[发明专利]口腔粘膜病变着色呈色检测剂及其配制方法和应用

说明书

本发明是关于一种以着色反应来检验口腔粘膜及异常粘膜细胞病变的检测剂，特指一种口腔粘膜病变着色呈色检测剂及其配制方法和应用，将适当比例的甲基蓝、伊红、煌绿及甘油醇的混合溶液涂抹患部，利用癌症病变中组织异常生长时细胞会聚集核醣核酸与去氧核醣核酸的特性，甲基蓝与伊红在该处会显现不易脱色的蓝紫色；再利用慢性发炎与退化病变所生成的组织较为致密的原理，使煌绿与甘油醇在该患部呈现绿至蓝绿色，因此而达到双重检验的效果，有效地筛检口腔粘膜病变。

本发明为一种简易且有效的口腔粘膜细胞病变的检验试剂配方，利用特殊细胞组织着色剂的呈色反应判别病情的种类，达到双重检验的目的。此发明供医护人员能简便而准确地靠着肉眼评断初步病情，及早发现口腔癌的可疑病灶，同时更能应用于口腔粘膜病变患者的病情追踪检查，确定怀疑的病灶及其分布范围，以决定切片部位及手术位置，并增加手术的精确性，降低人们因患口腔癌的死亡率，为一极具突破性的医学新技术。

据统计，因为国人抽烟及咀嚼槟榔等不当的饮食习惯，近年来国内患口腔癌的人口数有逐年上升的趋势，其高居十大死因中男性癌症的第五名。

然而口腔癌根据发现的早，患者的存活率可高达75％，根据晚期才发现，其患者五年的存活率则降低至18％，因此可知早期诊断是否患有口腔癌的重要性，让国人可及早发现及早治疗，同时站在预防医学的角度，筛检预防口腔癌较的发病后再来治疗，不仅是减清患者的痛苦，而且更可节省大量的医疗资源及成本。

早期癌症病变细胞检测方式除了用目视加触诊法外，只能用病理切片检查，目视加触诊判断的结果准确率低，误诊机率高；而病理切片检查虽然最为准确，但却过程麻烦，且须耗费大量的人力与时间，无法早点得知诊断结果，因此使病患延误了医治的时机，同时也提高了死亡率。

另一种相关于口腔皮膜病变的TBO(Toludine blue 0)检测试剂，其检验结果为单一呈色结果，只对恶性化细胞(根据癌细胞、急性发炎细胞)具检验效果，而且其检测剂本身含有较高的毒性，对人体易产生不良的影响，根据一委托中山医学微生物学科组织病毒实验室所作的细胞毒性试验，详细说明请参考附件一。

该试验为XTT实验，将不同浓度TBO检测剂及本检测剂(以下简称GEM)分别加在Fibroblast(ATCC CCL 163)与HeLa Cell(ATCC CCL2)中，二十四小时后加入XTT灭剂，以分光计吸收光谱测OD值，分析比较两者的毒性，其结果根据表一、表二所示，TBO检测剂的毒性强度在正常纤维细胞组织中比GEM检测剂高出约十倍，因此说明传统的TBO检测剂的毒性较大，在使用上具较高的危险性。

本发明的主要目的是提供一种简易安全且准确度高的口腔粘膜细胞病变检验检测剂，利用特殊细胞组织着色剂的呈色反应判别病情的程度，达到双重检验的目的，以期及早发现病端、及早治疗及增进国人健康的目的。

本发明的目的是这样实现的：一种口腔粘膜病变着色呈色检测剂，其特征是：它包括如下成分和配比：

乳酸    1％的水溶液95ml，

甲基蓝   0.5-3.0克，

伊红G    0.2-1.0克，

煌绿     0.2-1.0克，

甘油醇   50ml。

一种口腔粘膜病变着色呈色检测剂的配制方法，其特征是：它包括如下步骤：

(1)按如下成分和配比备料：

乳酸    1％的水溶液95ml，

甲基蓝  0.5-3.0克，

伊红G   0.2-1.0克，

煌绿    0.2-1.0克，

甘油醇  50ml。

(2)配制：

①先将甲基蓝和伊红G加入乳酸的纯水溶液中充分混合，于常温常压下静置等待其充分溶解混合，备用；

②将煌绿溶于甘油醇搅拌混合后，加入步骤①的混合溶液，再次充分搅拌，常温常压下静置待完全均匀即可。

该甲基蓝的剂量为在每95ml的1％乳酸中加入2.0克。该伊红剂量为每95ml的1％乳酸中加入0.5克。该煌绿的加入剂量为每50ml的甘油醇中加入0.5克。该煌绿用甲基绿取代。该甲基绿的剂量为每50ml的甘油醇中加入0.2-1.0克。该乳酸纯水溶液的浓度为1％。该配方的组成剂量为每95ml的1％乳酸中加入2.0克甲基蓝和0.5克伊红。该配方的组成剂量为每50ml的甘油醇中加入0.5克煌绿。

一种口腔粘膜病变着色呈色检测剂的应用，其特征是：该检测剂搭配一媒染剂使用。该搭配的媒染剂为乳酸的纯水溶液。

本发明的相关原理说明如下：