[发明专利]播娘蒿DsCBF基因及其制备方法与应用无效
| 申请号： | 200610021867.0 | 申请日： | 2006-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN101144083A | 公开（公告）日： | 2008-03-19 |
| 发明（设计）人： | 曹毅;乔代蓉;白林含;徐辉;代旭兰 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82 |
| 代理公司： | 成都科海专利事务有限责任公司 | 代理人： | 刘双兰 |
| 地址： | 610065四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 播娘蒿 dscbf 基因 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种播娘蒿DsCBF基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.一种用于表达播娘蒿DsCBF基因的重组质粒，其特征在于，它含有权利要求1所述的核苷酸序列。
3.一种播娘蒿DsCBF的蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
4.一种权利要求1所述的播娘蒿DsCBF基因的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
(1)提取播娘蒿总RNA；
(2)以总RNA为模板，用简并引物5’CAYCCNATHTAYMGNGGNGT 3’，5’GCNGCYTTYTGDATNTCYTT 3’进行RT-PCR扩增得到DsCBF基因的EST序列；
(3)进行RACE扩增得到DsCBF基因的cDNA全长。
5.一种权利要求2所述的用于表达播娘蒿DsCBF基因的重组质粒的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
(1)通过RT-PCR扩增得到播娘蒿DsCBF基因的开放阅读框；
(2)将上述播娘蒿DsCBF基因片段克隆至中间载体pMD18-T，然后进一步克隆到植物表达载体pBI121；
(3)将带有播娘蒿DsCBF基因片段的表达载体pBIcbf转入根癌农杆菌中，通过农杆菌介导转染到模式植物的CBF缺陷型植株。
6.一种权利要求2所述的用于表达播娘蒿DsCBF基因的重组质粒，其特征在于，在植物抗寒、抗旱和抗盐碱中的应用。
7.一种权利要求2所述的用于表达播娘蒿DsCBF基因的重组质粒，其特征在于，在抗逆性较弱的经济植株进行遗传改造和种植推广方面的应用。
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