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[发明专利]不依赖介质直接转化外源DNA进入米根霉休眠孢子的方法-CN201610813614.0在审
发明人：林峻 -专利权人：福州大学
申请日： 2016-09-09 - 公布日： 2016-12-21 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种不依赖介质直接转化外源DNA进入米根霉休眠孢子的方法，包括米根霉培养和孢子收集、米根霉孢子预处理以及使用HDEN法电击米根霉孢子三个步骤，得到导入待转化质粒的米根霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料，并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入米根霉休眠孢子，可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤，省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等，并且转化率高
不依赖介质接转化外 dna 进入米根霉休眠孢子方法

[发明专利]转化外源ssRNA到米根霉休眠孢子中并表达蛋白质的方法-CN201610812886.9在审
发明人：林峻 -专利权人：福州大学
申请日： 2016-09-09 - 公布日： 2017-02-08 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了转化外源ssRNA到米根霉休眠孢子中并表达蛋白质的方法，包括米根霉培养和孢子收集、米根霉孢子预处理以及使用HDEN法电击米根霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在米根霉休眠孢子内表达蛋白质。
转化 ssrna 到米根霉休眠孢子表达蛋白质方法

[发明专利]利用米根霉发酵马铃薯淀粉制备L-乳酸的方法-CN200910000532.4有效
发明人：金鑫 -专利权人：黑龙江美康汇融生物技术股份有限公司
申请日： 2009-01-15 - 公布日： 2009-06-24 - 主分类号： C12P7/56 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用米根霉发酵马铃薯淀粉制备L-乳酸的方法，包括以下步骤：(1)制备米根霉孢子；(2)将米根霉孢子制备成米根霉孢子乳悬液；(3)将米根霉孢子乳悬液固定到固定化载体上得到固定化米根霉种子；(4)将固定化米根霉种子接种到发酵培养基中进行固定化发酵。本发明方法培育出了高产的米根霉菌株并将其固定到棉布载体上得到固定化米根霉种子，通过所摸索的最适宜的发酵条件进行固定化发酵，马铃薯淀粉转化率高，发酵产物的生物量高，L-乳酸收率高，本发明方法除具有L-乳酸收率高等优点外
利用米根霉发酵马铃薯淀粉制备乳酸方法

[发明专利]一种快速培养高活力米根霉种子的方法-CN201910033798.2在审
发明人：王宝石;赵圣明;赵岩岩;谭凤玲;刘双;杨玲;陈艳艳 -专利权人：河南科技学院
申请日： 2019-01-02 - 公布日： 2019-03-15 - 主分类号： C12N3/00 文献下载
摘要：本发明公开一种快速培养高活力米根霉种子的方法，包括首先制备成熟米根霉孢子悬液，淀粉质原料液化过滤清液稀释，配置低浓度的孢子发芽培养基，接种米根霉孢子悬液，采取两阶段超声处理培养方式，培养4～8h后获得出芽孢子，然后将出芽孢子接种种子培养基，培养一段时间，获得高活力的米根霉种子。本发明提供的米根霉种子培养方法，可缩短种子培养周期，减少培养过程中能量消耗，降低种子染菌风险；同时能够提升米根霉种子活力，进而改善发酵转化率与发酵指数，降低生产成本，显著提升发酵效率。
米根霉米根霉孢子快速培养种子培养孢子出芽悬液淀粉质原料发酵转化率发芽培养基种子培养基超声处理发酵效率发酵指数工业应用过滤清液能量消耗种子活力孢子接种两阶段稀释染菌液化制备接种配置成熟

[发明专利]利用麦麸水解液制备米根霉菌球的方法-CN201210381183.7无效
发明人：闻建平;于守智;王冠一 -专利权人：天津大学
申请日： 2012-10-09 - 公布日： 2013-01-30 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用麦麸水解液制备球状根霉属真菌的方法，调制麦麸水溶液的浓度为80~120g/L，硫酸调pH为2，搅拌均匀；在121℃水解，每1L麦麸水解混合物中加入4~15g/L Ca(OH)2，混合物将米根霉培养在35℃、7天、PDA斜面上，在室温条件下，用无菌水洗下斜面上的米根霉孢子，制备成104~109个/mL的孢子悬液备用。加入麦麸水解液，加入CaCO3，接入1mL米根霉孢子悬液培养14~20h。获得直径区间为2.6~0.71mm尺寸均一的米根霉菌球。
利用麦麸水解制备霉菌方法

[发明专利]一种生物转化法降低夫西地酸副产物含量的方法-CN201911164008.0在审
发明人：高健;黄巍巍;张丽;徐虹;邓丽娜;刘长青;仇静;刘伟 -专利权人：盐城工学院
申请日： 2019-11-22 - 公布日： 2020-03-06 - 主分类号： C12P33/00 文献下载
摘要：本方法以黑根霉或米根霉为转化菌，将夫西地酸粗提液中M副产物转化为夫西地酸。具体包括以下步骤：将黑根霉孢子悬浮液或米根霉孢子悬浮液接入黑根霉或米根霉发酵培养基中，发酵培养24 h；将发酵获得的夫西地酸发酵液经过浸提、离心处理后得到上清液，将上清液蒸发浓缩得到M杂质乙醇浓缩液，将M杂质乙醇浓缩液投入到经发酵培养24 h后的黑根霉或米根霉发酵培养基中，加入氧载体，继续转化M杂质，即可。
一种生物转化降低副产物含量方法

[发明专利]一种在葡枝根霉休眠孢子中表达蛋白质的方法-CN201610813718.1在审
发明人：林峻 -专利权人：福州大学
申请日： 2016-09-09 - 公布日： 2016-11-23 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种在葡枝根霉休眠孢子中表达蛋白质的方法，包括葡枝根霉培养和孢子收集、葡枝根霉孢子预处理以及使用HDEN法电击葡枝根霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在葡枝根霉休眠孢子内表达蛋白质。
一种葡枝根霉休眠孢子表达蛋白质方法

[发明专利]利用米根霉发酵产L－苹果酸的工艺-CN200810018924.9有效
发明人：黄和;何皓;刘宁;李霜;盛晓燕 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2008-01-31 - 公布日： 2008-09-03 - 主分类号： C12P7/46 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用米根霉发酵产L－苹果酸的工艺，包括米根霉孢子悬浮液的制备、种子培养以及发酵生产L－苹果酸，并在发酵过程中向发酵培养基中添加Fe³⁺、Mn²⁺、Cr³⁺、Co²⁺、Al³⁺、Cr⁶⁺中的一种或几种，以改变米根霉的传统代谢途径，使其发酵主要产物为L－苹果酸该方法可以使产物L－苹果酸从安全菌种米根霉发酵的副产物变成主产物，避免了使用致癌菌种黄曲霉发酵生产L－苹果酸的不安全性。而且，该工艺较明显地提高了米根霉发酵生产L－苹果酸的得率，而且操作简单，高效经济，适合于产业化生产。
利用米根霉发酵苹果酸工艺

[发明专利]一种转化外源脱氧核糖核酸进入葡枝根霉休眠孢子的方法-CN201610812891.X在审
发明人：林峻 -专利权人：福州大学
申请日： 2016-09-09 - 公布日： 2016-12-21 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种转化外源脱氧核糖核酸进入葡枝根霉休眠孢子的方法，包括葡枝根霉培养和孢子收集、葡枝根霉孢子预处理以及使用HDEN法电击葡枝根霉孢子三个步骤，得到导入待转化质粒的葡枝根霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料，并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入葡枝根霉休眠孢子，可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤，省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等，并且转化率高
一种转化脱氧核糖核酸进入葡枝根霉休眠孢子方法

[发明专利]米根霉无载体固定化细胞培养方法-CN200710131514.0无效
发明人：姜绍通;潘丽军;郑志;罗水忠;李兴江;朱羽 -专利权人：合肥工业大学
申请日： 2007-08-30 - 公布日： 2008-04-09 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了米根霉无载体固定化细胞培养方法，步骤如下：(1)进行高浓度孢子接种，形成浓的孢子悬乳液；(2)控制通气条件，生成一定数量的菌球体；控制培养基中钠与钾离子比例，使米根霉菌丝球扩增、保持细胞形态稳定；添加甲基硅油材料，形成一定直径的菌球体细胞；菌球体截流，得米根霉无载体固定化细胞；(3)获得的菌球体转接大罐时，控制其菌球体的更新与数目的扩增。
米根霉无载体固定细胞培养方法

[发明专利]一种米根霉与皱褶假丝酵母偶联生产L-苹果酸的方法-CN201410204551.X在审
发明人：李鑫;顾夕梅;勇强;余世袁;欧阳嘉;徐勇;朱均均;周瑾;奚晓桐;沈怡 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2014-05-14 - 公布日： 2014-08-06 - 主分类号： C12P39/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种米根霉与皱褶假丝酵母偶联生产L-苹果酸的方法，皱褶假丝酵母经种子培养后，再经扩大培养，过滤回收菌体备用；其中，所述的扩大培养，先在33℃下发酵培养48h，再在35℃下继续发酵培养48h；米根霉经种子培养形成孢子悬浊液，再经发酵基础培养直至形成颗粒状菌体；将经过发酵基础培养后的米根霉接种于发酵培养基中，以碳酸钠控制pH值4.0～5.0，35℃下发酵生产富马酸和L-苹果酸，发酵48～60h后，用氨水调节pH值至7.5～8.0，再接入皱褶假丝酵母，维持35℃，与米根霉共培养至全部富马酸转化为L-苹果酸。
一种米根霉皱褶酵母生产苹果酸方法

[发明专利]用于高产L-乳酸的米根霉原生质体的制备与再生方法-CN201010553718.5有效
发明人：姜绍通;罗水忠;潘丽军;邱静;郑志;吴学凤 -专利权人：合肥工业大学
申请日： 2010-11-23 - 公布日： 2011-05-18 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明涉及用于高产L-乳酸的米根霉原生质体的制备与再生方法。该方法包括以下操作步骤：A、制备米根霉孢子悬液，B、制备种子培养液，C、制备菌丝悬液，D、酶解细胞壁，E、原生质体分离，F、原生质体再生。本发明所制备的米根霉原生质体形态近似圆形，活力较高，米根霉原生质体制备数最高能达到2.74×106个/mL，再生率最高为6.8%。本发明方法易于操作，设备要求低，为霉菌原生质体制备及再生提供技术参考。
用于高产乳酸米根霉原生质体制备再生方法

[发明专利]一种米根霉及其用途-CN201611111453.7有效
发明人：汪汉成;李文红;唐兴贵;蔡刘体;刘雪梅;张之矾;周红江;邱雪柏;商胜华;曹毅;贾蒙骜;陈兴江;陆宁;孟建玉;兰黔贵 -专利权人：贵州省烟草科学研究院
申请日： 2016-12-02 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种米根霉及其用途，其形态特征：米根霉Y5(Rhizopus oryzae Y5)在PDA培养基上培养，菌落疏松，初呈白色，后变成黑褐色；菌丝匍匐枝爬行、无色；假根发达，指状或根状分枝；孢囊梗直立或稍弯曲，呈褐色；孢子囊呈球形或近球形，呈黑色；可分泌糖化酶、纤维素酶等。
一种米根霉及其用途

[发明专利]一种利用微生物发酵法提取白术多糖的方法-CN202010298525.3有效
发明人：陈虹;张建芬;雷超;陆胤;柯薇 -专利权人：浙江树人学院(浙江树人大学)
申请日： 2020-04-16 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： C12P19/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用微生物发酵法提取白术多糖的方法，所述方法为：将米根霉(Rhizopus oryzae)GDMCC No:60990孢子接种于含无菌水的白术粉中，于28–30℃发酵2–3d，发酵物经超声水提后浓缩在白术多糖超声水提前，增加了米根霉CH5的发酵预处理。米根霉CH5在白术粉中适度生长，产生一些多糖水解酶，对白术不溶性多糖结构组织的水解，促进结合态可溶性多糖的解离，在热水超声浸提时更容易溶出。
一种利用微生物发酵提取白术多糖方法

[发明专利]米根霉固态发酵薯渣生产乳酸新工艺-CN200710022019.6无效
发明人：张洁;潘仁瑞;沈寿国;刘献文;蔡敬民;葛春梅;吴克 -专利权人：合肥学院
申请日： 2007-04-26 - 公布日： 2007-10-10 - 主分类号： C12P7/56 文献下载
摘要：本发明涉及一种米根霉固态发酵生产L－乳酸的方法，采用产孢培养基从斜面种子逐级扩大培养获得：斜面30～36℃培养3～5天后接入装有产孢培养基的三角瓶或茄子瓶中培养，28～36℃培养70～90小时；根据种子接种量扩培后得到相应数量的米根霉孢子；固态发酵培养：将米根霉种子转接入发酵容器中，发酵容器中装有总容积15－60％的固态发酵培养基，培养条件：培养温度28～36℃，湿度65～90％，发酵罐通气量10～20L/h，培养时间48～84小时。
米根霉固态发酵生产乳酸新工艺

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