[发明专利]一系列双重生物活性的融合蛋白及其医疗应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程和蛋白质工程技术领域，具体地说，涉及编码能够同时抑制肿瘤坏死因子和粒-巨噬细胞集落刺激因子或白细胞介素-6的双重生物活性的融合蛋白的DNA序列、其所编码的融合蛋白、该融合蛋白的药物用途、含有该融合蛋白的药物及其制剂。

背景技术

肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor α，简称为TNFα)是一种多功能细胞因子，在炎症反应、免疫调节、和抗感染等生物机制中起重要作用(Aggarwal，Nature Reviews Immunology，2003，3，745-756)。TNFα有二种广泛表达的细胞表面受体：TNFR1(又称为p55或CD120a)和TNFR2(又称为p75或CD120b)，TNFα和TNFR1或TNFR2相结合后可引发一系列的生物反应，包括细胞分化、活化、促炎因子的释放、细胞凋亡等。适量释放TNFα是机体对抗感染和炎症的重要手段，但是在多种自身免疫性疾病中，包括类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis，简称为RA)、克隆病(Crohn’s Disease)、牛皮癣(Psoriasis)、强直性脊柱炎(Ankylosing Spondyliti，简称AS)等，TNFα的过量表达是炎症反应对机体自身攻击的重要因素，因此抑制TNFα是控制这些疾病症状的有效治疗手段(Furst et al，Annals of the Rheumatic Diseases，2003，62(suppl2)：ii2-ii9)。现在美国市场上有三种抑制TNFα的抗炎症生物药物获得了批准以治疗各种自身免疫性疾病：Enbrel、Remicade、和Humira，它们在2005年的销售总额为90亿美元。虽然现有的TNFα抑制剂获得了巨大成功，但它们只对40％的患者有疗效，剩余的大部分病患缺乏有效的治疗方法，所以开发新一代的抗炎症产品具有重大意义。

粒-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage-colony stimulatingfactor，简称为GM-CSF)是一种在炎症反应和免疫系统中起重要作用的骨髓细胞生长因子和多功能调节因子(Fleetwood et al，Critical Review in Immunology，2005，25(5)：405-428)，它不但控制粒细胞和巨噬细胞等多种血液细胞的生长和活化，而且还可以帮助巨噬细胞释放促炎因子TNFα和IL-1(白细胞介素-1)以加强炎症反应。GM-CSF的作用是通过和多种细胞表面上的GM-CSF特异性受体相结合来传导的，该受体由α和β二条链组成的，其中α链提供对GM-CSF的特异性，而β链能提高受体对GM-CSF的亲和力，并起主要的信号传递作用。GM-CSF在多种人体自身免疫性/炎症性疾病中有着重用作用，包括类风湿性关节炎、肾小球肾炎(Glomerulonephritis)、多重硬化症(multiple sclerosis，简称为MS)、哮喘(Asthma)、慢性阻塞性肺病(Chronic obstructive pulmonary disease，简称为COPD)等疾病，比如在类风湿性关节炎患者的关节中发现了GM-CSF的表达水平异常升高(Xu et al，The Journal of Clinical Investigation，1989，83：876-882)；又如在GM-CSF基因敲除(Gene knock-out)的小鼠中不能引发类风湿性关节炎或多重硬化症(Campbell et al，The American Association of Immunologists，1998，22-1767：3639-3644；McQualter et al，The Journal of Experimental Medicine，2001，194(7)：873-881)；又如在类风湿性关节炎的小鼠模型中，针对GM-CSF的单克隆抗体拥有很好的治疗效果(Cook et al，Arthritis Research，2001，3：293-298)。因此GM-CSF是开发抗炎症新药的重要分子靶标，抑制GM-CSF的生物分子可能对自身免疫性/炎症性疾病起到治疗作用。