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[发明专利]基于线扫描拉曼显微成像的藻细胞计数及藻种判别方法-CN201610845672.1有效
发明人：何石轩;谢婉谊;方绍熙;王德强 -专利权人：中国科学院重庆绿色智能技术研究院
申请日： 2016-09-23 - 公布日： 2019-03-08 - 主分类号： G01N21/65 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于线扫描拉曼显微成像的藻细胞计数及藻种判别方法，包括制备藻细胞检测计数板、藻细胞样本的预处理、藻细胞成像、基于藻细胞拉曼成像的藻细胞计数以及藻种的识别。本发明提供的一种基于线扫描拉曼显微成像及多元数据挖掘的藻细胞计数及藻种判别分析方法，可实现藻液中细胞的计数及藻种的快速判别分析，易于实现藻细胞的准确计数及藻种的同步快速识别。
基于扫描显微成像细胞计数判别方法

[发明专利]一种藻细胞破壁处理的方法-CN201710990421.7在审
发明人：孙晶 -专利权人：宁波大红鹰学院
申请日： 2017-10-23 - 公布日： 2017-12-22 - 主分类号： C12N1/06 文献下载
摘要：本发明属于微藻生物技术领域。一种藻细胞破壁的方法，依次包括下述步骤(1)将微藻细胞置于适合微藻细胞生长的培养基内，在其培养基内加入的金属离子，在微藻细胞在生长过程中，部分金属离子会经过物理吸附作用而吸附在微藻细胞壁表面；部分金属离子会通过与微藻细胞壁表面的带电电荷发生反应而吸附到细胞壁表面；剩余的部分金属离子会经由微藻细胞壁表面的转运蛋白而吸附到细胞壁上；(2)将吸附了金属离子的微藻细胞培养直至收获，将微藻细胞固体与培养基液体分离；(3)将收获的藻细胞液用常压微波进行破壁处理，得到经过破壁处理的微藻细胞本发明的藻细胞破壁的方法可以提高藻细胞的微波破壁处理效果。
一种细胞处理方法

[发明专利]一种快速评判微藻细胞生长活力的方法-CN200910201717.1无效
发明人：黄旭雄;黄征征 -专利权人：上海海洋大学
申请日： 2009-10-23 - 公布日： 2011-05-04 - 主分类号： C12Q1/42 文献下载
摘要：本发明公布了一种通过测定细胞总ATP(T-ATP)酶活性来快速评价微藻细胞生长活力的方法。其特征是取待评价生长活力的微藻藻液，4℃离心，弃上清后取藻细胞，加生理盐水制成106细胞/ml的藻细胞悬液并准确计数细胞浓度，用超声波细胞破碎机在冰水浴条件下将藻细胞破碎，测定每100万藻细胞的总ATP采用本发明所评价的藻细胞活力结果(UT-ATP/100万细胞)与藻细胞生长能力(生长常数K)存在极显著的线性回归关系。处于指数生长期的藻细胞活力(UT-ATP/100万细胞)最大，处于延缓期的藻细胞活力(UT-ATP/100万细胞)稍低，死亡期的细胞活力(UT-ATP/100万细胞)最小。本发明操作方便，简单快捷，可即时评价藻细胞生长活力。
一种快速评判细胞生长活力方法

[发明专利]一种微藻固定化养殖中的控温方法-CN201410352399.X在审
发明人：张蕊;张惠敏;张凯;刘敏胜;韩春梅;陈昱;吴洪 -专利权人：新奥科技发展有限公司
申请日： 2014-07-23 - 公布日： 2014-11-19 - 主分类号： C12N1/12 文献下载
摘要：本发明提供了一种微藻固定化养殖中的控温方法，属于微藻培养领域，以对微藻固定化培养过程中的藻体进行控温。所述微藻固定化养殖中的控温方法，包括：监测固定化养殖面上的培养基的流入处的藻细胞的温度及流出处的藻细胞的温度；判断所述培养基的流入处的藻细胞的温度及流出处的藻细胞的温度是否介于藻细胞的生长温度范围内；根据判断结果调整培养基的温度，以使所述流入处的藻细胞的温度及流出处的藻细胞的温度介于藻细胞的生长温度范围内。本发明可用于大规模的微藻养殖中。
一种固定养殖中的方法

[发明专利]一种藻细胞固定方法和应用-CN202211181231.8在审
发明人：张海平;崔亚飞;宋辰煜;黄帆;崔婧嫄;瞿尧 -专利权人：同济大学
申请日： 2022-09-27 - 公布日： 2022-11-22 - 主分类号： C12N11/02 文献下载
摘要：本发明涉及藻细胞生物学技术领域，尤其是涉及一种藻细胞固定方法和应用。本发明为了解决缺乏有效的单个藻细胞的观察方法，同时构造一个可控和连续的生长环境和观察条件，为研究环境因素对藻细胞生理影响提供细胞尺度的详细信息，本发明提出的藻细胞固定方法，其包括藻细胞固定剂的滴放、摊匀、干化以及藻细胞的注入、沉降、着床。本发明通过藻细胞自由沉降与固定剂吸附结合，保证了藻细胞的形态完整、并且不影响藻细胞生理活性，同时为藻细胞提供了一个可控和连续的生长环境和观察条件，借助显微技术和计算机视觉技术，可以实现对藻类细胞层面的研究
一种细胞固定方法应用

[发明专利]一种单细胞水平快速鉴定微藻的方法-CN201410157736.X无效
发明人：徐健;何曰辉;籍月彤;王婷婷;王允;黄巍 -专利权人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所
申请日： 2014-04-17 - 公布日： 2014-07-23 - 主分类号： G01N21/65 文献下载
摘要：本发明涉及微藻鉴定领域，具体是一种基于单细胞拉曼光谱的在单细胞水平快速鉴定微藻的方法。采集微藻细胞的单细胞拉曼光谱，建立微藻单细胞拉曼光谱数据库，根据未知微藻的单细胞拉曼光谱与建立的微藻单细胞拉曼光谱数据库进行比对进而在单细胞水平实现微藻鉴定或突变体筛选。本发明利用单细胞拉曼光谱技术鉴定微藻，提供了一种简单、快速、非侵入的在单细胞水平鉴定微藻的方法，为微藻鉴定和突变体筛选提供了一种高效的判别方法。
一种单细胞水平快速鉴定方法

[发明专利]单细胞藻的浓缩方法-CN98110301.4无效
发明人：孙晋廷;夏建平;张小葵;许晋功;郝永峰 -专利权人：威海市海洋技术开发中心
申请日： 1998-06-19 - 公布日： 2003-09-03 - 主分类号： C12N1/12 文献下载
摘要：一种单细胞藻的浓缩方法，涉及水产养殖类，本发明技术特征是，将单细胞藻原藻液快速升温至40℃抑制单细胞藻活动力，向所述的单细胞藻原藻液中加入75PPM～300PPM明矾，单细胞藻随明矾的水解而聚合下沉，弃除上清液后形成一级单细胞藻浓缩液，将所述一级单细胞浓缩液快速降温至0℃～-1℃，弃除上清液后形成单细胞藻浓缩液。本发明浓缩速度快、成本低，简便易行，浓缩后的单细胞藻储存后，可随时用于水产人工育苗。
单细胞浓缩方法

[发明专利]测定藻细胞中岩藻黄素含量的方法-CN201911266842.0有效
发明人：林娟;籍月彤;曹黎;吴明灿;徐健;韩丹翔;胡强 -专利权人：国投生物科技投资有限公司
申请日： 2019-12-11 - 公布日： 2023-01-10 - 主分类号： G01N21/65 文献下载
摘要：本发明涉及理化检测领域，公开了一种藻细胞中岩藻黄素含量的分析方法，该方法包括两个途径，一个途径通过建立藻细胞样品提取液中通过化学法测得的含量与拉曼光谱测定的藻细胞提取液的特征峰的线性回归方程，一个途径通过建立通过化学法测得的单个藻细胞的岩藻黄素的含量与拉曼光谱测定的单个藻细胞的特征峰的线性回归方程；通过得到的线性回归方程检测单个藻细胞中岩藻黄素的含量。该方法能够快速无损的检测藻细胞中岩藻黄素的含量，不需要进行复杂的数据处理和分析，且灵敏度高、准确度高，可用于岩藻黄素藻种的筛选或藻细胞生理生化状态的分析。
测定细胞中岩藻黄素含量方法

[发明专利]一种共培养单针藻在中性条件下快速絮凝的方法-CN201810498675.1有效
发明人：赵鹏;赵飞燕;肖钧木 -专利权人：昆明理工大学
申请日： 2018-05-23 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C12N1/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种共培养单针藻在中性条件下快速絮凝的方法，首先分别培养两株不同的单针藻，待生长至对数生长期后期收集藻细胞，进行共培养，培养至稳定期后调整藻液pH值至7.0，藻细胞出现快速聚集。本发明通过共培养微藻在中性条件下快速絮凝，能够改善藻细胞絮凝性能，减少化学絮凝剂的使用，避免污染藻细胞，提高藻细胞采收效率，降低藻细胞采收成本，从而大幅降低生物柴油的生产以及开发应用成本。
一种培养单针藻中性条件下快速絮凝方法

[发明专利]一种微藻固定化培养的产油方法-CN201410402870.1在审
发明人：陈传红;陈昱;罗少敬;李青;尹顺吉;张惠敏;吴洪 -专利权人：新奥科技发展有限公司
申请日： 2014-08-14 - 公布日： 2014-11-05 - 主分类号： C12P7/64 文献下载
摘要：本发明提供了一种微藻固定化培养的产油方法，所述方法包括如下步骤：(1)将微藻细胞接种在固定化载体上，采用全营养培养基进行培养；(2)检测微藻细胞浓度，并将其与预设微藻细胞浓度进行比较；(3)当所述实际微藻细胞浓度≥所述预设微藻细胞浓度时，将所述全营养培养基调整为缺氮培养基，进行诱导产油培养；(4)诱导产油培养结束后，收集产油微藻细胞层。本发明将微藻细胞接种在固定化载体上，采用全营养培养基进行培养，使藻体快速积累生物量，通过检测细胞浓度，并将其与预设细胞浓度进行比较，确定培养基调整的时机，进行诱导产油培养，实现油脂积累。在诱导产油培养结束后，收集油脂含量符合需求的产油微藻细胞层，实现了微藻固定化培养的产油。
一种固定培养产油方法

[发明专利]一种富集及检测微囊藻单细胞和群体生物量的方法-CN201610338453.4在审
发明人：朱伟;周小华;陈怀民;吴思麟;赵鸿茹;徐锋;陈程;谭啸 -专利权人：河海大学
申请日： 2016-05-20 - 公布日： 2016-10-12 - 主分类号： G01N15/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种富集及检测微囊藻单细胞和群体生物量的方法，包括以下步骤：S01，富集：采用孔径小于单细胞微囊藻直径的浮游植物网过滤定量水体，得总藻液；S02，总微囊藻样品的制备：取定量的所述总藻液，超声；S03，单细胞微囊藻样品的制备：另取定量的所述总藻液，过孔径大于所述单细胞微囊藻直径且小于10μm滤网；S04，检测：分别取所述总微囊藻样品和单细胞微囊藻样品，通过流式细胞仪；S05，群体微囊藻生物量本发明提供的一种富集及检测微囊藻单细胞和群体生物量的方法，能够富集水体中单细胞和群体形态的微囊藻，通过流式细胞仪快速鉴别微囊藻，能够反应水体微囊藻生物量的动态变化及其存在的形态。
一种富集检测微囊藻单细胞群体生物量方法

[发明专利]荧光显微筛检生长快和油脂高的微藻单细胞的方法-CN201410844238.2有效
发明人：程军;岑可法;周俊虎;刘建忠;杨卫娟;张彦威;黄镇宇;周志军;王智化 -专利权人：浙江大学
申请日： 2014-12-30 - 公布日： 2015-04-29 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明涉及生物质能利用技术，旨在提供荧光显微筛检生长快和油脂高的微藻单细胞的方法。该荧光显微筛检生长快和油脂高的微藻单细胞的方法包括步骤：取微藻液体进行单细胞分离，然后进行扩大培养，获得许多株单细胞藻液，再将单细胞藻液接种至96孔板培养至稳定期后，筛选出生长速率快的优势微藻单细胞，用尼罗红荧光染料Nile/DMSO染色后，计算藻细胞的油脂含量，从而筛选出油脂含量高的优势微藻单细胞。本发明能够在10分钟左右对96孔板的藻细胞快速筛检出生长速率快和油脂含量高的优势藻株，大大提高了筛选目标藻株的工作效率，减少了劳动时间成本。
荧光显微生长油脂单细胞方法

[发明专利]一种借助细胞爬片的微藻分离方法-CN202111201949.4在审
发明人：扈瑞平;张竞男;闫思睿;石海波;于建成;薛慧婷;苑红;马春丽;包丽丽;马腾 -专利权人：内蒙古医科大学;内蒙古藻蓝生物科技有限责任公司
申请日： 2021-10-15 - 公布日： 2022-01-04 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种借助细胞爬片的微藻分离方法，属于微藻分离技术领域。本发明将稀释藻液滴于细胞爬片上，显微镜观察到细胞爬片上只有一个目的藻细胞时，把细胞爬片转移至培养基中进行培养。本发明将稀释藻液滴于细胞爬片上，利用细胞爬片的载体支撑作用可以确保目的藻转至培养基中，对实验者的操作要求不高，整个过程操作简便，易于掌握，更易于目的藻种的转移，精确度提高，加快分离藻种效率，分藻效果更好，容易获得纯种藻种，避免多次重复实验，比现有的微藻分离方法更快更灵敏。
一种借助细胞分离方法

[发明专利]一种活性微藻吸附材料的收集方法-CN201610007538.4有效
发明人：申渝;张海东;杜若愚;郑旭煦 -专利权人：重庆工商大学
申请日： 2016-01-07 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12N1/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种活性微藻吸附材料的收集方法，包括以下步骤：1）通过调节光照强度改变微藻细胞生理代谢周期，控制藻细胞上浮下沉规律；2）微藻细胞上浮后，利用真空泵和双层滤网过滤实现固液分离，收集微藻细胞；本发明通过人工调节光照条件为8000‑10000lux，照射微藻细胞1‑2.5小时，待微藻细胞充分上浮后，将真空泵吸头控制在水面下0.5‑1.5cm，选用80‑200目滤网通过真空泵和双层滤网过滤实现微藻细胞的的收集，本发明可实现对处理重金属废水、有机污染废水中的铜绿微囊藻、衣藻、螺旋鱼腥藻等微藻细胞的回收，回收率可达80%‑85%；本发明的收集方法步骤简单，成本低，收集效率高，值得被广泛推广。
一种活性吸附材料收集方法

[发明专利]吐温80结合超声波获得丛粒藻单细胞的方法-CN201310204936.1无效
发明人：茅云翔;曹敏;张芳芳;孔凡娜;隋正红 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2013-05-29 - 公布日： 2013-09-04 - 主分类号： C12N13/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种使用吐温80结合超声波获得丛粒藻单细胞的方法，包括收集处于稳定期的藻细胞，用吐温80孵育藻细胞；利用超声波的机械力对孵育完的藻细胞进行破碎；分离得到单个游离的细胞以及单细胞活性的检测等步骤所述方法成功获得丛粒藻单细胞，培养过程中营养物质和光照均一化吸收，制备时间周期短，丛粒藻单细胞获得率高。
吐温 80 结合超声波获得丛粒藻单细胞方法

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