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[发明专利]基于电化学检测精子顶体酶活性的方法及试剂盒-CN201510206304.8有效
发明人：黄又举;陈涛;荣运 -专利权人：中国科学院宁波材料技术与工程研究所
申请日： 2015-04-27 - 公布日： 2019-04-05 - 主分类号： G01N27/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于电化学检测精子顶体酶活性的方法，其包含：将精子顶体酶底物修饰的电极分别于含有不同浓度精子顶体酶标准样品中充分浸渍，并分别测试所述电极的阻抗，由此建立活性精子顶体酶浓度与电极阻抗的标准曲线；以及，将所述电极分别于含有未知浓度精子顶体酶的待测样品中充分浸渍，并测试所述电极的阻抗，再依据所述标准曲线而获知所述待测试样中精子顶体酶的浓度；其中所述标准样品和待测样品均以适于使精子顶体酶专一结合并水解所述精子顶体酶底物的缓冲液作为溶剂藉由本发明的试剂盒及检测方法，能快速(3min左右)、可靠、灵敏(检测限可达0.001μM)且低成本的检测精子顶体酶的活性。
基于电化学检测精子顶体酶活性方法试剂盒

[发明专利]基于LSPR检测精子顶体酶活性的方法、试剂盒及其应用-CN201510116466.2有效
发明人：黄又举;陈涛;荣运 -专利权人：中国科学院宁波材料技术与工程研究所
申请日： 2015-03-17 - 公布日： 2018-03-09 - 主分类号： C12Q1/37 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于LSPR检测精子顶体酶活性的方法、试剂盒及其应用。其中，该试剂盒包含功能化纳米金标记精子顶体酶底物，包含纳米金以及通过化学键合和/或物理吸附方式固定在纳米金表面的精子顶体酶底物；以及，适于使所述精子顶体酶底物与精子顶体酶专一结合并进行反应的缓冲液。藉由本发明的试剂盒及检测方法，能快速(约3分钟左右)、可靠、灵敏且低成本的检测精子顶体酶的活性。
基于 lspr 检测精子顶体酶活性方法试剂盒及其应用

[发明专利]一种精子顶体酶的提取方法-CN201910117692.0在审
发明人：李明磊;傅剑华;蔡华;曾周祥;蔡栋;庄兴华;邹玮 -专利权人：深圳华康生物医学工程有限公司
申请日： 2019-02-15 - 公布日： 2019-04-12 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明提供了一种精子顶体酶的提取方法，所述方法包括以尿素溶液作为萃取剂，采用液‑固萃取技术将精子顶体酶萃取至液体中，并添加了顶体酶稳定剂保持酶的活性；本发明通过优选萃取剂和顶体酶稳定剂，并优化浓度配比，使其不损失酶活的前提下简化操作步骤，使顶体酶保存期达到14天以上；本发明工艺简单，可实现工业化大规模生产，可为企业带来良好的经济效益，具备广阔的前景。
精子顶体酶顶体酶稳定剂萃取剂简化操作步骤尿素溶液浓度配比萃取技术保存期酶活萃取优选优化

[发明专利]精子顶体酶活性定量检测试剂及检测方法-CN200410040527.3无效
发明人：傅剑华;刘瑜;胡家纯;何林;何小红 -专利权人：深圳华康生物医学工程有限公司
申请日： 2004-08-19 - 公布日： 2006-02-22 - 主分类号： G01N33/50 文献下载
摘要：本发明公开一种精子顶体酶活性定量检测试剂，包括抑制剂、缓冲液、终止液和底物液，所述底物液是含有N－α－苯甲酰－DL－精胺酸－ρ－硝酰基苯胺的二甲基甲酰胺溶液，所述缓冲液是含有牛血清白蛋白和吐温20的去离子水溶液还公开一种用精子顶体酶活性定量检测试剂进行检测的方法，根据N－α－苯甲酰－DL－精胺酸－ρ－硝酰基苯胺被顶体酶分解后的产物硝酰基苯胺的摩尔吸光系数计算顶体酶的活性，实现了顶体酶活性的定量检测；由于N－α－苯甲酰－DL－精胺酸－ρ－硝酰基苯胺是精子顶体酶催化反应的最适底物，可以加快酶的反应速度，吐温20破坏精子膜，便于顶体酶的暴露，通过上述两种物质的协同作用，在1小时内即可完成反应。
精子顶体酶活性定量检测试剂方法

[发明专利]精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法-CN202110566274.7在审
发明人：张旭东;李冬梅;孟令敏;高威;孙成艳 -专利权人：迪瑞医疗科技股份有限公司
申请日： 2021-05-24 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： G01N33/573 文献下载
摘要：本发明涉及一种精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，属于体外检测技术领域。本发明的精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒包括：链霉亲和素带有Tosyl官能团磁颗粒、化学发光标记物标记的精子顶体酶抗体和偶联标记物标记的精子顶体酶抗体。本发明的精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成对精子顶体酶的检测。这种化学发光免疫分析试剂盒与仪器配套，缩短了临床检测所需的时间。
精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

[发明专利]一种用于检测精子顶体酶活性的蛋白微球偶联物及其制备方法和应用-CN201610487312.9在审
发明人：曾桥;许毅;李翼飞;李德才;房海燕;薛金锋 -专利权人：浙江星博生物科技股份有限公司
申请日： 2016-06-27 - 公布日： 2016-11-23 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明一种用于检测精子顶体酶活性的蛋白微球偶联物及其制备方法和应用，特点是通过制备精子顶体反应底物卵透明带蛋白及荧光素结合的单分散微米级微球，借助荧光强度的变化对精子顶体酶活性进行检测，具体分为表面羧基化或是氨基化修饰的单分散微球准备、表面改性、蛋白多肽的荧光标记、荧光蛋白多肽与功能微球的偶联及精子顶体酶活性的检测，优点是通过高分子微球技术和蛋白标记偶联技术实现了在微球上进行蛋白酶切并进行酶活性的评估，主要应用于精子顶体酶活性的流式检测，可以实现精子顶体反应和顶体酶活性的同步检测，能更真实准确的对精子顶体功能进行评价。
一种用于检测精子顶体酶活性蛋白微球偶联物及其制备方法应用

[发明专利]一种人体精子顶体酶药盒-CN201711040221.1有效
发明人：高晓勤;戴研平;马晓萍;杨喆;杨建辉;郑立宏;杨丹;杨燕平 -专利权人：高晓勤;遵义医药高等专科学校
申请日： 2017-10-30 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C12Q1/37 文献下载
摘要：本发明属于精子顶体酶测量技术领域，公开了一种人体精子顶体酶药盒，将明胶混合液制成溶胶状基质液，涂制固定成均匀底膜，显示顶体酶(Acroin)的活性；将精子在超薄明胶底膜上孵育，离心及磷酸盐缓冲液清洗去除膜抑制因子精子顶体解聚，释放并溶解‑明胶基质膜，形成围绕在精子前部周围的孔区；通过光镜观察，光线穿透孔区，在精子头周围看到明亮的晕环，在染色后深紫蓝色背景的衬托下，观察到酶反应，测量每个亮环直径的大小来估计单个精子顶体酶活性的强弱本发明方法简单且成本低，准确计算顶体酶的阳性反应率，为试管婴儿技术筛选出活性更强的精子，提高成功率。
一种人体精子顶体酶药盒

[发明专利]一种精子顶体酶活性定量检测方法及试剂盒-CN201110181343.9有效
发明人：胡家纯;钟彩颜;王希上;张翔;程锦军;庄学敏 -专利权人：深圳市博锐德生物科技有限公司
申请日： 2011-06-30 - 公布日： 2013-04-03 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明涉及一种精子顶体酶活性的固相滤膜检测方法，包括将精子吸附于固相滤膜表面；以离心或倾倒的方法去除固相滤膜表面除精子之外的液体和杂质；启动顶体酶活性检测反应：吸附于固相滤膜表面的精子与底物溶液接触，启动顶体酶活性检测反应；4～40℃反应30～120分钟；将底物与固相表面精子分离或者加入质控终止液；反应产物比色；通过比色得到的吸光光度值计算顶体酶活性；本发明还涉及一种精子顶体酶活性定量检测试剂盒。
一种精子顶体酶活性定量检测方法试剂盒

[发明专利]异噁唑类新型顶体酶抑制剂及其制备方法-CN201310148048.2有效
发明人：吕加国;赵军涛;苏定冯;朱驹;周有骏;刘建国;盛春泉;吕狄亚;陈倩倩;田巍;郑灿辉;宋云龙;章玲;李唯;陈莎娜 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学
申请日： 2013-04-25 - 公布日： 2014-10-29 - 主分类号： C07D261/18 文献下载
摘要：本发明涉及一类新型的顶体酶抑制剂、其制备方法及其在制备男性抗生育药物中的应用。具体的，本发明涉及一类如式Ⅰ所示的新型的顶体酶抑制剂，其中各取代基的定义如说明书中所述。本发明还涉及所述顶体酶抑制剂的制备方法及其在制备男性抗生育药物中的应用。
异噁唑类新型顶体酶抑制剂及其制备方法

[发明专利]吡唑类新型顶体酶抑制剂及其制备方法-CN201310148061.8有效
发明人：吕加国;赵军涛;苏定冯;朱驹;周有骏;刘建国;盛春泉;吕狄亚;陈倩倩;田巍;郑灿辉;宋云龙;章玲;李唯;陈莎娜 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学
申请日： 2013-04-25 - 公布日： 2014-10-29 - 主分类号： C07D231/14 文献下载
摘要：本发明涉及一类新型的顶体酶抑制剂、其制备方法及其在制备男性抗生育药物中的应用。具体的，本发明涉及一类如式Ⅰ所示的新型的顶体酶抑制剂，其中各取代基的定义如说明书中所述。本发明还涉及所述顶体酶抑制剂的制备方法及其在制备男性抗生育药物中的应用。
吡唑新型顶体酶抑制剂及其制备方法

[发明专利]精子顶体酶的快速提取方法及其活性的流式检测方法-CN201710302258.0有效
发明人：房海燕;高攀;陈继勇;薛志刚 -专利权人：浙江星博生物科技股份有限公司
申请日： 2017-05-02 - 公布日： 2020-04-21 - 主分类号： G01N1/34 文献下载
摘要：本发明公开了精子顶体酶的快速提取方法及其活性的流式检测方法，特点是提取方法包括将精液加入到离心管中，离心吸去精浆部份，保留下层精子沉淀，然后加入破膜液，使精子沉淀团均匀悬浮后，离心去掉上清，然后加入提取液，使精子悬浮，再离心3收集上清，即获得顶体酶提取物，其活性的流式检测方法为通过多肽或蛋白微球偶联技术和多肽或蛋白荧光标记技术，采用将顶体酶酶切底物进行荧光标记后连接到微球上，一定粒径的荧光微球能被流式细胞仪所识别，荧光强弱直接反应了样本中顶体酶活性的高低，优点是通过快速提取和流式检测结合，使得检测效率大大提高，增加了检测的灵敏性。
精子顶体酶快速提取方法及其活性检测

[发明专利]9-取代-2-氨基-6-胍基嘌呤类化合物及其制备和应用-CN201010148253.5无效
发明人：吕加国;张晓梦;周有骏;朱驹;宋云龙;薛博亮;盛春泉;吴蕴琦;郑灿辉;付小旦;刘雪飞;祈晶晶 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学;黑龙江成功药业有限公司
申请日： 2010-04-15 - 公布日： 2010-12-01 - 主分类号： C07D473/16 文献下载
摘要：本发明公开了9-取代-2-氨基-6-胍基-嘌呤类化合物VI，经体外测活试验，检验了26个相关化合物与具有生育活性的人精子顶体酶作用，通过改良的Kennedy法检测残余酶活性。并与经典的顶体酶抑制剂TLCK作比较。结果表明：所有测试的化合物对人精子顶体酶均具有抑制活性，且都比阳性对照品TLCK抑制活性强，研究证实，它们的抗生育活性强，可用于制备抗生育药物。
取代氨基嘌呤化合物及其制备应用

[发明专利]一种柞蚕育种材料的筛选方法及其应用-CN202111279977.8有效
发明人：陈欣;陈俊山;刘佩锋;刘书禹;徐亮;谌苗苗;王恩煜 -专利权人：辽宁省蚕业科学研究所
申请日： 2021-10-29 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明属于蚕育种技术领域，尤其为一种柞蚕育种材料的筛选方法及其应用，通过选取不同品种柞蚕育种材料，获取雌雄种蛾交配过程中产生的精液，对采集备用的精液进行顶体酶活性测定，并在各品种育种材料的雌蛾产卵后，统计各品种的柞蚕卵实用孵化率，根据各品种精子顶体酶活性与柞蚕卵实用孵化率之间的关系，建立回归方程，在柞蚕“二化一放”生产时期，可测得不同品种育种材料的柞蚕精子顶体酶活性，根据所建立的线性回归方程来预测蚕卵实用孵化率，从而筛选出蚕卵实用孵化率高的雄性育种材料
一种柞蚕育种材料筛选方法及其应用

[发明专利]喹唑啉酮衍生物及制备方法和应用-CN201010148247.X无效
发明人：吕加国;宁微微;朱驹;周有骏;宋云龙;薛博亮;盛春泉;吴蕴琦;郑灿辉;章玲;刘雪飞;祈晶晶 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学;黑龙江成功药业有限公司
申请日： 2010-04-15 - 公布日： 2010-12-01 - 主分类号： C07D239/91 文献下载
摘要：通过测试本发明各个目标化合物的体外抑制人精子顶体酶活性，结果表明，与公开报道的顶体酶抑制剂TLCK(N-甲苯磺酰-L-赖氨酰-氯甲基酮)相比较，所有目标化合物对人精子顶体酶均具有抑制活性。
喹唑啉酮衍生物制备方法应用

[实用新型]酶联免疫试剂盒-CN202220500785.9有效
发明人：樊菲 -专利权人：中科迪生（天津）科技发展有限公司
申请日： 2022-03-09 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： B65D25/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及酶联免疫试剂盒相关技术领域，尤其涉及酶联免疫试剂盒。所述酶联免疫试剂盒包括盒体和盒盖，且所述盒体与盒盖相连接，所述盒盖的顶部安装有把手，所述盒体内部嵌合有放置板，且所述放置板的底部与盒体的内底壁之间连接有若干个连接组件。本实用新型提供的酶联免疫试剂盒，能够将试剂于盒体内顶升出，从而以便于操作者对盒体内的试剂进行拿取，进而提高了工作的效率，以便于使用。
免疫试剂盒

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