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[发明专利]一种大麻素类活性物质的通用检测方法及其检测试剂盒-CN201910306031.2有效
发明人：范春雷;程向荣 -专利权人：浙江诺迦生物科技有限公司
申请日： 2019-04-16 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种大麻素类活性物质的通用检测方法及其检测试剂盒，检测试剂盒分为检测组试剂和对照组试剂两种成分，检测组试剂包括稳定表达人源大麻素受体CB1基因的单克隆细胞系CB1·copGFP/293和细胞内游离钙离子检测荧光探针试剂Fura Red，对照组试剂包括空白对照单克隆细胞系copGFP/293和细胞内游离钙离子检测荧光探针试剂Fura Red；所述空白对照单克隆细胞系copGFP/293的制备方法为：将pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP质粒、pH1质粒、pH2质粒共转染至慢病毒包装细胞293V，制备EF1‑copGFP慢病毒，将EF1‑copGFP慢病毒感染人胚肾细胞293，得到空白对照单克隆细胞系copGFP/293。本发明通过检测胞质内游离钙离子浓度变化，以荧光钙的荧光值(Ca2+F)与copGFP的荧光值(PF)的比值Ca2+F/
一种大麻活性物质通用检测方法及其试剂盒

[发明专利]一种阿片类活性物质的通用检测方法及其检测试剂盒-CN201910305617.7有效
发明人：范春雷 -专利权人：杭州迈尔德生物科技有限公司
申请日： 2019-04-16 - 公布日： 2022-04-22 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明公开了一种阿片类活性物质的通用检测方法及其检测试剂盒，检测试剂盒分为检测组试剂和对照组试剂两种成分，检测组试剂包括稳定表达人源μ型阿片受体MOR1基因的单克隆细胞系MOR1•copGFP/293和细胞内游离钙离子检测荧光探针试剂Fura Red，对照组试剂包括空白对照单克隆细胞系copGFP/293和细胞内游离钙离子检测荧光探针试剂Fura Red；空白对照单克隆细胞系copGFP/293的制备方法为：将pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP质粒、pH1质粒、pH2质粒共转染至慢病毒包装细胞293V，制备得到EF1‑copGFP慢病毒；将EF1‑copGFP慢病毒感染人胚肾细胞293，得到所述空白对照单克隆细胞系copGFP/
一种阿片活性物质通用检测方法及其试剂盒

[发明专利]pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4质粒的构建方法-CN201110283350.X无效
发明人：周亚峰;杨向军;李红霞;韩莲花;蒋文平 -专利权人：苏州大学附属第一医院
申请日： 2011-09-22 - 公布日： 2012-04-04 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4质粒的构建方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：（1）从心肌组织中提取总RNA，将提取的总RNA反转录合成cDNA第一链，以反转录得到的cDNA为模板，使用含有核苷酸序列为SEQNo：2和为SEQNo：3的基因特异性引物通过PCR扩增得到HCN4起搏基因；（2）抽提pCDH1-MCS1-EF1-copGFP质粒，分别对空质粒载体pCDH1-MCS1-EF1-copGFP和步骤（1）PCR扩增得到的HCN4起搏基因用EcoRⅠ和BamHⅠ进行双酶切；（3）将双酶切后的空质粒载体pCDH1-MCS1-EF1-copGFP和双酶切后的HCN4起搏基因进行连接反应，将HCN4起搏基因连接入pCDH1-MCS1-EF1-copGFP质粒中，构建形成pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4质粒。
pcdh1 mcs1 ef1 copgfp hcn4 质粒构建方法

[发明专利]神经母细胞miR-200b/c高表达的慢病毒表达载体及其构建方法-CN202011256614.8在审
发明人：孙倩;刘建军;任晓虎;聂露琳 -专利权人：深圳市疾病预防控制中心（深圳市卫生检验中心、深圳市预防医学研究所）
申请日： 2020-11-11 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种神经母细胞miR‑200b/c高表达的慢病毒表达载体，包括：PCDH‑copGFP载体及miR200b/c基因序列，所述miR200b/c基因序列酶切插入PCDH‑copGFP载体中得到miR200b/c高表达的慢病毒表达载体，所述PCDH‑copGFP载体和miR200b/c的前体DNA序列均包含BamHl和EcoRI两个酶切位点,根据本发明实施例提供的神经母细胞miR‑200b/c高表达的慢病毒表达载体及构建方法，利用miR200b/c基因序列酶切插入PCDH‑copGFP载体中得到miR200b/c高表达的慢病毒表达载体，其转染效率高，可在神经母细胞中稳定地抑制miRNA‑200b
神经细胞 mir 200 表达病毒载体及其构建方法

[发明专利]一种pMini-CopGFP质粒载体的构建方法及其应用-CN202210615244.5在审
发明人：武志强;邱林 -专利权人：北京海创科业生物科技有限责任公司
申请日： 2022-05-31 - 公布日： 2022-08-23 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：本发明公开了一种pMini‑CopGFP质粒载体的构建方法及其应用，属于生物技术领域。该专门应运于mRNA体外剪接技术的质粒载体pMini‑CopGFP，此质粒具有单独的荧光蛋白CopGFP表达元件，不受验证基因影响，可以通过转染细胞后观察细胞的绿色发光情况确定质粒转染效率。
一种 pmini copgfp 质粒载体构建方法及其应用

[发明专利]一种高效介导Gα基因过表达的慢病毒载体和慢病毒及其构建方法-CN201610628996.X在审
发明人：夭建华;朱洲海;李雪梅;缪明明;米其利;管莹;高茜;刘欣 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2016-08-03 - 公布日： 2016-12-21 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明通过基因重组技术，以pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP慢病毒表达载体为基础进行构建，并整合有Gα基因，得到Gα基因过表达慢病毒载体pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑Gα。使用慢病毒包装质粒pLP/VSVG、pLP1和pLP2对Gα基因过表达慢病毒载体pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑Gα进行包装，通过转染HEK293细胞，得到Gα慢病毒。
一种高效基因表达病毒载体及其构建方法

[发明专利]基因工程改造外泌体递送miRNA-146a在糖尿病足溃疡治疗方面的应用-CN202010310861.5在审
发明人：柏玮;李志宏;郭雅楠;蒋彩云 -专利权人：百澳瑞派（天津）生物科技有限公司
申请日： 2020-04-20 - 公布日： 2020-07-24 - 主分类号： A61K31/7088 文献下载
摘要：本发明涉及一种基因工程改造外泌体递送miRNA‑146a在糖尿病足溃疡治疗方面的应用，包括：⑴构建质粒：以pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP慢病毒表达载体为基础，整合miRNA‑146a基因，得到miRNA‑146a过表达慢病毒载体pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑146a；⑵包装获得慢病毒，转染293T：使用慢病毒包装质粒pSPAX2和pMD2.G对pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑146a进行包装，转染293T细胞，富集高滴度的病毒液；⑶侵染脐带充间质干细胞：用包装好的病毒侵染脐带间充质干细胞，得到过表达miRNA‑146a的脐带间充质干细胞hucMSC‑146a
基因工程改造外泌体递送 mirna 146 糖尿病足溃疡治疗方面应用

[发明专利]一种T1R2基因过表达慢病毒载体、慢病毒及其构建方法-CN201610629256.8在审
发明人：朱洲海;夭建华;李雪梅;缪明明;高茜;米其利;管莹;唐萍 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2016-08-03 - 公布日： 2016-12-07 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明通过基因重组技术，以pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP慢病毒表达载体为基础进行构建，并整合有T1R2基因，得到T1R2基因过表达慢病毒载体pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑T1R2使用慢病毒包装质粒pRSV‑Rev、pMDLg‑pRRE和pMD2.G对T1R2基因过表达慢病毒载体pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑T1R2进行包装，通过转染HEK293细胞，得到T1R2
一种 t1r2 基因表达病毒载体及其构建方法

[发明专利]慢病毒介导的针对VEGF-C基因siRNA重组体970的构建及用途-CN201110440032.X无效
发明人：冯玉宽;胡静;潘艳明;曹艳丽;刘贵波;冯克俭;张雅芳 -专利权人：冯玉宽
申请日： 2011-12-26 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种针对VEGF-C基因的RNAi慢病毒表达载体介导的重组体pSIH1-H1-copGFP-VEGF-CsiRNA970的构建及其抑制非小细胞肺癌细胞VEGF-C基因表达的作用。DNA，并将其克隆到慢病毒表达载体pSIH1-H1-copGFPshRNAVector，并用酶切鉴定和DNA测序技术进行筛选，成功构建了慢病毒介导的针对VEGF-C基因siRNA重组体pSIH1-H1-copGFP-VEGF-CsiRNA970
病毒针对 vegf 基因 sirna 重组 970 构建用途

[发明专利]一种基因过表达的慢病毒载体构建方法及应用-CN202310941488.7在审
发明人：刘登辉;施荣辉;周金山 -专利权人：通用生物（安徽）股份有限公司
申请日： 2023-07-28 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种基因过表达的慢病毒载体构建方法及应用，属于细胞和基因治疗领域技术领域，选用pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑T2A‑Puro为慢病毒载体为基础，将5’LTR前端的启动子改造成CMV启动子，将后面的CMV启动子改造成CBH启动子，即所得基因过表达的慢病毒载体，将CBH启动子引入pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑copGFP‑T2A‑Puro质粒骨架中，其中CBH启动子是CAG
一种基因表达病毒载体构建方法应用

[发明专利]一种稳定表达猪圆环病毒2型ORF3蛋白细胞株的构建及应用-CN202110564919.3在审
发明人：陈洪博;陆灵光;邱龙新;段滇宁;邵丹;颜路琪 -专利权人：龙岩学院
申请日： 2021-05-24 - 公布日： 2021-08-17 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：构建方法包括以下步骤：（1）在pLVZG‑CMV‑copGFP‑Puro载体的NheI和BamHI多克隆位点插入PCV2 ORF3基因；（2）用构建好的pLVZG‑CMV‑ORF3‑copGFP‑Puro
一种稳定表达圆环病毒 orf3 蛋白细胞株构建应用

[发明专利]一种高效介导Lnc-MEG3基因过表达的慢病毒载体-CN201510077240.6在审
发明人：张怡堃;刘珊珊 -专利权人：中国人民解放军第306医院
申请日： 2015-02-13 - 公布日： 2015-06-03 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：该载体以pCDH-EF1-MCS-T2A-copGFP,及包装质粒pcDNA3.0-LNC-MEG3为基础构建，可产生较高的病毒滴度和表达量，可用于进一步的肿瘤研究和相关疾病治疗。
一种高效 lnc meg3 基因表达病毒载体

[发明专利]Anti-PD-L1-CAR-T及其制备方法和应用-CN201610881376.7有效
发明人：施炜星;杨春霞;杜盈;房永生 -专利权人：上海宇研生物技术有限公司
申请日： 2016-10-09 - 公布日： 2020-07-17 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明涉及Anti‑PD‑L1‑CAR‑T及其制备方法和应用，将PD‑L1抗体基因与CAR‑T的铰链区、跨膜区及胞内信号区基因片段合成，其构建载体为PCDH慢性病毒载体：pcDH‑CNV‑MCS‑EF1‑copGFP
anti pd l1 car 及其制备方法应用

[发明专利]稳定表达催产素受体人类星形胶质细胞的构建方法-CN201810522404.5有效
发明人：吴冈义;何耀俊;霍清伟 -专利权人：华南师范大学
申请日： 2018-05-28 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：同时该慢病毒载体还携带另一个绿色荧光蛋白基因copGFP，能标记星形胶质细胞的整体轮廓，方便对星形胶质细胞进行形态学相关的研究。
稳定表达催产素受体人类星形胶质细胞构建方法

[发明专利]一种环状RNA的高效表达方法及表达载体-CN202111518785.8在审
发明人：巫轲 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2021-12-13 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学技术领域，公开了一种环状RNA的高效表达方法及表达载体，克隆环状RNA全长序列至环状RNA表达载体pCRE5(puromysin筛选标记)或pCRE6(copGFP筛选标记)载体；RNA
一种环状 rna 高效表达方法载体

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