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[发明专利]胰岛素抵抗细胞模型的建立方法-CN201811016940.4在审
发明人：李冰 -专利权人：浦江县欧立生物技术有限公司
申请日： 2018-09-03 - 公布日： 2019-01-29 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了胰岛素抵抗细胞模型的建立方法，包括心肌细胞培养、实验分组与造模、胰岛素抵抗心肌细胞模型的鉴定，通过向培养心肌细胞的培养基中加入氢化可的松和胰岛素联合诱导心肌细胞的胰岛素抵抗，得到胰岛素抵抗细胞模型，然后采用³H‑D‑葡萄糖掺入实验评价细胞的胰岛素敏感性，实验结果显示，在胰岛素刺激下，氢化可的松处理的心肌细胞对葡萄糖的摄取量明显下降，说明心肌细胞胰岛素抵抗细胞模型建模成功。有益效果为：本发明胰岛素抵抗细胞模型的建立方法操作简单，成本低廉，稳定性好，为胰岛素抵抗细胞模型的建立提供一种新的思路。
胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖心肌细胞氢化培养心肌细胞心肌细胞模型心肌细胞培养胰岛素敏感性诱导心肌细胞胰岛素刺激实验评价培养基胰岛素摄取掺入建模分组细胞成功联合

[发明专利]基于小肠黏膜下层无细胞基质制备平滑肌细胞载体的方法-CN201610095634.9有效
发明人：韩立军 -专利权人：江苏期佰医疗技术有限公司
申请日： 2016-02-22 - 公布日： 2016-06-15 - 主分类号： A61L27/38 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于小肠黏膜下层无细胞基质制备平滑肌细胞载体的方法，体外成功培养出阴道平滑肌细胞，倒置显微镜下，可见培养的阴道平滑肌细胞呈现长梭状，细胞集结于培养皿上形成典型的“峰和谷”样构型。黏膜下层无细胞基质外观呈白色，半透明，有一定韧性。苏木精-伊红染色未见细胞成分存在。阴道平滑肌细胞-肠黏膜下层标本切片苏木精-伊红染色后，光镜下可见细胞成分逐渐增多，由表浅向深层部位生长。阴道平滑肌细胞-肠黏膜下层标本切片采用抗兔平滑肌α-肌动蛋白单克隆抗体免疫组化染色后，均可见抗兔α-Actin的阳性细胞。结果初步证明了猪小肠黏膜下层基质可作为一种平滑肌细胞载体。
基于小肠黏膜下层细胞基质制备平滑肌载体方法

[发明专利]心肌细胞的制备方法-CN201611045044.1有效
发明人：江小霞;王常勇;董晓惠;杨燕美;王玉涵;黄小会;曹雪敏;周瑾 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
申请日： 2016-11-21 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了心肌细胞的制备方法。本发明公开的心肌细胞的制备方法包括：在包覆导电纳米材料的容器中利用炎性细胞因子处理干细胞得到心肌细胞；干细胞与炎性细胞因子的配比为(0.5‑1)×10⁵个：1ng；炎性细胞因子为IFN‑γ实验证明，将干细胞经IFN‑γ和TNF‑α联合导电纳米材料处理得到的心肌细胞的数量远远高于单独利用IFN‑γ和TNF‑α、单独利用导电纳米材料以及未利用IFN‑γ和TNF‑α联合导电纳米材料处理得到的心肌细胞表明，可以利用适当浓度的IFN‑γ和TNF‑α联合导电纳米材料制备心肌细胞。
心肌细胞导电纳米材料制备炎性细胞因子干细胞碳纳米管配比为质量比联合包覆

[发明专利]一种体外构建三维立体组织的方法-CN201310291478.X无效
发明人：徐月敏;吕向国;冯超 -专利权人：上海市第六人民医院
申请日： 2013-07-11 - 公布日： 2015-01-14 - 主分类号： A61L27/38 文献下载
摘要：本发明提供了一种外构建三维立体组织的方法：分离培养上皮细胞和肌细胞；将小肠黏膜下层脱细胞基质支架置入肌细胞悬液中，震荡复合完成后，继续培养；将上皮细胞悬液滴在经步骤2处理得到后的支架的肌细胞层上，继续培养得到三维立体组织该方法采用舌粘膜上皮细胞和肌细胞作为种子细胞，取材方便，能够在较短的时间内扩增较多的数量，满足应用的需要；采用震荡的方法使肌细胞与小肠黏膜下层脱细胞基质支架复合，能够使肌细胞大量浸润至支架内部且分布较均匀
一种体外构建三维立体组织方法

[发明专利]人平滑肌细胞的获得方法及其用途-CN200680042887.4无效
发明人：索菲·勒里库瑟;玛丽－诺乐·拉卡萨尼;让－皮埃尔·马若里奥 -专利权人：巴黎国立医院;血管与血液研究所
申请日： 2006-09-19 - 公布日： 2008-11-19 - 主分类号： C12N5/06 文献下载
摘要：本发明涉及从人肌活检样品或从体外分化成为骨骼肌细胞的人肌活检样品中体外获得主要包括表达钙调节蛋白和SM－MHC的人平滑肌细胞的细胞群的方法。本发明还涉及作为被设计成用于人的治疗成分的组合物，所述组合物包括可通过所述方法获得的分离的平滑肌细胞。本发明还涉及分离的平滑肌细胞在制备被设计成用于替换平滑肌细胞的治疗组合物中的用途。尤其是，本发明涉及所述的分离的平滑肌细胞在治疗缺血、癌症或需要损伤组织血管再生的任意疾病中的用途。最后，本发明涉及所述平滑肌细胞作为活性成分的载体在制备被设计成用于需要采用所述活性成分治疗的人的治疗组合物中的用途。
平滑肌细胞获得方法及其用途

[发明专利]一种人胚胎干细胞体外分化为功能性心肌细胞的新型培养方法-CN201410427856.7在审
发明人：周萱 -专利权人：奥思达干细胞有限公司
申请日： 2014-08-28 - 公布日： 2014-11-26 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种人胚胎干细胞体外分化为功能性心肌细胞的新型有效培养方法，不同于传统的经典的悬滴培养方法，以一种简化的悬浮分化培养方法形成类胚体，采用无血清培养液并进行改良，其中添加了多种诱导和营养强化物质，增加心肌细胞的分化率和存活时间。本发明进一步有效地更新和完善了胚胎干细胞分化为功能性心肌细胞的方法，极大地提高拟胚体分化的心肌细胞的比例，可为干细胞临床移植治疗技术和药物筛选等提供更多的功能强大的心肌细胞来源。本发明方法操作简单易行；缩短了培养时间；增强了体外分化成心肌细胞的功能；包括搏动时间、心肌细胞跳动的自律性和节律性；可重复性强。
一种胚胎干细胞体外化为功能心肌细胞新型培养方法

[发明专利]RNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞基因表达影响的测定方法-CN201910243576.3在审
发明人：李梅;秦秀军;刘梦雅;尹晶晶;李建国 -专利权人：中国辐射防护研究院
申请日： 2019-03-28 - 公布日： 2019-07-30 - 主分类号： C12Q1/6876 文献下载
摘要：本发明属于基因表达检测技术领域，涉及RNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞基因表达影响的测定方法。所述的测定方法依次包括如下步骤：(1)培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞；(2)对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞进行siRNA转染；(3)检测大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞中ORC1基因的表达情况，确定表达量相对于细胞未转染siRNA时的变化；(4)确定ORC1基因表达的变化对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖能力的影响、表型的影响、细胞形态结构的影响、细胞中标志蛋白表达量的影响。利用本发明的RNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞基因表达影响的测定方法，能够确定ORC1基因与血管平滑肌细胞(VSMC)之间的关系，确定RNA干扰对ORC1基因的介导作用。
血管平滑肌细胞基因表达大鼠胸主动脉大鼠表达量转染基因血管平滑肌细胞增殖基因表达检测细胞形态结构细胞标志蛋白培养大鼠胸主动脉表型介导检测

[发明专利]一种原子力探针测量单个搏动心肌细胞三维动态形貌的方法及装置-CN202010957317.X在审
发明人：王作斌;董建军;王国梁;陈玉娟;常泽文;董莉彤;姜晓琳;宋正勋;许红梅;翁占坤 -专利权人：长春理工大学
申请日： 2020-09-14 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： G01Q60/24 文献下载
摘要：本发明涉及一种原子力探针测量单个搏动心肌细胞三维动态形貌的方法及装置，由原子力探针测量单个搏动的心肌细胞三维动态形貌，根据原子力显微成像系统及其力反馈系统、闭环反馈系统使得原子力探针精确定位到待测单个搏动心肌细胞上，原子力探针和单个搏动心肌细胞表面接触采用恒定力单点按时间顺序多次采集模式，确定细胞表面一点在任一时刻的空间位置，通过这种模式对单个搏动心肌细胞进行扫描，实现三维动态形貌的测量。本发明对单个搏动心肌细胞三维动态形貌的测量可以精确定位单个搏动心肌细胞在搏动周期内任一时刻的位置和形貌，实现动态测量，从而在纳米尺度上获取单个搏动心肌细胞三维动态形貌。
一种原子探针测量单个搏动心肌细胞三维动态形貌方法装置

[发明专利]miRNA708、和/或301簇的微小RNA在改善心脏功能方面的应用-CN201710049442.9有效
发明人：俞作仁;邓生琼;甄丽晓;赵倩 -专利权人：上海市东方医院
申请日： 2017-01-20 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： A61K45/00 文献下载
摘要：具体地，miRNA708、和/或301簇的微小RNA能够(i)促进心肌细胞增殖；(ii)提高心肌细胞抗缺氧应急能力；(iii)降低心肌细胞凋亡和死亡；(iv)诱导心肌干细胞增殖及分化；和/或(v)保护低氧刺激对心肌细胞的损伤
mirna708 301 微小 rna 改善心脏功能方面应用

[发明专利]一种体外诱导羊水间充质干细胞向心肌细胞分化的方法-CN201910498844.6在审
发明人：马春华;陆扬;刘燕;毕晓娟 -专利权人：南京乐扬医药科技有限公司
申请日： 2019-06-11 - 公布日： 2019-08-16 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明公开了一种体外诱导羊水间充质干细胞向心肌细胞分化的方法。cTnI是心室和心房细胞中典型的蛋白，是心肌细胞重要的特征性蛋白；GATA4是心脏基因表达的重要转录调节因子，通过与其他转录调节因子相互作用，共同调控心脏正常发育、功能基因表达和心肌肥大的病理过程，也是心肌细胞重要的特征性蛋白通过cTnI、GATA4的mRNA和蛋白表达水平可以看出人羊水间充质干细胞在没食子酸丙酯的诱导下出现了向心肌细胞的明显分化。因此，可以将没食子酸丙酯用于体外诱导人羊水间充质干细胞向心肌细胞分化，本发明提供的方法可以有效将人羊水间充质干细胞诱导分化为心肌细胞。
心肌细胞间充质干细胞人羊水分化没食子酸丙酯转录调节因子特征性蛋白诱导羊水种体蛋白表达水平病理过程功能基因体外诱导心房细胞心脏基因诱导分化肥大心室心肌蛋白发育心脏调控

[发明专利]基于通心络预处理的心肌细胞来源外泌体及其制备方法-CN201910535074.8有效
发明人：杨跃进;陈桂浩;黄沛森 -专利权人：中国医学科学院阜外医院
申请日： 2019-06-20 - 公布日： 2020-07-24 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于通心络预处理的心肌细胞来源外泌体及其制备方法。本发明提供一种心肌细胞来源外泌体的制备方法，该方法包括：采用通心络预处理心肌细胞，并对预处理过的心肌细胞行缺氧/复氧处理后收集其分泌的外泌体。本发明可制备出具有减少心肌微血管内皮细胞凋亡、从而减轻心肌缺血再灌注损伤功效的心肌细胞来源外泌体。
基于通心络预处理心肌细胞来源外泌体及其制备方法

[发明专利]一种成肌细胞永生化的方法-CN202011589588.0在审
发明人：达琦;李恬婧;刘洁;陶米林;喻小鲁 -专利权人：广东赤萌医疗科技有限公司
申请日： 2020-12-28 - 公布日： 2021-04-13 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种永生化成肌细胞的方法。该方法采用低密度培养，结合离心条件下逆转录病毒感染，并结合反复贴壁富集永生化成肌细胞的改进，以及操作条件的优化控制，极大提高逆转录病毒感染细胞效率，大幅提高永生化成肌细胞的得率。本方法对于起始样本量非常少，尤其是起始样本中成肌细胞比例非常低、低于10％甚至只有1％的样本，仍然可以成功永生化成肌细胞，且大部分样本可保证最终得到纯度在70％以上永生化的成肌细胞，本发明方案可以使得所有肌营养不良症患者受益
一种细胞永生方法

[发明专利]长链非编码RNA Gm10561在调控成肌细胞增殖分化中的应用-CN202210467330.6在审
发明人：吴珍芳;顾婷;肖丽窈;王姗姗;谭宝华;赵鑫铭;曾捷康;蔡更元;李紫聪;洪林君;杨杰;郑恩琴;徐铮;黄思秀 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2022-04-29 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了长链非编码RNA Gm10561在调控成肌细胞增殖分化中的应用。本发明通过研究表明，lncRNA Gm10561与成肌细胞增殖分化相关，通过超表达载体pcDNA3.1‑Gm10561转染进成肌细胞，上调lncRNA Gm10561表达可以促进小鼠和猪成肌细胞的增殖分化功能，同时，经过siRNA下调lncRNA Gm10561表达会抑制小鼠C2C12细胞的增殖分化功能。lncRNA Gm10561对成肌细胞增殖分化具有重要调控作用：lncRNA Gm10561能够显著促进成肌细胞增殖分化，为今后进一步研究骨骼肌发育机制打下基础，并且为提高家畜产肉性能提供新思路。
长链非编码 rna gm10561 调控细胞增殖分化中的应用

[发明专利]用于促进干细胞来源心肌细胞成熟的无血清培养体系-CN201810154071.5在审
发明人：裴菲;王志敏;黄薇 -专利权人：上海产业技术研究院;上海人类基因组研究中心
申请日： 2018-02-22 - 公布日： 2018-08-28 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明涉及用于促进干细胞来源心肌细胞成熟的无血清培养体系。具体而言，本发明提供一种促进心肌细胞成熟的培养基，所述培养基含有无血清分化培养基和促进心肌细胞成熟的添加物，其中，所述促进心肌细胞成熟的添加物含有激素类、脂类、氨基酸衍生物、非蛋白质氨基酸以及类维生素化合物本发明通过在无血清分化培养基中加入一系列促进心肌细胞成熟的添加物，改善了心肌细胞的不成熟状态，使其在大小形态、分子组成、代谢和生理功能方面具有更加成熟的表型。在该体系中制备而来的心肌细胞具有正常功能，可以更好地应用于药物筛选及药物心脏毒性的检测、疾病建模以及干细胞再生医学领域。
心肌细胞成熟添加物分化培养基干细胞来源无血清培养培养基无血清非蛋白质氨基酸氨基酸衍生物药物心脏毒性成熟状态分子组成类维生素生理功能药物筛选再生医学正常功能干细胞表型建模脂类制备代谢疾病检测应用

[发明专利]环状RNA circCLTH在促进骨骼肌细胞增殖或分化中的应用-CN202210697922.7在审
发明人：李辉;刘庆友;陈孟杰;宋明明;刘兴宇;石德顺 -专利权人：广西大学
申请日： 2022-06-20 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了环状RNA circCLTH在促进骨骼肌细胞增殖或分化中的应用。本发明从水牛中发现并克隆了一种与其肌肉发育有关的环状RNA circCLTH，通过在骨骼肌细胞中过表达circCLTH，即可促进骨骼肌细胞的增殖或分化。本发明不仅提供了环状RNA circCLTH在促进骨骼肌细胞增殖或分化中的应用，同时还提供了促进骨骼肌细胞增殖或分化的方法，有助于骨骼肌发育相关基因的体外研究及水牛的分子育种。
环状 rna circclth 促进骨骼肌细胞增殖分化中的应用