[发明专利]红细胞G6PD缺乏症双酶比值检测法及其试剂盒和使用方法

权利要求书

1.一种红细胞G6PD缺乏症双酶比值检测法，其特征是包括下述步骤：(1)制备待检测人的抗凝全血溶血液；(2)测试溶血液的葡萄糖6磷酸脱氢酶促葡萄糖6磷酸转化6磷酸葡萄糖酸的反应中生成产物还原型辅酶II在340nm波长处的特征性光吸收，间接地测出葡萄糖6磷酸脱氢酶酶促反应中的活性A；(3)测试溶血液的6磷酸葡萄糖酸脱氢酶促6磷酸葡萄糖酸转化成5磷酸核酮糖的反应中生成产物还原型辅酶II在340nm波长处的特征性光吸收，间接地测出6磷酸葡萄糖酸脱氢酶酶促反应中的活性B；(4)计算A与B的比值，葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症患者该比值小于1.0。

2.一种实现权利要求1所述红细胞G6PD缺乏症双酶比值检测方法的试剂盒，其特征是由葡萄糖-6-磷酸钠反应液、6-磷酸葡萄糖酸钠反应液和R1缓冲液组成，其中葡萄糖-6-磷酸钠反应液是由1～2份166uMol～500uMol葡萄糖-6-磷酸钠和1～3份0.2～0.5mMol三羟甲基氨基甲烷组成，pH 7.0～8.8；6-磷酸葡萄糖酸钠反应液是由1～2份140uMol～400uMol 6-磷酸葡萄糖酸钠和1～3份0.2mMol～0.5mMol三羟甲基氨基甲烷组成，pH 7.0～8.8；R1缓冲液是由1～2份84uMol～200uMol氧化型辅酶II、1～1.5份117mMol氯化镁和1～3份0.2～0.5mMol三羟甲基氨基甲烷组成，pH 7.0～8.8；上述摩尔浓度为溶质在双蒸水中的浓度，份数为体积份。

3.权利要求2所述红细胞G6PD缺乏症双酶比值检测试剂盒的使用方法，其特征是包括下述步骤：(1)取待测人抗凝全血50μl，加入纯净水1.20ml，放入一试管中，混匀，制成溶血液；(2)在双通道自动化生化仪上测试，方法是(a)第一通道R1缓冲液200μl加溶血液10μl混匀，37℃±1℃中保温2分钟后加入葡萄糖-6-磷酸钠反应液100μl，37℃±1℃中保温5分钟后，监测还原型辅酶II在340nm吸光度中上升的速率A；(b)第二通道R1缓冲液200μl加溶血液10μl混匀，37℃±1℃中保温2分钟后加入6-磷酸葡萄糖酸钠反应液100μl，37℃±1℃中保温5分钟后，监测还原型辅酶II在340nm吸光度中上升的速率B；(c)计算A与B的比值直接判断。

4.根据权利要求的使用方法，其特征是步骤(1)所述的双通道自动化生化仪为日立HITACHI 7160/7170/7080或贝克曼BECKMAN CX4/5/7/9 LX20或奥林巴斯Olympus400/600/640/2700/5400中的其中一种。