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[发明专利]龙须菜鲁龙1号良种的特异性SNP标记及其应用-CN201911291611.5有效
发明人： 隋正红;胡依依;肖保衡;李萍萍;刘源 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2019-12-16 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：鲁龙1号龙须菜的特异性SNP标记，具体包括如下步骤：1、基因组DNA提取与质量检测：采用天根植物基因组DNA提取试剂盒进行良种981、2007和鲁龙1号的基因组DNA的提取。2、基因组重测序文库构建与测序。3、测序数据质控：对原始测序数据进行过滤，从而得到高质量的测序数据以保证后续分析的顺利进行。4、比对参考基因组。5、SNP检测与分型。6、特异性SNP标记的筛选。7、特异性SNP标记的引物设计及Sanger测序检验。本发明的有益效果：通过开发鲁龙1号良种的特异性SNP标记，从分子水平上将其与良种981和良种2007区分开来，解决龙须菜在栽培过程中产生的种苗混杂现象，避免对龙须菜栽培产业造成重大损失。
龙须菜良种特异性 snp 标记及其应用

[发明专利]使用实时荧光定量PCR方法指示龙须菜琼胶含量的引物及指示龙须菜琼胶含量的方法-CN201510402288.X有效
发明人： 隋正红;杜青伟;王津果;魏惠惠;周伟 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2015-07-10 - 公布日： 2018-02-16 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及使用实时荧光定量PCR指示龙须菜琼胶含量的引物，所述引物的序列为GME‑Q‑STGGGTAAGATGGTGCTCGGATTT和GME‑Q‑ATCAAAAGTCCTCCTGAGCCCGT。该技术具有以下优点1、节约材料，只需要1g鲜重龙须菜材料就可以完成检测。2、无需碱处理工序，减少实验的危害性。3、特异性强，灵敏度高。4、操作简单，具有很强的推广性。5、加速良种筛选进程。
使用实时荧光定量 pcr 方法指示龙须菜含量引物

[发明专利]用于实时荧光定量PCR方法监测链状亚历山大藻细胞爆发性生长的引物组及监测方法-CN201510402269.7有效
发明人： 隋正红;任源源;耿慧利;张淑;郭立亮;商二磊 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2015-07-10 - 公布日： 2017-09-29 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及用于荧光定量PCR监测链状亚历山大藻细胞爆发性生长的引物，所述引物序列为MT‑Q‑STCCAGGTGGTGCGGAGGAGACT和MT‑Q‑ACCCACGACCTTTTTCGGATTGC。该技术具有以下优点1、实现真正预警预报；2、特异性强；3、灵敏度高；4、操作简单、迅速，具有很强的推广性；5、费用较低。
用于实时荧光定量 pcr 方法监测亚历山大细胞爆发生长引物

[发明专利]一种使用龙须菜孢子育苗的繁殖方法-CN201310243062.0有效
发明人： 隋正红;周伟;王津果;常连鹏;丁弘叶;胡依依 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2013-06-08 - 公布日： 2013-11-20 - 主分类号： A01G33/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种龙须菜孢子育苗的繁殖方法；具体方法步骤如下：1)孢子采集，2)室内培养，3)海区挂养与时期控制。本发明所述的一种龙须菜孢子育苗的繁殖方法优势如下：1、有效解决大面积推广所需种源问题；2、解决渡夏过程中，龙须菜的室内保存问题；3、育苗的稳定性高、可控性强；4、有效降低因“南用北调”、“北用南调”所产生的费用及人力、物力消耗；5、较营养繁殖而言有性生殖育苗可大量繁育出不同遗传背景的种苗，也可有选择性的培育适应不同海区生长的苗种并在一定程度上缓解种质的退化问题；6、加速龙须菜育种工作中良种筛选的速度。
一种使用龙须菜孢子育苗繁殖方法

[发明专利]鉴定龙须菜981良种的特异性探针及其应用-CN201310243064.X有效
发明人： 隋正红;王津果;周伟;常连鹏;张淑 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2013-06-08 - 公布日： 2013-11-20 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及鉴定龙须菜981良种的特异探针，所述的特异性探针序列为：具有序列为SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2的核苷酸序列；本发明获得两条特异探针，可以快速而准确地鉴定龙须菜981良种。
鉴定龙须菜 981 良种特异性探针及其应用

[发明专利]吐温80结合超声波获得丛粒藻单细胞的方法-CN201310204936.1无效
发明人：茅云翔;曹敏;张芳芳;孔凡娜;隋正红 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2013-05-29 - 公布日： 2013-09-04 - 主分类号： C12N13/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种使用吐温80结合超声波获得丛粒藻单细胞的方法，包括收集处于稳定期的藻细胞，用吐温80孵育藻细胞；利用超声波的机械力对孵育完的藻细胞进行破碎；分离得到单个游离的细胞以及单细胞活性的检测等步骤。所述方法成功获得丛粒藻单细胞，培养过程中营养物质和光照均一化吸收，制备时间周期短，丛粒藻单细胞获得率高。
吐温 80 结合超声波获得丛粒藻单细胞方法

[发明专利]一种快速鉴定绿潮藻类浒苔的方法-CN200910260278.1无效
发明人：茅云翔;王健;孔凡娜;隋正红 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2009-12-28 - 公布日： 2011-01-12 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速鉴定绿潮藻类浒苔的方法。此方法利用核酸杂交技术，使用两条DNA双链探针，通过样本DNA提取、PCR扩增得到浒苔的核糖体RNA转录间隔区序列ITS和5s核糖体RNA串联重复序列间隔区序列5SS，再采用核酸杂交技术，将PCR产物变性处理后点到带有正电荷的尼龙膜上，再以特异性的探针与之杂交显色，ITS和5SS序列都有阳性信号的样本即为浒苔(Ulva prolifera)，达到快速鉴定浒苔的目的。该方法能够在野外较简陋的实验环境下进行鉴定；鉴定速度快。
一种快速鉴定藻类方法

[发明专利]一种重组藻红蛋白及其制备方法和应用-CN200610044582.9无效
发明人： 隋正红;温若冰;茅云翔;张爽;张学成;张静 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2006-05-26 - 公布日： 2006-12-27 - 主分类号： C12N15/31 文献下载
摘要：一种重组藻红蛋白，其特征是它用核酸序列表征。制备时，使引物P1：GGAGAG(AC)TCAATGCT(AT)GA和P2：(CT)TANNNTAA(AT)G(AC)(AG)(AT)T(AG)ATNA(AC)(AG)(AT)A进行聚合酶链式反应，以龙须菜基因组DNA为模板，进行扩增，将获得的扩增产物连入表达载体进行表达，将培养物超声或加热破碎而获得。本发明的制备方法简便，不受时间和季节限制，在短时间内可使产品获得极高产量；该产品作为抑癌制剂可应用于医药，作为清除羟自由基制剂除应用于医药外，还可应用于饵料、食品和化装品工业。
一种重组蛋白及其制备方法应用

[发明专利]一种链状亚历山大藻特异性抗体的制备方法和应用-CN200610044508.7无效
发明人： 隋正红;孙宁波;包振民;茅云翔;郭皓;张冬宝;韩茵 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2006-05-27 - 公布日： 2006-11-08 - 主分类号： C07K16/18 文献下载
摘要：一种链状亚历山大藻特异性抗体的制备方法，其特征是先进行藻体的培养和收获，将藻细胞处理后，与等体积的弗氏完全佐剂混合乳化，对家兔进行四肢的腋下注射、背部皮下多点注射的初次免疫和加强免疫，而获得抗体，最后进行非特异性吸附。该链状亚历山大藻特异性抗体可在定性地检测赤潮生物中应用。本发明的方法具有操作简便，产品易于保存，使用时定性准确的优点，对环境检测、环境保护和养殖业具有重要的应用价值。
一种亚历山大特异性抗体制备方法应用

[发明专利]条斑紫菜锰超氧化物歧化酶及其制备方法-CN200510044643.7无效
发明人：茅云翔;隋正红;王荣;周晓君;王孟强 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2005-08-31 - 公布日： 2006-05-03 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明是一种条斑紫菜锰超氧化物歧化酶及其制备方法。该酶含有224个氨基酸残基，预测分子量为24469.09Da，在其N－端的24个氨基酸残基中疏水氨基酸占大部分，该肽段的作用为将该酶转运至线粒体；在该酶的氨基酸序列中第27、84、178位的组氨酸(H)，第174位的天冬氨酸(D)为与Mn²⁺的结合位点，在该序列中存在有保守的金属结合结构域“DVWEHAYYL”；该酶与五种藻类品种的Mn－SOD氨基酸序列比对，具有50—60％同源性。本发明利用该酶基因的cDNA序列及表达载体pSE380，构建表达重组质粒pSE380/MnSOD并转化至大肠杆菌DH5α中表达，表达产物以包涵体的形式存在；使得该酶的制备方法严谨合理，使得超氧化物歧化酶可以通过基因工程方法大批量生产，开拓了超氧化物歧化酶的原料来源。
紫菜超氧化物歧化酶及其制备方法

[发明专利]条斑紫菜功能基因构成的基因芯片-CN200510044277.5无效
发明人：茅云翔;周晓君;隋正红;徐民俊 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2005-08-14 - 公布日： 2006-04-12 - 主分类号： C12N15/00 文献下载
摘要：本发明是一种条斑紫菜功能基因构成的基因芯片，是在适合的载体面上点制组合有如附表所示的471个序列点，诸序列点所对应代表的EST在国际基因序列库(GeneBank)中的接收号及其对应的矩阵号：1—4；列号：1—11；行号：1—11；EST编号；在平行的四个矩阵单元中，诸矩阵间有四次重复；该芯片诸矩阵右侧或左侧的两个矩阵为起始矩阵；该芯片中的每序列点是以100—3000bp连续的核苷酸为探针的序列或同源序列或其互补序列。该芯片具备高通量的优势，它正被应用于基因表达检测，通过定量监测大量基因表达水平，阐述基因功能、探索疾病原因及机理、发现可能的诊断及治疗靶，从整体水平研究功能基因的表达谱；总之该芯片广泛应用于工农业生产当中。
紫菜功能基因构成基因芯片

[发明专利]节旋藻藻蓝蛋白基因的启动子及其制备方法-CN200310105416.1无效
发明人：张学成;刘金姐;隋正红;茅云翔;任雪莹 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2003-10-16 - 公布日： 2004-09-15 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种节旋藻的藻蓝蛋白β和α亚基基因的启动子，该DNA片段长度为：427bp，其序列描述为：藻蓝蛋白β和α亚基基因共用的一个启动子。该序列包含有如下功能因子－10区和－35区主要功能区及DOFCOREZM、EBOXBNNAPA、GT1CONSENSUS、GTGANTG10、IBOXCORE等功能因子。本启动子具有完整的－35区和－10区，两功能区的间隔长度显示它是高效启动子，这就可以实现以高效的强启动子来完成藻类基因工程的转录阶段任务，使外源基因的表达提高了效率，进而得到更多的改良和利用节旋藻所需的基因产物。本启动子应用在启动子探测载体——绿色荧光蛋白中实现了高效表达，证明了其可开发性。
节旋藻藻蓝蛋白基因启动子及其制备方法

[发明专利]一种藻红蛋白β和α亚基基因启动子及其制备方法和应用-CN03135062.3无效
发明人： 隋正红;张学成;任雪莹;臧晓南;茅云翔 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2003-09-29 - 公布日： 2004-09-15 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：一种藻红蛋白β和α亚基基因启动子，其特征是它用核酸序列表征：制备时将引物P1：TCAAATCGGGCTTCAAC和P2：AGAGCTCTCCTTAAATT，用聚合酶链式反应，以龙须菜基因组DNA为模板，进行扩增。本发明的藻红蛋白β和α亚基基因启动子对藻类基因工程的发展和应用有重要意义。
一种蛋白基因启动子及其制备方法应用

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