[发明专利]一种快速培养高活力米根霉种子的方法

摘要

本发明公开一种快速培养高活力米根霉种子的方法，包括首先制备成熟米根霉孢子悬液，淀粉质原料液化过滤清液稀释，配置低浓度的孢子发芽培养基，接种米根霉孢子悬液，采取两阶段超声处理培养方式，培养4～8h后获得出芽孢子，然后将出芽孢子接种种子培养基，培养一段时间，获得高活力的米根霉种子。本发明提供的米根霉种子培养方法，可缩短种子培养周期，减少培养过程中能量消耗，降低种子染菌风险；同时能够提升米根霉种子活力，进而改善发酵转化率与发酵指数，降低生产成本，显著提升发酵效率。本发明操作简便、快速，具有重要的工业应用前景。

主权项

1.一种快速培养高活力米根霉种子的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)制备成熟的米根霉孢子，无菌水清洗，经三层纱布过滤，获得米根霉孢子悬液；(2)淀粉质原料与水按照1∶3比例混合均匀，添加耐高温淀粉酶30U/g，经二次喷射液化(一喷温度95℃；二次喷射温度127℃)，获得液化混液，经过板框压滤获得液化清液，稀释液化清液制备孢子发芽培养基；(3)将(1)米根霉孢子悬液接种至步骤(2)孢子发芽培养基中培养；(4)孢子发芽阶段采取两阶段超声处理培养方式，在第一阶段(0～4h)超声波频率40Khz；第二阶段(4～8h)超声波频率25KHz，获得发芽孢子；(5)将发芽孢子接种至种子培养基培养，控制总糖浓度为4～8％，总氮浓度为0.2～0.4％；(6)将(5)成熟的种子液接种至发酵培养基培养，当发酵液中还原糖浓度低于0.5％时，结束发酵。