环二鸟苷酸环化酶及其编码基因在多环芳烃检测中的应用，涉及多环芳烃检测。菌株Cycloclasticus sp.P1保藏中心登记入册编号：CGMCC No.12328。环二鸟苷酸环化酶的DNA序列，具有如SEQ ID NO.1所示的碱基序列。环二鸟苷酸环化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。环二鸟苷酸环化酶的多环芳烃结合域序列如SEQ ID NO.3所示。用于表达环二鸟苷酸环化酶的重组载体，含有环二鸟苷酸环化酶的DNA序列。包含所述用于表达环二鸟苷酸环化酶的重组载体的宿主细胞及其表达纯化环二鸟苷酸环化酶。所述环二鸟苷酸环化酶及其编码基因可在多环芳烃检测中应用。
本发明公开了一种双鸟苷酸环化酶改造基因、编码蛋白、工程菌及其构建方法和应用；该双鸟苷酸环化酶改造基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；该双鸟苷酸环化酶改造基因编码蛋白氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示；其工程菌由克隆有SEQ ID NO.1所示基因的重组质粒转入大肠杆菌中获得，还公开了上述工程菌的构建方法及应用该工程菌生产双鸟苷酸环化酶，所得的双鸟苷酸环化酶进一步应用于转化三磷酸鸟苷生成环鸟苷二磷酸的方法该双鸟苷酸环化酶改造基因在大肠杆菌中的表达量高，根据双鸟苷酸环化酶改造基因编码的双鸟苷酸环化酶耐热性极强，最适反应温度为90℃，在70℃下保存6h保留70％的活性，该酶的比活力高、不容易出现产物抑制作用
本发明涉及生物合成技术领域，尤其是涉及一种二鸟苷酸环化酶突变体、工程菌及其应用。本发明中二鸟苷酸环化酶基因来源于皮下假热菌，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；二鸟苷酸环化酶单突变体是在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第262、264、265、280位发生单突变获得的，所述双突变体是在SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第262和264位、262和265位发生双突变获得的，其中筛选得到的262/264双突变体酶活是原始酶的4.12倍本发明构建的二鸟苷酸环化酶突变体工程菌株，有效解决了产物抑制问题，实现了环二鸟苷酸的绿色生产。
