本发明属于基因工程技术领域,公开了高产低温过氧化氢酶的希瓦氏菌WP3突变菌株及其构建方法和应用,以希瓦氏菌株WP3Δ4RE为出发菌株,敲除oxyR基因(如SEQ ID NO:1所示)内的部分基因片段(如SEQ ID NO:6所示),解除对过氧化氢酶基因表达的抑制作用,得到基因突变菌株ΔoxyRc;同时优化ΔoxyRc发酵生产低温过氧化氢酶的工艺提高产量。相比于WP3Δ4RE,ΔoxyRc的过氧化氢酶产量提高了3098倍,其胞内酶活可达34133U/mL,比活力达19022U/mg,用于提高纺织、造纸、食品和医药领域所需低温过氧化氢酶的产量,克服野生菌株生产低温过氧化氢酶产量较低的问题
本发明属于基因工程技术领域,公开了重组低温过氧化氢酶及其重组载体和工程菌,来源于深海微生物菌株Shewanella piezotolerans WP3的低温过氧化氢酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,其编码基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,通过构建重组载体并转化至大肠杆菌中获得重组基因工程菌,诱导培养得到重组过氧化氢酶。本发明的重组过氧化氢酶最适温度为4~10℃,最适反应pH值为8~9,纯化后的重组过氧化氢酶10℃时酶活性达43715U/mg和4℃时酶活性达45318U/mg,高于现有的大多数低温过氧化氢酶,适用于食品