[发明专利]具有不抗IL－2而抗HIV中和活性的抗体或其片段

说明书

本发明涉及一种具有抗HIV中和活性的抗体或其片段，以及其在治疗和/或预防HIV感染中的应用。本发明还涉及一种包括所述抗体的药物组合物、一种诊断组合物和一种用于提供被动免疫治疗的方法。

人类免疫缺陷病毒(HIV)是动物逆转录病毒的慢病毒家族成员之一并且是获得性免疫缺陷综合症(AIDS)的病原体。迄今，已经在分子水平上鉴定并表征了两种密切相关的HIV类型，即HIV-1型(HIV-1)和HIV-2型(HIV-2)。

采用抗HIV的抗病毒剂(例如逆转录酶抑制剂)已经使得受AIDS影响的患者的症状显著改善。然而，在大多数情况下，这些药物对AIDS的疗效是局部的或暂时的，并且另外，这些药物表现出毒性或者抑制造血细胞的生长，并因此抑制已经缺陷的免疫系统的重建。

因此，通常认为艾滋病的预防方案和抗逆转录病毒的药物治疗(VALDISERRI，2003，Nat.Med，9：881)需要结合有效的杀菌剂和疫苗。但是设计并测试这些疫苗被证明是很复杂的(LETVIN，et al.2002，Annu.Rev.Immunol.，20：73；McMICHAEL & HANKE，2003，Nat.Med.，9：874)。

粘膜表面是HIV-1进入的主要位点(NICOLOSI，et al.1994，J.Acquir.Immun.Defic.Syndr.，7：296)。通过使粘膜表面暴露于被HIV-1感染的液体，例如精液、初乳、母乳和子宫颈阴道的液体可以发生HIV-1的传播(CHERMANN，1998，Am.J.Reprod.Immunol.，40：183；MILMAN & SCHARMA，1994，AIDS，10：1305)。

由于HIV与粘膜表面的相互作用，被设计成抗HIV疫苗的组分需要引起粘膜免疫系统对粘膜病毒传播的早期步骤和潜在受体的干扰。

已经认识到中和AIDS病毒的抗体可以明显地在防护中起到重要作用。

然而，尽管可以获得抗一种生长在实验室的特定病毒株的中和抗体，但是还没有类似成功地实现可以中和大量株系并且可以在体内有效作用的抗体。

HIV gp41的胞外区结构域是病毒包膜上最保守的区域，其是高免疫原性糖蛋白。

从美国专利6 455 265可知，由于三维结构类似物和/或与人类免疫系统的蛋白的某些区域的交叉反应，和尤其是IL-2，因而HIV病毒的逆转录包膜蛋白gp41的保守区和免疫显性区应对有害的自身免疫现象负责。

从WO 2005/010033可知，gp41装配的环状蛋白(gp41 engineered loopproteins)在gp41的N-和C-螺旋间的连接环中包括一个连接片段并避免了或降低了自身免疫副作用。

因此，需要一种抗体，其可以中和HIV感染，和尤其是HIV-1感染，而没有自身免疫副作用。

需要一种抗体，其可以预防和/或减少通过粘膜表面的HIV感染。

还需要提供一种抗体，其用于生产意图被用于被动免疫治疗的药物。

需要一种抗体，其可以被用于诊断的目的。

本发明的目的在于满足上述提及的全部或部分需求。

本发明人已经获得了一种有效的单克隆抗体，其可以满足上述提及的未满足的需求。

尤其是，本发明人已经鉴定出一种新的IgA抗体Fab，其在H链可变区包括至少一个选自CDR1、CDR2和CDR3的互补决定簇(CDR)或其功能类似物，所述CDR1、CDR2和CDR3分别具有如SEQ ID NO 1、SEQ ID NO 2和SEQ ID NO 3所示的氨基酸序列。

更具体而言，所述新鉴定的IgA抗体Fab可以识别gp41装配的环状蛋白或野生型gp41蛋白，但不能识别存在于gp41装配的环状蛋白和野生型gp41蛋白中被称作P1的肽。

例如，P1肽(SEQ ID NO 12)对应于如SEQ ID NO 11所示gp41蛋白的野生型氨基酸序列中第649～683位氨基酸，和自HIV-1 HxB2株获得。

新鉴定的抗体也具有抑制HIV-1转胞吞作用和阻止CD4+T细胞感染的能力。

因此，根据本发明的一个方面，本发明涉及一种单克隆抗体或其片段，所述抗体或其片段在H链可变区包括至少一个选自CDR1、CDR2和CDR3的互补决定簇(CDR)或其功能类似物，所述CDR1、CDR2和CDR3分别具有如SEQ ID NO 1、SEQ ID NO 2和SEQ ID NO 3所示的氨基酸序列。