[发明专利]重组VPAC1受体特异激动剂RVPAC1－A及其表达方法与应用

权利要求书

1.重组VPAC1受体激动剂RVPAC1-A，其氨基酸序列如SEQ IDNO：2所示。

2.编码权利要求1所述重组VPAC1受体激动剂RVPAC1-A的核苷酸序列，如SEQ ID NO：1所示。

3.一种权利要求1所述重组VPAC1受体特异激动剂RVPAC1-A的表达方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)设计并合成RVPAC1-A的基因；

(2)将RVPAC1-A基因克隆到质粒pTWIN1的SapI和PstI位点间，构建重组质粒pTWIN1-RVPAC1-A；

(3)重组质粒转化表达宿主菌E.coli Strain ER2566，构建表达工程菌pTWIN1-RVPAC1-A-ER；

(4)用诱导剂IPTG诱导由几丁质结合域、蛋白内含肽和目的多肽组成的“三元”融合蛋白的表达；

(5)融合蛋白经几丁质柱纯化，改变温度及pH值诱导蛋白内含肽的C端切割，释放重组目的多肽。

4.如权利要求2所述的表达方法，其特征在于步骤(1)所述的RVPAC1-A基因如SEQ ID NO：1所示。

5.权利要求1所述重组VPAC1受体激动剂RVPAC1-A在制备治疗VPAC1受体相关疾病药物中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述VPAC1受体相关疾病为肥胖、免疫失调、内分泌调节、脑损伤、脑缺血、防止神经细胞死亡、抗炎、男性阳痿、性冷淡、不孕不育、神经痛、神经病、神经混乱、焦虑症、记忆损伤、痴呆、认知混乱、中枢神经系统疾病、偏头痛、神经畏缩、心肌缺血、心肌梗死/纤维化、与生物钟睡眠及痛觉相关的疾病、动脉硬化、糖尿病、胃肠功能紊乱、肌萎缩症、胃溃疡、高血压、内毒性休克、血栓症、视网膜病变、心血管疾病、肾衰竭、心衰竭或脱发。