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[发明专利]松毛虫质型多角体病毒油剂的浓缩方法-CN201910718047.4在审
发明人：陈鹏 -专利权人：云南省林业科学院
申请日： 2019-08-05 - 公布日： 2019-11-01 - 主分类号： A01N25/14 文献下载
摘要：本发明公开了松毛虫质型多角体病毒油剂的浓缩方法，包括以下步骤：首先，对携带有松毛虫质型多角体病毒的松毛虫进行处理，分离并制得松毛虫质型多角体病毒的溶液；其次，将分离出来的松毛虫质型多角体病毒进行浓缩，制得松毛虫质型多角体病毒的浓缩液本发明中，在浓缩的过程中先通过离心处理将水分快速出去，在通过真空低温干燥在高度浓缩的同时保证松毛虫质型多角体病毒的高度活性，从而变相提高粉剂中的有效成分，同时在松毛虫质型多角体病毒的浓缩液中添加浓缩液，
松毛虫质型多角体病毒浓缩浓缩液油剂真空低温干燥松毛虫可湿性粉剂充分混合高度活性离心处理时间延长粉剂研磨除虫挥发病毒保存携带保证

[发明专利]一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法-CN201810535576.6有效
发明人：贡成良;曹广力;薛仁宇;胡小龙;余蕾;冯永杰 -专利权人：苏州大学
申请日： 2018-05-30 - 公布日： 2020-12-04 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化；以及7）将线性化质粒等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染表达T7 RNA聚合酶的宿主细胞，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，为体外获取家蚕质型多角体病毒提供新方法，而且也可以为构建重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供理论指导和技术支撑
一种基于 dna 载体家蚕质型多角体病毒体外构建方法

[发明专利]一种家蚕质型多角体病毒的体外构建方法-CN201510209183.2有效
发明人：贡成良;薛仁宇;曹广力;胡小龙;郭睿 -专利权人：苏州大学
申请日： 2015-04-28 - 公布日： 2018-03-30 - 主分类号： C12N15/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化后，经过体外转录，获得RNA；以及7）将RNA等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染宿主，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，也可以为重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供技术支持。
一种家蚕质型多角体病毒体外构建方法

[发明专利]一株豆天蛾质型多角体病毒毒株及其增殖方法与应用-CN202110237186.2有效
发明人：占智高;关丽梅;况文东;王金昌;靳亮;陈俊晖 -专利权人：江西省科学院微生物研究所
申请日： 2021-03-03 - 公布日： 2022-11-22 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一株豆天蛾质型多角体病毒毒株及其增殖方法，所述的毒株为豆天蛾质型多角体病毒；保藏名称为豆天蛾质型多角体病毒CbCPV。本发明所述的豆天蛾质型多角体病毒能够有效控制豆天蛾危害，一次施用后持续作用，能够维持两到三年不发生豆天蛾危害，不仅生产方便，减少化学农药使用，且对环境友好，可以大大减轻大豆生产中的豆天蛾危害，助力我国大豆生产虫口夺粮工作
一株豆天蛾质型多角体病毒及其增殖方法应用

[发明专利]利用替代宿主生产松毛虫质型多角体病毒杀虫剂的方法-CN99116353.2无效
发明人：孟小林;姜小文;徐进平;叶林柏;郜金荣;钟铁柱 -专利权人：武汉大学
申请日： 1999-02-10 - 公布日： 2003-10-29 - 主分类号： A01N63/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产松毛虫质型多角体病毒(CPV)杀虫剂的方法，该方法是利用银纹夜蛾作为生产松毛虫质型多角体病毒的替代宿主，用人工饲料群体饲养银纹夜蛾，用松毛虫质型多角体病毒感染后收集患病死虫，再经后处理加工制备松毛虫质型多角体病毒杀虫剂
利用替代宿主生产松毛虫质型多角体病毒杀虫剂方法

[发明专利]基于杆状病毒表达系统制备包裹鲤疱疹病毒II型抗原的多角体的方法-CN201710109641.4有效
发明人：贡成良;曹广力;胡小龙;薛仁宇;刘波;李坤 -专利权人：苏州大学
申请日： 2017-02-27 - 公布日： 2020-06-16 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明涉及抗原蛋白表达技术，具体涉及基于杆状病毒表达系统制备包裹鲤疱疹病毒II型抗原的多角体的方法，通过设计重组家蚕核型多角体病毒BmNPV‑VP3‑cyHV‑polh，ORF72、ORF66、ORF81和ORF82的1‑186、993‑1197、603‑783、85‑186区域序列与家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP3基因1‑279区域的编码序列串联融合序列由杆状病毒P10启动子控制；家蚕质型多角体蛋白基因由杆状病毒的多角体蛋白基因启动子控制用该病毒接种家蚕或家蚕培养细胞，重组病毒表达的鲤疱疹病毒II型的抗原蛋白可包裹进家蚕质型多角体内。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；纯化的多角体在碱性条件下裂解后，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而鲤疱疹病毒II型抗原留存在上清中，从而可以快速、方便地获得鲤疱疹病毒II型抗原。
基于杆状病毒表达系统制备包裹疱疹病毒 ii 抗原多角体方法

[发明专利]一种松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂及其制备方法和应用-CN201711234385.8在审
发明人：靳亮;黄朝;梁小文;王金昌;关丽梅;占智高;曾升华 -专利权人：江西省科学院微生物研究所
申请日： 2017-11-30 - 公布日： 2018-04-20 - 主分类号： A01N63/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂及其制备方法和应用，本发明的一种松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂，包括有效活性成分，所述活性成分为松毛虫质型多角体病毒悬液和球孢白僵菌粉，所述活性成分占总制剂的质量百分比含量的
一种松毛虫质型多角体病毒白僵菌杀虫悬浮及其制备方法应用

[发明专利]一组应用于检测家蚕质型多角体病毒的引物及检测方法-CN201110085935.0有效
发明人：刘吉平;王永宾 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2011-04-07 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一组应用于检测家蚕质型多角体病毒的引物及检测方法。本发明提供了一对特异的引物BmCPVf和BmCPVr，设计RT-PCR扩增程序，实现对家蚕质型多角体病毒的准确、快捷的检测。本发明方法特异性强，检测快速准确，适于小量样本操作，操作简单，使用本发明方法能够满足对家蚕质型多角体病毒BmCPV进行分子诊断的需要，为生产上早期检测和预知检查家蚕中肠型脓病提供了技术基础。
一组应用于检测家蚕质型多角体病毒引物方法

[发明专利]松毛虫质型多角体病毒油剂的生产方法-CN03114048.3无效
发明人：林思诚;崔锡明;陈昌洁;赵同海;梁云芳;任惠;柯沛强 -专利权人：茂名市林业科学研究所;中国林业科学研究院森林保护研究所
申请日： 2003-03-26 - 公布日： 2003-10-08 - 主分类号： A01N63/00 文献下载
摘要：一种松毛虫质型多角体病毒油剂的生产方法，把感病松毛虫中肠的病毒多角体从虫体分离出来，并与其它固相物质分开，然后加工浓缩，加入溶剂乙二醇、助悬剂十二烷基苯磺酸钠混配搅拌、研磨而制得。其松毛虫质型多角体病毒的纯度高、粒度小，悬浮效果好，解决了沉淀分层、阻塞喷头的问题，从而满足超低容量喷雾的要求，按照本方法制成的松毛虫质型多角体病毒油剂，杀虫率达到92％以上，其生产成本低、不污染环境、
松毛虫质型多角体病毒生产方法

[发明专利]昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法-CN201310595964.0有效
发明人：袁林;郭建军;杨一兵;魏国汶 -专利权人：江西省科学院微生物研究所
申请日： 2013-11-22 - 公布日： 2014-03-05 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法，将家蚕质型多角体病毒（BmCPV）的多角体基因（polyhedrin）以及目的蛋白基因分别构建至pFastBac Dual载体上的PH和P10启动子下面，通过重组获得同时表达多角体和目的蛋白的杆状病毒。本发明利用杆状病毒表达系统，同时将质型多角体蛋白基因和目的蛋白基因分别构建到pFastBacTMDual载体的PH与p10启动子下，并在目的蛋白与信号肽之间引入柔性链接肽，通过与病毒骨架重组，获得重组杆状病毒通过该单一病毒感染Sf9或Sf21昆虫细胞，直接可以在细胞内产生所需要的包裹型蛋白，并且这种重组型的病毒也同样可以获得扩增。
昆虫病毒多角体实现蛋白高效包裹方法

[发明专利]一种硅藻土-松毛虫质型多角体病毒可湿性粉剂-CN202010114362.9在审
发明人：陈瑞明 -专利权人：本生（惠州）生物技术有限公司
申请日： 2020-02-25 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： A01N25/08 文献下载
摘要：本发明涉及到农药领域，具体涉及到一种硅藻土‑松毛虫质型多角体病毒可湿性粉剂，至少包括药物组合物、润湿剂、分散剂、填料，其中药物组合物包括硅藻土和松毛虫质型多角体病毒两种成分，二者的重量比例为(1：60)本发明提供的硅藻土‑松毛虫质型多角体病毒可湿性粉剂解决了松毛虫质型多角体病毒见效慢、硅藻土不具备表面活性等问题，粉剂热贮稳定性好，均匀疏松，不易团聚结块，兑水稀释易分散润湿，悬浮率高，在植物表面的浸润铺展性较好
一种硅藻土松毛虫质型多角体病毒可湿性粉剂

[发明专利]一种松毛虫质型多角体病毒油剂及其制备方法和应用-CN201510084508.9有效
发明人：陈鹏;槐可跃;胡光辉;陆斌;卢南;王忠祥;杜春花;袁瑞玲;王艺璇;陈强 -专利权人：云南省林业科学院
申请日： 2015-02-16 - 公布日： 2017-07-07 - 主分类号： A01N63/02 文献下载
摘要：本发明公开一种松毛虫质型多角体病毒油剂及其制备方法和应用。该松毛虫质型多角体病毒油剂通过浸泡、切碎、洗脱过滤、离心分离、真空干燥、混配、分装制得。真空干燥机是在28‑35℃，负0.9个大气压下，真空干燥10‑15小时得到松毛虫质型多角体病毒浓缩液，除去了该油剂的恶臭异味，使该产品易于推广应用。所述混配是加入皂化甘油及分析纯活性炭。制成的油剂中松毛虫质型多角体病毒的含量为15亿PIB/ml以上，其病毒的致病力强，延长了油剂的保质期，可保质3‑4年。
一种松毛虫质型多角体病毒及其制备方法应用

[发明专利]一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法-CN202111499178.1在审
发明人：贡成良;薛仁宇;胡小龙;朱敏;曹广力;张梓瑶;冯永杰 -专利权人：苏州大学
申请日： 2021-12-09 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明涉及固定化蛋白领域，具体涉及一种制备包裹外源蛋白的多角体的方法。通过基因工程方法利用杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞或家蚕中共表达家蚕质型多角体蛋白、带有家蚕质型多角体病毒结构蛋白VP5标签以及蛋白酶特异性断裂位点的融合外源蛋白，从而形成包裹外源蛋白质的多角体。形成的多角体可以通过简单的差速离心实现纯化；多角体对其包裹的外源蛋白有保护和缓释作用。纯化的多角体在碱性条件下裂解后，用盐酸溶液调pH至多角体蛋白等电点，可以通过离心使多角体蛋白沉淀，而融合外源蛋白留存在上清中，从而可以快速、方便地获得融合外源蛋白；融合外源蛋白通过相应的蛋白酶酶切移除VP5
一种制备包裹蛋白多角体方法

[发明专利]用于家蚕核型多角体病毒、质型多角体病毒二重PCR检测引物及其应用与试剂盒-CN202110812553.7在审
发明人：张振东;郭锡杰;吴萍;沈曼曼;俄广晓;赵泽 -专利权人：江苏科技大学
申请日： 2021-07-19 - 公布日： 2021-10-01 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了用于家蚕核型多角体病毒、质型多角体病毒二重PCR的检测引物及其应用与试剂盒，属于家蚕养殖技术领域。本发明所述的检测引物包括SEQ ID NO.1～4所示的引物。本发明还公开了家蚕核型多角体病毒、质型多角体病毒二重PCR检测方法及检测试剂盒。
用于家蚕核型多角体病毒质型多角体二重 pcr 检测引物及其应用试剂盒

[发明专利]抗菌肽Hclocidin18在大肠杆菌中的表达方法-CN201310639841.2无效
发明人：相兴伟;周宇芳;江玲丽;杨会成;孔寅飞;郑斌 -专利权人：浙江省海洋开发研究院
申请日： 2013-12-04 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术及生物医药技术领域，特别涉及一种抗菌肽Hclocidin18在大肠杆菌中的表达方法.一种抗菌肽Hclocidin18在大肠杆菌中的表达方法，其特征在于包括如下步骤：a、质粒构建：采用大肠杆菌进行重组质粒构建，以家蚕质型多角体病毒BmCPV的多角体蛋白作为融合伴侣；b、诱导表达；c、重组质粒编码的融合蛋白的纯化；d、融合蛋白的裂解和抗菌肽Hclocidin18的收集。本发明以家蚕质型多角体病毒（BmCPV）的多角体蛋白作为融合伴侣在大肠杆菌中成功表达了抗菌肽Hclocidin18，同时利用多角体蛋白的碱溶解特性实现了抗菌肽Hclocidin18的高效回收。
抗菌 hclocidin18 大肠杆菌中的表达方法

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