[发明专利]一种蜂毒注射液制备方法

说明书

技术领域：

本发明发属于医药技术领域。

背景技术：

蜂毒注射液是蜂毒的灭菌水溶液，具有抗炎和镇痛作用，用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎，周围神经炎及神经痛等。在实践中我们认识到蜂毒注射液刺激性较严重，偶有过敏反应发生。由于其含有高分子蛋白和其致炎物质如透明脂酸酶、5-羟色胺等相对较小的物质。本专利利用葡聚糖凝胶的分子筛分离的原理，将较小的致炎物质与蜂毒有效成份相分离，以减少刺激性。利用10万分子量的超滤柱将高分子物质与蜂毒有效成份分离，减弱了制剂的过敏性。

发明内容：

为了使蜂毒注射液成为工艺稳定，刺激性较小，过敏性较低的优良制剂，特设计了如下制备工艺。

a.溶解及脱脂：取蜂毒按1∶10比例加入注射用水溶解。若含脂较多，可用50％(V/V)乙醚或氯仿脱脂二次，除去上层，水层加热至沸，持续30分钟，挥尽残存乙醚等。过滤，除去不溶性杂质，若含脂不多亦可不脱脂。

b.分离提取：将葡聚糖凝胶G-50或其他型号的分子筛凝胶，用注射用水浸泡数小时后，用注射水反复清洗数次，装入层析柱中，接好给水系统，用注射用水冲洗数小时后备用。

c.将药液加入葡聚糖凝胶中，使药液在葡聚糖凝胶柱中进行分离提取。出液口用紫外监测记录仪监测收集(控制流速每分钟5毫升左右)，在波长280nm处有吸收成份，收集到玻璃瓶中，至无成份流出为止。

d.将蜂毒溶液过滤至清后，再用10万分子量超滤柱超滤。

e.制剂：上述过蜂毒溶液测定浓度后，用注射用水稀释至所要求浓度，除菌过滤，灌封，灭菌即得蜂毒注射液。

本发明优点：

1、除去了小分子刺激性物质和大分子致敏物质，使制剂更优良。

2、整个工艺过程简单、稳定，保证了注射液的质量。

实例：

a.取蜂毒20g，用注射用水200ml溶解，加入500ml分液漏斗中，加入100ml乙醚萃取2次。将水层放出，加热至沸，保持30分钟，蒸出残存乙醚，补加水至200ml。

b.取葡聚糖凝胶G-50约200g，用100倍注射用水浸泡12小时后，用注射用水反复清洗3次(除去细小微粒)，装入层析柱中，接好给水系统，用注射用水冲洗2小时，备用。

c.将蜂毒水溶液加入葡聚糖凝胶柱中进行分离提取，出液口用紫外监测记录仪监测，控制流速每分钟5ml，监测波长280nm，待有组分流出即开始接收，收集大约28小时，至监测仪无吸收峰为止。

d.过滤、超滤：将上述蜂毒溶液过10万分子量超滤柱，得蜂毒溶液约8000毫升。

e.检测：按蜂毒注射液国家药品标准WS₁-XG-016-2001方法检测，含量为1.5mg/ml，收率大约600mg/g。

f.制剂：将上述溶液用注射用水稀释至0.25mg/ml，PH5.0，除菌过滤，灌封，灭菌得蜂毒注射液，均符合蜂毒注射液国家标准。