本发明公开了一种用于检测番鸭呼肠孤病毒的单链抗体、嵌合抗体和双夹心ELISA检测试剂盒,所述单链抗体的序列如SEQ ID No:1所示。所述嵌合抗体包括所述的单链抗体和鸭IgG恒定区Fc段基因。所述双夹心ELISA检测试剂盒包括包被有捕获抗体的酶标板、检测抗体和酶标抗体;其中,所述捕获抗体为如上所述的嵌合抗体;所述检测抗体为鼠抗番鸭呼肠孤病毒多克隆抗体;所述酶标抗体为HRP标记的羊抗鼠IgG。本发明通过提供一种特异性识别番鸭呼肠孤病毒的抗体,并在此基础上通过鸭IgG恒定区Fc段基因进行修饰,降低排斥作用,提高重组后的嵌合抗体对于抗原的针对性识别,提高对番鸭呼肠孤病毒识别的敏感性。