本发明提供了M5型急性髓系白血病相关的特异miRNA及其应用。本发明利用新一代高通量测序技术,结合系统的生物信息学分析方法,筛选得到与M5型急性髓系白血病相关的特异miRNA,其RNA序列分别如SEQ ID NO.1‑3所示。本发明还提供了检测该特异miRNA的引物及其在制备检测M5型急性髓系白血病诊断试剂盒中的应用。本发明的特异miRNA可用于白血病的临床诊断和用于指导,本发明检测miRNA的特异性引物对可用于制备检测M5型急性髓系白血病诊断试剂或试剂盒,并对急性髓系白血病的治疗进行用药指导,具备较好的临床应用价值和广阔的应用前景