[发明专利]编码tal基因的核苷酸序列无效
| 申请号: | 00801335.7 | 申请日: | 2000-07-05 |
| 公开(公告)号: | CN1317050A | 公开(公告)日: | 2001-10-10 |
| 发明(设计)人: | L·K·杜尼肯;阿什令·麦科麦克;克里奥娜·斯特普尔顿;凯文·伯克;贝蒂娜·默克尔 | 申请(专利权)人: | 德古萨股份公司;国立爱尔兰大学 |
| 主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N15/62;C12P13/08;C12Q1/68;C12P13/06;C12P13/22;//;C12R115) |
| 代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 | 代理人: | 林晓红 |
| 地址: | 德国杜*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 编码 tal 基因 核苷酸 序列 | ||
1、来自棒状细菌的分离的多核苷酸,其包含选自如下一组的至少一个多核苷酸序列:
a)与编码包含SEQ ID NO:2或SEQ IDNO:4的氨基酸序列的多肽的多核苷酸至少70%相同的多核苷酸,
b)编码包含与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4的氨基酸序列至少70%相同的氨基酸序列的多肽的多核苷酸,
c)与a)或b)的多核苷酸互补的多核苷酸,以及
d)包含a),b)或c)的多核苷酸序列的至少15个连续核苷酸的多核苷酸。
2、权利要求1的多核苷酸,其中多核苷酸是能在棒状细菌中复制的优选地是重组的DNA,并额外含有编码基因tkt,zwf,opcA和devB的至少一个核苷酸序列。
3、权利要求1的多核苷酸,其中该多核苷酸是RNA。
4、权利要求1的多核苷酸,包含如SEQ ID NO:3所示的一个核苷酸序列。
5、权利要求2的多核苷酸,其编码包含SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:4所示的氨基酸序列的多肽。
6、权利要求2的可复制的DNA,包含
(ⅰ)如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列,或
(ⅱ)在遗传密码简并范围内相应于的(ⅰ)序列的至少一个序列,或
(ⅲ)与互补于(ⅰ)或(ⅱ)序列的序列杂交的至少一个序列,和任选地
(ⅳ)(ⅰ)中中性功能的有义突变。
7、作为宿主细胞的棒状细菌,其含有携带权利要求1的多核苷酸的载体。
8、制备L-氨基酸的方法,其中进行以下步骤:
(a)发酵产生所需的L-氨基酸的细菌,该细菌中至少tal基因及任选地tkt基因、zwf基因、devB基因或opcA基因中的一或多个基因是同时扩增的,
(b)在培养基或细菌细胞中积累所需产物,及
(c)分离所需的L-氨基酸。
9、权利要求8的方法,特征在于使用如此的细菌,该细菌中所需的L-氨基酸生物合成途径的其他基因是额外扩增的。
10、权利要求8的方法,其中使用如此的细菌,该细菌中降低所需的L-氨基酸形成的代谢途径至少被部分消除。
11、权利要求8-12任一项的方法,其中使用产生L-赖氨酸、L-苏氨酸、L-异亮氨酸或L-色氨酸的棒状细菌。
12、权利要求8的发酵制备L-氨基酸特别是赖氨酸方法,其中在特别是已产生L-氨基酸的所述棒状微生物中,选自如下一组的一或多个基因同时扩增或过表达:
12.1编码二氢-2,6-吡啶二羧酸合酶的dapA基因,
12.2编码抗反馈天冬氨酸激酶的lysC基因,
12.3编码甘油醛-3-磷酸脱氢酶的gap基因,
12.4编码丙酮酸羧化酶的pyc基因,
12.5编码苹果酸-醌氧化还原酶的mqo基因,
12.6编码酮基转移酶的tkt基因,
12.7编码6-磷酸葡糖酸脱氢酶的gnd基因,
12.8编码葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的zwf基因,
12.9编码赖氨酸输出蛋白的lysE基因,
12.10zwa1基因,
12.11编码烯醇化酶的eno基因,
12.12opcA基因。
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