[发明专利]筛选家蝇抗菌肽基因的芯片及其制备方法

权利要求书

1.一种筛选家蝇抗菌肽基因的芯片，包括基片，其特征在于基片上设有长50bp、Tm值为65～70℃、GC含量为40～60％的高度特异性寡核苷酸探针。

2.根据权利要求1所述的筛选家蝇抗菌肽基因的芯片，其特征在于所述探针是在GenBank数据库中获取昆虫抗菌肽基因序列，分析其编码区和保守结构域，用Array Designer 2.0生物学软件据其保守结构域设计。

3.根据权利要求1所述的筛选家蝇抗菌肽基因的芯片，其特征在于所述探针按微阵列排列在基片上。

4.根据权利要求1所述的筛选家蝇抗菌肽基因的芯片，其特征在于所述探针微阵列排列是将探针溶解于磷酸盐缓冲液中，用芯片点样仪III有序地点印在芯片上，每一探针重复点样三次，每一芯片设计12个独立的小矩阵，每个小矩阵由4行16列组成。

5.根据权利要求1所述的筛选家蝇抗菌肽基因的芯片，其特征在于所述基片是玻片。

6.一种权利要求1所述筛选家蝇抗菌肽基因芯片的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)设计探针，构建探针微阵列于芯片基片上，芯片经紫外交联处理后放暗盒中保存备用；

(2)芯片预杂交处理；

(3)提取和纯化家蝇脂肪体总RNA，逆转录成cDNA并标记上荧光标记物Cy3，与构建的寡核苷酸探针微阵列芯片杂交；

(4)经洗片、扫描处理后进行数据分析。

7.根据权利要求6所述筛选家蝇抗菌肽基因芯片的制备方法，其特征在于步骤(3)所述杂交是于37℃下杂交16小时。