[发明专利]鉴别黄独性别的引物、片段与方法

权利要求书

1.黄独药材DNA分子鉴定性别的特异性片断，其序列为SEQ ID NO：1所示。

2.黄独药材DNA分子鉴定性别的一组引物，该组引物由SEQ ID NO：1所示序列设计合成的，其序列为SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示。

3.黄独药材DNA分子鉴定性别的方法，其特征在于该方法是利用序列为SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的引物对鉴定样品进行PCR反应，然后通过PCR反应产物的琼脂糖凝胶电泳结果鉴定样品，PCR产物电泳的结果中出现一段677bp条带的样品为雄株，而相同部位没有出现条带的样品为雌株。

4.据权利要求3所述的方法，其特征在于该反应体系为20μl，反应液组成为：10×PCRbuffer，2.5mmol/L的dNTPs，25mmol/L的MgCl₂，lu的Taq DNA聚合酶，上下游引物各0.3μmol/L，50ng模板DNA；在PCR仪上按下面的循环程序进行PCR扩增：94℃预变性3min；94℃变性45s，62℃退火30s，72℃延伸90s，35个循环；最后72℃延伸5min；在电压为80V下，经1.2％琼脂糖凝胶电泳1h检测PCR扩增结果，溴化乙锭(EB)染色，紫外凝胶成像系统拍照，100bp DNA ladder作分子量标记；该方法中PCR产物电泳结果中出现一段677bp条带的样品为雄性，而相同部位没有出现条带的样品为雌株。