[发明专利]一种用于去除致病抗体及其复合物的蛋白A免疫吸附材料及其合成方法和应用有效
| 申请号: | 200610123707.7 | 申请日: | 2006-11-17 |
| 公开(公告)号: | CN101185878A | 公开(公告)日: | 2008-05-28 |
| 发明(设计)人: | 陈校园;张旭锋;汪志刚;李光吉;许春生 | 申请(专利权)人: | 广州康盛生物科技有限公司;华南理工大学 |
| 主分类号: | B01J20/22 | 分类号: | B01J20/22 |
| 代理公司: | 珠海智专专利商标代理有限公司 | 代理人: | 许淑文 |
| 地址: | 510730广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 去除 致病 抗体 及其 复合物 蛋白 免疫 吸附 材料 合成 方法 应用 | ||
1.一种用于去除致病抗体及其复合物的蛋白A免疫吸附材料,是将葡萄球菌蛋白A共价键合于琼脂糖凝胶载体上的高分子材料,它具有如下的化学结构:
其中:
代表琼脂糖凝胶;X代表其中,n=1~3;SPA代表葡萄球菌蛋白A。
2.权利要求1所述的用于去除致病抗体及其复合物的蛋白A免疫吸附材料制备方法,其特征在于合成过程如下:
(1)用环氧溴丙烷活化琼脂糖凝胶,反应体系中琼脂糖凝胶占25%~40%的体积比,环氧溴丙烷占9%~17%的体积比,1~3MNaOH溶液占40%~60%的体积比,且每毫升NaOH溶液中加入2毫克硼氢化钠,反应温度20~40℃,反应时间2~6小时;
(2)用多胺类试剂对步骤(1)所得带有活性环氧基团的琼脂糖凝胶进行开环反应;反应温度40~70℃,反应时间2~6小时,多胺类试剂充分过量;
(3)用戊二醛与步骤(2)带有活性氨基的琼脂糖凝胶反应,加入的戊二醛摩尔数为琼脂糖凝胶活性氨基摩尔数的40~60倍,用硼酸盐作缓冲液控制体系的pH值在8左右,反应温度20~40℃,反应时间2~4小时;
(4)SPA与步骤(3)的反应产物反应合成免疫吸附材料,反应体系中SPA浓度为400~1000μg/mL,使SPA在反应体系中过量,用硼酸盐缓冲溶液控制体系pH值在8~10,反应温度20~25℃,反应时间15~30小时;
(5)步骤(4)所得产物进行端基封闭反应,同时多次加入硼氢化钠还原双键,封端试剂的浓度为0.1~0.2mol/L,pH值为7.5~8.5。
3.权利要求2所述的用于去除致病抗体及其复合物的蛋白A免疫吸附材料的制备方法,其特征在于多胺类试剂为乙二胺、二乙三胺或三乙四胺中的一种。
4.权利要求2所述的用于去除致病抗体及其复合物的蛋白A免疫吸附材料的制备方法,其特征还在于端基封闭反应是用三羟甲基氨基甲烷、甘氨酸乙酯盐酸盐或乙醇胺与产物中未反应完的醛基反应封端。
5.权利要求1所述的用于去除致病抗体及其复合物的蛋白A免疫吸附材料在血液净化中的应用。
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