本发明公开了用于鉴别肠球菌属内四个种的特异性分子靶标及其快速检测方法,分子靶标为:碱基序列SEQ ID NO.1‑7为酪黄肠球菌的分子靶标、碱基序列SEQ ID NO.8‑27为粪肠球菌的分子靶标、碱基序列SEQ ID NO.28‑32为屎肠球菌的分子靶标、碱基序列SEQ IDNO.33‑58为希拉肠球菌的分子靶标。检测方法:根据58个特异性分子靶标中的任一个分子靶标来设计特异性扩增引物对;提取样品DNA,PCR法扩增;凝胶电泳检测扩增产物,如电泳结果出现相应的单一扩增条带,则判断样品中含有目标菌,反之则判断样品中不含目标菌