本发明提供了一种食蟹猴U6基因启动子macU6,包括如SEQ ID NO:1所示的核苷酸酸序列。本发明首次在食蟹猴基因组中获得一段与U6启动子同源的序列,即macU6启动子,且具有高效的转录能力。并将其引入到多gRNA表达载体中。本发明中采用Golden Gate克隆技术和Gateway重组克隆技术相结合的方法,构建出由不同U6启动子驱动gRNA串联表达的多gRNA表达载体,该方法简单、高效、灵活、省时。同时,通过引入新的高效的macU6启动子来解决因U6启动子种类过少、U6重复出现导致的载体不稳定问题。
本发明提供了5个用于操纵在植物多细胞表皮毛细胞中特异表达的启动子及其用途。所述启动子包括SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示核苷酸序列的5个启动子。构建所述启动子驱动的GUS报告基因表达载体,并在多细胞表皮毛植物番茄中进行遗传转化,在表皮毛细胞中表达GUS报告基因。本发明提供的5个启动子,都具有能够在植物多细胞表皮毛细胞中特异表达所需要的元件,对于在多细胞表皮毛细胞中表达植物代谢产物、抗病虫害相关化合物、植物香气相关化合物或者改良多细胞表皮毛植物品质中具有重要的价值
双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir及其制备方法,属于DNA疫苗技术领域。双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir为双股闭环DNA分子,是一种基因克隆的载体,长度为5.1Kb,用于表达制备基因工程产品和生产DNA疫苗,含有两种启动子,一种是真核细胞启动子HCMV IE启动子,另一种为大肠杆菌硝酸盐还原酶基因启动子nirB,分别在真核细胞和原核细胞中被激活表达相应的蛋白,含有多克隆酶切位点,用以插入外源基因,该载体具有SEQ ID NO 1所示的序列。