产品中孔雀石绿的方法，将待测样品与孔雀石绿适配子和带有检测标记物的报告序列混合，报告序列与待测样品中的孔雀石绿可竞争性地与孔雀石绿适配子结合后，检测报告序列上的标记物，计算待测样品中孔雀石绿含量；

所述的检测标记物为辣根过氧化物酶、化学发光基团、化学荧光基团或胶体金等；

所述的报告序列与孔雀石绿适配子序列部分互补。

2、如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的孔雀石绿适配子通过如下步骤制得：

(1)构建一个序列长度约为80个碱基的随机ssDNA文库，ssDNA序列两端带有限制性内切酶位点的固定序列、中间为35个序列随机的碱基，根据ssDNA序列两端的固定序列设计PCR引物；

(2)采用不对称PCR法或生物素-链亲和素磁珠法对步骤(1)得到的ssDNA文库进行扩增；

(3)利用孔雀石绿-OVA偶联物包被微孔板介质法或高效毛细管电泳方法从扩增后的ssDNA文库中进行SELEX筛选，得到与孔雀石绿特异结合的ssDNA即孔雀石绿适配子。

3、一种检测水产品中孔雀石绿的试剂盒，包括测试片基，其特征在于：所述的测试片基上包被有孔雀石绿适配子。

4、如权利要求3所述的试剂盒其特征在于：将孔雀石绿适配子包被于测试片基上时，将连接序列5’端与孔雀石绿适配子序列3’端连接合成孔雀石绿适配子-连接序列；设计合成与连接序列互补的固定序列，将固定化基团标记在固定序列的3’端，通过固定序列与连接序列的结合将孔雀石绿适配子包被于测试片基上。