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[发明专利]人多能干细胞中的谱系示踪系统的构建与应用-CN201811132450.0有效
发明人：章小清;刘玲;陈祯钰 -专利权人：同济大学
申请日： 2018-09-27 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别是涉及人多能干细胞中的谱系示踪系统的构建与应用。本发明提供一种谱系示踪方法，包括：通过谱系示踪系统进行谱系示踪，所述谱系示踪系统的构建方法包括：将人多能干细胞的重组酶驱动基因中整合重组酶基因片段；将染色体开放位点AAVS整合报告基因系统，所述报告基因系统包括转录终止调控元件片段和报告基因片段本发明在人细胞中构建出谱系示踪系统，利用报告基因标记目的基因蛋白表达后的所有子代细胞，从而对这些细胞以及其子代细胞的分化、增殖、空间定位等进行示踪的技术。
多能干细胞中的谱系系统构建应用

[发明专利]适用于对细胞在体内进行荧光和PET成像示踪的探针系统和制备方法-CN202011565464.9有效
发明人：彭金良;陈阳;朱婉欣 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： A61K49/00 文献下载
摘要：本发明提供一种适用于对细胞在体内进行示踪的产品系统，所述系统至少包括独立存在的预标签分子和示踪分子，所述预标签分子用于在体外对细胞进行预标记，所述示踪分子用于在体内与所述细胞上的预标签分子结合。通过本发明，可促进解决干细胞和CART细胞等细胞的体内示踪问题，进而克服现有技术中无法对细胞体内分布实现实时高灵敏且可定量分析等问题。
适用于细胞体内进行荧光 pet 成像探针系统制备方法

[发明专利]一种体内活细胞示踪试剂盒及其示踪方法-CN201610613651.7在审
发明人：葛啸虎;陈海佳;王一飞;马岩岩;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2016-07-28 - 公布日： 2016-12-21 - 主分类号： A61K49/18 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种体内活细胞示踪试剂盒及其示踪方法。该试剂盒包括脂质体包被的锰离子，以及与待示踪的细胞对应的特异性表面标志物抗体。本发明利用MEMRI技术可准确示踪体内细胞的存活及分化情况，且减少了锰离子对体内其他器官组织的毒性作用。
一种体内细胞试剂盒及其方法

[发明专利]一种聚集诱导发光纳米粒子及其制备方法和应用-CN201610392534.2有效
发明人：唐本忠;高蒙;赵祖金;任力;王迎军;陈军建 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2016-06-02 - 公布日： 2018-09-14 - 主分类号： C09K11/07 文献下载
摘要：其制备方法包括以下步骤：将式I所示的聚集诱导发光化合物和两亲性聚合物溶解在水溶性有机溶剂中，然后加入到水中，超声反应；将有机溶剂挥发除去，形成负载了聚集诱导发光化合物的纳米粒子；在纳米粒子水溶液中加入细胞穿透性多肽，反应后形成可高效染色细胞的聚集诱导发光纳米粒子。本发明的荧光粒子可用于干细胞长期分化示踪，尤其是小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程的示踪。与现有的商品化示踪试剂仅能示踪细胞分裂增殖6代相比具有更好的示踪效果，可追踪细胞分裂增殖超过12代。而且该聚集诱导发光纳米粒子具有高细胞染色效率，长期示踪能力，高光稳定性及低细胞毒性等优点。
一种聚集诱导发光纳米粒子及其制备方法应用

[发明专利]用于磁共振活体示踪的超顺磁性纳米铁颗粒标记的细胞-CN201010125501.4无效
发明人：王建东;卢光明 -专利权人：中国人民解放军南京军区南京总医院
申请日： 2010-03-17 - 公布日： 2011-11-16 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于磁共振活体示踪的SPIO标记的细胞，磁共振信号强，且可长期示踪。所述用于磁共振活体示踪的SPIO标记的细胞中，所述细胞为高表达铁蛋白细胞。所述SPIO标记的细胞由SPIO与高表达铁蛋白的细胞共同培养而得到，SPIO的标记浓度为30～60μg/mL。所述高表达铁蛋白细胞为铁蛋白基因质粒转染细胞。经研究证实，高表达的铁蛋白可将SPIO降解的铁作为额外的铁源摄取和储存在细胞内。铁蛋白可与细胞标记的SPIO作用，延长SPIO活体示踪细胞的时间；同时降解的SPIO可以加强铁蛋白报告基因的信号强度。两者联合使用，可增强对标记细胞的活体示踪时间和磁共振信号强度。
用于磁共振活体顺磁性纳米颗粒标记细胞

[发明专利]一种双荧光GLUTs示踪质粒、其制备方法及其应用-CN201910462611.0在审
发明人：张还添;黎贞燕;查振刚;石毓灵;李雨航 -专利权人：暨南大学
申请日： 2019-05-30 - 公布日： 2019-09-24 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种双荧光GLUTs示踪质粒、其制备方法及其应用，双荧光GLUTs示踪质粒，包括GLUTs基因片段、mCherry基因和pEGFP‑C1质粒片段；制备方法包括：将GLUTs基因片段插入线性pEGFP‑C1质粒片段的步骤；以及，将mCherry基因插入线性pEGFP‑C1质粒片段的步骤；其应用将双荧光GLUTs示踪质粒转染细胞，然后以激发光激发，观察其显色情况，得到GLUTs在细胞中的定位；双荧光GLUTs示踪质粒，是一种荧光稳定融合、细胞毒性小、定位准确、特异性高、应用简单、价格低廉并能无限扩增的质粒，可示踪GLUTs在细胞亚结构的动态定位。
荧光示踪质粒质粒片段制备基因片段应用细胞亚结构细胞定位准确动态定位细胞毒性质粒转染激发光扩增显色激发融合观察

[发明专利]细胞毒性T细胞示踪系统以及动物模型的构建方法及应用-CN202110911178.1在审
发明人：孙瑞林;王津津;慈磊;吴友兵 -专利权人：上海南方模式生物科技股份有限公司;上海砥石生物科技有限公司;广东南模生物科技有限公司
申请日： 2021-08-10 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供一种细胞毒性T细胞示踪系统以及动物模型的构建方法及应用，细胞毒性T细胞示踪系统包括同源重组载体、Cas9 mRNA、gRNA、模式生物目的细胞，所述同源重组载体包括重组左臂、核糖体接入位点、第一报告基因、自剪切多肽、第二报告基因、重组右臂，以及基于T细胞示踪系统获得的动物模型。该模型可以实现小鼠内源CD8基因驱动Akaluciferase（Akaluc）荧光素酶和绿色荧光蛋白表达；在活体成像系统下，可通过给予小鼠底物AkaLumine，检测生物发光，实现对CD8分子表达，即细胞毒性T细胞的示踪。
细胞毒性系统以及动物模型构建方法应用

[发明专利]一种用于体内示踪和人工清除CAR-T细胞的标签和应用-CN201710648782.3有效
发明人：祁伟;俞磊;康立清;林高武;余宙 -专利权人：上海优卡迪生物医药科技有限公司
申请日： 2017-08-01 - 公布日： 2019-02-26 - 主分类号： C12N15/13 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于体内示踪和人工清除CAR‑T细胞的标签，包括：如SEQ ID NO.18所示序列的示踪铰链Trace‑Linker1、如SEQ ID NO.19所示序列的示踪铰链Trace‑Linker2、如SEQ ID NO.20所示序列的示踪铰链Trace‑Linker3。本发明标签使得CAR‑T细胞在不影响肿瘤杀伤效果的前提下，能够对CAR‑T细胞进行可控的体内示踪、体外分离、人工清除，能极大的提高CAR‑T细胞治疗的安全性，能够为更深入的解析CAR‑T细胞治疗的过程提供有力的工具本发明载体可实现在人T淋巴细胞上表达CD117的靶向嵌合抗原受体，引导并激活T淋巴细胞对CD117阳性细胞的杀伤作用，在临床上可用于治疗三阴性乳腺癌。
一种用于体内人工清除 car 细胞标签应用

[发明专利]利用磁小体编码基因对外源细胞进行活体示踪的方法-CN201910196842.1在审
发明人：朱剑虹;魏乃礼;王帆;朱侗明 -专利权人：复旦大学附属华山医院;朱剑虹
申请日： 2019-03-15 - 公布日： 2019-07-26 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：利用磁小体编码基因对外源细胞进行活体示踪的方法，将编码磁小体的关键基因mms6导入至外源细胞基因组内，诱导外源细胞表达mms6蛋白，此蛋白可以结合内源性铁离子，在体内合成内源性铁磁性纳米颗粒；将外源细胞移植入体内后，定期进行核磁共振扫描，通过核磁共振T2豫驰像检测出内源性的铁磁性纳米颗粒信号，可即时定位移植的外源细胞的位置。本发明中磁小体编码基因mms6所产生的示踪信号可传代给子代细胞，让外源细胞示踪信号持续存在，实现外源细胞的长期活体示踪。
外源细胞磁小体编码基因内源性活体示踪铁磁性纳米颗粒示踪信号源细胞蛋白传代核磁共振扫描移植关键基因体内合成子代细胞核磁共振基因组铁离子像检测诱导体内

[发明专利]基于卷积神经网络的无创在体干细胞示踪方法及系统-CN202010062519.8有效
发明人：田捷;马喜波;孙峥;王宇 -专利权人：中国科学院自动化研究所
申请日： 2020-01-20 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： G16B5/00 文献下载
摘要：本发明属于光学分子影像及生物自发荧光成像技术领域，具体涉及了一种基于卷积神经网络的无创在体干细胞示踪方法及系统，旨在解决现有技术计算复杂度高、无创在体干细胞示踪精度达不到预期的问题。本发明包括：获取无创在体干细胞对应荧光强度向量，并结合生物体表节点进行光子密度强度归一化处理；基于归一化后的体表节点荧光强度向量，通过训练好的无创在体干细胞示踪网络，获取无创在体干细胞的位置向量；基于无创在体干细胞的位置向量，实现无创在体干细胞示踪。本发明进行网络输入向量、输出向量预处理，获得适用于卷积神经网络的数据，并通过仿真数据进行网络训练，网络模型在干细胞示踪领域精度高，速度快。
基于卷积神经网络干细胞方法系统

[发明专利]一种干细胞的磁共振和光声双模态示踪方法-CN201810954389.1在审
发明人：卢漫;成雪晴;王志刚;蒋京真;张振奇 -专利权人：四川省肿瘤医院
申请日： 2018-08-21 - 公布日： 2018-12-28 - 主分类号： A61K49/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种干细胞的磁共振和光声双模态示踪方法，包括以下步骤：(1)干细胞在含有示踪剂的培养基中孵化，将已标记的干细胞置于恢复液中恢复后，用胰蛋白酶处理，再分散并在新鲜培养基中计数，标记的干细胞被收集起来并在2小时内植入体内；(2)用核磁共振成像仪示踪监测植入体内的干细胞在体内的情况，并储存用于图像分析。用微粒标记干细胞，运用磁共振和光声成像在体外和在大鼠肩袖伤模型中长时间示踪肌腱干细胞，展示了MRI和PA双模态示踪肌腱干细胞及应用肌腱干细胞治疗大鼠肩袖损伤的广阔前景。
干细胞示踪肌腱磁共振双模态体内大鼠光声肩袖植入核磁共振成像仪胰蛋白酶处理干细胞治疗新鲜培养基光声成像图像分析微粒标记培养基示踪剂再分散体外恢复损伤储存孵化监测应用展示

[发明专利]一种非脱钙骨软骨组织的切片制备方法及其细胞示踪和RNAscope联合测试方法-CN202010930339.7在审
发明人：杨辉亮 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2020-09-07 - 公布日： 2020-12-01 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明属于生物检测技术，具体涉及一种非脱钙骨软骨组织切片的制备方法及骨软骨组织细胞示踪和RNAscope联合测试方法。针对现有技术中由于非脱钙骨软骨组织切片难以保持完整，导致细胞示踪和RNAscope联合测试的技术无法在骨软骨组织切片中应用的问题。本发明的技术方案是：通过Kawamoto膜保证骨软骨组织在冰冻切片时的完整性，然后联合应用荧光细胞示踪技术和原位杂交技术实现在同一片骨软骨组织切片中同时观察细胞示踪荧光信号和RNAsocpe的原位杂交特异性靶本发明拓展了细胞示踪和RNAscope联合测试技术的应用范围，包括：1)骨软骨组织发育研究；2)骨软骨组织中相应基因敲除效率分析；3)基因敲除后对其他目标基因转录水平的影响的研究；4)骨软骨组织病理分析
一种非脱钙骨软骨组织切片制备方法及其细胞 rnascope 联合测试

[发明专利]一种DNA的细胞内示踪分析方法-CN201010508781.7在审
发明人：张晓玲;童海骏;戴尅戎 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2010-10-18 - 公布日： 2012-05-16 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种DNA的细胞内示踪分析方法。本发明优化了一种DNA细胞内示踪的方法，选择到了多种显色标记来标记DNA、细胞核以及溶酶体，从而利用共定位的方法研究外源基因在细胞内的存在以及运动情况。
一种 dna 细胞内分析方法

[发明专利]多模态示踪脐带间充质干细胞及其制备方法与应用-CN202111510950.5在审
发明人：张京钟;曾东鳌;余爽;王娜娜;汪婧雯;武月;牛晨旭;周少聪 -专利权人：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
申请日： 2021-12-10 - 公布日： 2022-03-25 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种多模态示踪脐带间充质干细胞及其制备方法与应用，该多模态示踪脐带间充质干细胞过表达FTH1蛋白和SR39TK蛋白，其制备方法包括：1)提供脐带间充质干细胞；2)构建多模态慢病毒表达载体；3)慢病毒包装；4)用重组慢病毒转染脐带间充质干细胞，构建得到多模态示踪脐带间充质干细胞细胞系。本发明的脐带间充质干细胞能过表达FTH1、SR39TK、EGFP，结合该种脐带间充质干细胞可以同时实现核磁成像、PET成像和荧光成像，可提供干细胞移植后的存活、分布和迁徙的动态分布情况的示踪分析，从而为干细胞治疗的疗效评估带来很大便利，为间充质干细胞的实验研究及临床应用提供更为有力的研究基础和科学依据。
多模态示踪脐带间充质干细胞及其制备方法应用

[发明专利]一种外源基因的示踪体系及其应用-CN201110040285.8有效
发明人：张晓玲;童海骏;戴尅戎 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2011-02-17 - 公布日： 2012-08-22 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种外源基因的示踪体系及其应用。本发明优化了一种DNA细胞内示踪的方法，选择到了多种显色标记来标记DNA、细胞核以及细胞膜，从而利用共定位的方法研究外源基因在细胞内的存在以及运动情况，并优化了显色标记的用法用量。借助本发明构建的示踪系统可以对外源基因在转染过程中的运动情况、限速步骤进行较为全面的分析，方法简单易行、稳定可靠。
一种基因体系及其应用

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