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[发明专利]一种面向带时间窗口与耦合约束任务的分配优化方法-CN202211013087.7有效
发明人：王晓初;周庆瑞;刁靖东;孙昌浩;王辉 -专利权人：中国空间技术研究院
申请日： 2022-08-23 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： G06Q10/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种面向带时间窗口与耦合约束任务的分配优化方法，首先进行预处理，构建每个任务的指派集、构建基因链结构,构建基因链是否为可投影基因链的判据准则,构建评价基因链上单个基因优劣的评价指标,构建将基因链修复为可投影基因链的修复方法,构建从可投影基因链到可行解的投影方法,构建基因链的变异方法,构建基因链的交叉方法,构建可行解的评价指标,设置种群规模、设置外环内环迭代终止条件、初始化候选基因链库；随后，开始外环迭代，根据外环迭代终止条件决定是否终止迭代并输出结果或继续一轮内环迭代；待内环迭代结束后，更新候选基因链库并发送选定的候选基因链包到其他智能体；在输出结果阶段，从候选基因链库中选择最好的基因链，将其投影为可行解作为最终分配优化结果。
一种面向时间窗口耦合约束任务分配优化方法

[发明专利]一种植物基因表达载体的构建方法和应用-CN202111188664.1在审
发明人：李欣勇;陈志坚;董荣书;刘攀道;黄睿;丁西朋 -专利权人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种植物基因表达载体的构建方法和应用，所述植物基因表达载体的构建方法包括：从植物基因组中分离靶标基因对应的基因序列：根据靶标基因设计聚合酶链式反应引物，进行PCR，即可得到靶标基因对应的基因序列；构建质粒载体：通过引入酶切位点、对质粒进行双酶切处理、电泳、凝胶回收、连接、转化、提取，得到质粒载体；将含有靶标基因对象基因序列连接到构建的质粒载体上，构建含靶标基因的植物表达载体。本发明能够快速的构建基因表达载体，方法简便、成本低廉，成功率高；利用本发明的方法构建的基因表达载体，插入的基因能够在植物体内稳定表达，可用于转基因过程细胞的筛选和观察，有效提高转基因效率。
一种植物基因表达载体构建方法应用

[发明专利]一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用-CN201110193102.6无效
发明人：张智英;张婷婷;辛颖;杨涵江;张志强;徐坤;王令 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2011-07-11 - 公布日： 2012-03-07 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明是一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。所述载体为PB-rtTA-NIT-STP，是通过下述方法构建：LoxP-SV40P nco-IRES-tk-PolyA-LoxP基因表达盒的构建；将基因表达盒的扩增片段与PXL-Bccll连接，构建基本转基因载体PB-NIT；含有目的基因SV40T和p 53的转基因载体PB-NIT-STP的构建；含有Tet结合域rtTA的筛选载体PB-rtTA-NIT-STP的构建。本发明构建的转基因载体具有有效提高转基因效率、便于筛选的优点。
一种 piggybac 座子诱导细胞永生转基因载体构建方法及其应用

[发明专利]CIPK2在提高水稻抗/耐汞能力中的应用-CN201810446774.5有效
发明人：潘建伟;潘伟槐;郑仲仲;沈金秋;严旭 -专利权人：兰州大学
申请日： 2018-05-11 - 公布日： 2021-04-23 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种CBL互作蛋白激酶基因的用途：用于构建转基植物，转基因植物具有汞胁迫抗/耐性。所述基因为拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因AtCIPK2，用于构建转基因拟南芥，转基因拟南芥具有汞胁迫抗/耐性；所述基因为青藏高原一年生野生大麦(Hordeum spontaneumC.Koch)基因HsCIPK2，用于构建转基因拟南芥，转基因拟南芥具有汞胁迫抗/耐性；或是用于构建转基因水稻，转基因水稻具有汞胁迫抗/耐性。
cipk2 提高水稻能力中的应用

[发明专利]可多次交换的无标记定点整合转基因系统及其应用-CN201410016556.X有效
发明人：张欢欢;李勇;刘楚新;刘欢;张兴举;李飞达;杜玉涛 -专利权人：深圳华大基因研究院;深圳华大方舟生物技术有限公司
申请日： 2014-01-14 - 公布日： 2018-10-09 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：提供了可多次交换的无标记定点整合转基因系统及其应用，其中该转基因系统包括：第一构建体，所述第一构建体为TALEN载体，所述TALEN载体识别并剪切友好位点序列；第二构建体，所述第二构建体包含左同源臂、右同源臂、筛选标记表达框和第一整合酶识别序列loxp和lox2272；第三构建体，所述第三构建体包含目的外源基因和第二整合酶识别序列loxp’和lox2272’；以及第四构建体，所述第四构建体包含整合酶基因Cre利用该转基因系统能够简单、快捷、高效地实现目的外源基因在动物基因组上的定点插入，且制备获得的转基因动物细胞不含任何抗性标记基因，制备周期短、安全可靠，目的外源基因能够稳定遗传到下一代。
多次交换标记定点整合转基因系统及其应用

[发明专利]一种微生物基因数据库的构建方法及系统-CN202280004306.7在审
发明人：徐晓强;夏炎;王晓凯;谢海亮 -专利权人：深圳零一生命科技有限责任公司
申请日： 2022-08-19 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： G16B50/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种微生物基因数据库的构建方法及系统，属于基因数据库构建技术领域。所述方法包括以下步骤：获取目标微生物基因组数据，对获取的基因组数据进行基因预测，获得包含序列和物种注释的基因注释文件；获得每种目标微生物的代表基因；将所述代表基因中的每个基因分别比对到核酸序列数据库，获得比对结果；过滤比对结果，获得基因注释物种信息，保留注释物种与来源物种相同的基因，进而构建所述微生物基因数据库。利用本发明的构建方法构建微生物基因数据库，可以根据目标微生物的变化对数据库进行更新，实时性更强，利用本发明构建的微生物数据库，仅包含目标微生物基因序列，对比时间更短。
一种微生物基因数据库构建方法系统

[发明专利]一种微生物基因数据库的构建方法及系统-CN202111443169.0有效
发明人：徐晓强;夏炎;王晓凯;谢海亮 -专利权人：深圳零一生命科技有限责任公司;夏炎
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： G16B50/30 文献下载
摘要：本发明公开了一种微生物基因数据库的构建方法及系统，属于基因数据库构建技术领域。所述方法包括以下步骤：获取目标微生物基因组数据，对获取的基因组数据进行基因预测，获得包含序列和物种注释的基因注释文件；获得每种目标微生物的代表基因；将所述代表基因中的每个基因分别比对到核酸序列数据库，获得比对结果；过滤比对结果，获得基因注释物种信息，保留注释物种与来源物种相同的基因，进而构建所述微生物基因数据库。利用本发明的构建方法构建微生物基因数据库，可以根据目标微生物的变化对数据库进行更新，实时性更强，利用本发明构建的微生物数据库，仅包含目标微生物基因序列，对比时间更短。
一种微生物基因数据库构建方法系统

[发明专利]一种严格缺氧靶向载体及其应用-CN200610110122.1有效
发明人：王玉霞;吴少平;武军华;贾培媛;孙曼霁 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所
申请日： 2006-07-31 - 公布日： 2008-02-06 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：本发明提供一种新型真核基因构建体，在其启动子上游插入HRE，在效应基因前插入ODD，从而使该基因构建体具有严格缺氧靶向性。本发明还提供含有所述基因构建体的载体。本发明另外涉及含有所述基因构建体的药物组合物。
一种严格缺氧靶向载体及其应用

[发明专利]EGFP基因重组杆状病毒表达载体的构建方法-CN201210012811.4无效
发明人：葛菁萍;高冬妮;平文祥;楼庄伟 -专利权人：黑龙江大学
申请日： 2012-01-16 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：EGFP基因重组杆状病毒表达载体的构建方法，涉及EGFP基因重组杆状病毒表达载体的构建方法。是要解决目前重组杆状病毒质粒载体转导效率低、表达效率较工业生产要求差距大、表达时间短等问题。方法；一、PCR扩增EF1α基因；二、构建质粒pT-EF1α；三、构建质粒pWK；四、PCR扩增L-ITR基因，构建pWK-L-ITR；五、PCR扩增R-ITR基因，构建pWK-ITR；六、PCR扩增EGFP基因，构建EGFP基因重组杆状病毒表达载体pWK-ITR-EGFP。本发明通过添加VSV-GED、WPRE和ITR元件，增强了外源基因的表达效率，增强了病毒的转导效率，延长了表达时间。
egfp 基因重组杆状病毒表达载体构建方法

[发明专利]一种表达外源荧光蛋白球虫的构建方法-CN202011502338.9有效
发明人：曲自刚 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2020-12-18 - 公布日： 2021-12-17 - 主分类号： C12N1/11 文献下载
摘要：本发明提供了一种表达外源荧光蛋白球虫的构建方法，属于基因工程技术领域。表达外源荧光蛋白球虫的构建方法，针对球虫的目的基因设计gRNA，构建含gRNA的基因编辑质粒；构建含目标基因和mCherry基因的同源重组质粒；将基因编辑质粒和同源重组质粒共同转染球虫的子孢子；将转染后的子孢子感染动物本发明利用基因编辑技术和同源重组技术相结合在球虫基因组中敲入荧光蛋白mCherry基因和筛选基因，构建的球虫能稳定高效表达荧光信号。所述构建方法不仅能成功构建表达有外源荧光蛋白球虫而且荧光蛋白表达稳定且效率高，适用于球虫的生长、基因工程或药物筛选方面的研究。
一种表达荧光蛋白构建方法

[发明专利]一种Piezo1基因敲除的肾小球旁细胞系及其构建方法-CN202110831927.X在审
发明人：周一鸣;杨小强;汪乐 -专利权人：中山大学孙逸仙纪念医院
申请日： 2021-07-22 - 公布日： 2021-11-02 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种Piezo1基因敲除的肾小球旁细胞系及其构建方法。其中，采用靶序列为小鼠第8号染色体第122502249～122502271个碱基的sgRNA；该sgRNA可用于特异性识别Piezo1基因、敲除Piezo1基因、构建Piezo1基因敲除的细胞系、制备用于构建Piezo1基因敲除的细胞系的产品、构建Piezo1基因敲除的动物模型、制备用于构建Piezo1基因敲除的动物模型的产品，尤其在构建Piezo1基因敲除的细胞系时，相对传统文献报道的shRNA干扰方法，该sgRNA可以从基因组层面对靶基因Piezo1表达进行调控，显著提高Piezo1基因的抑制效率。
一种 piezo1 基因肾小球细胞系及其构建方法

[发明专利]生产NMN的菌株及其构建方法和应用-CN202111342647.9在审
发明人：常红星;杨付伟;马光;单雨瑶;张雅萍;王学兵;王竞辉 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2021-11-12 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术和生物化工领域，提供了一种生产NMN的菌株的构建方法、根据所述方法构建的菌株以及菌株的利用。其中，所述构建方法包括：(1)构建表达以下基因的质粒，所述基因包括：葡萄糖6‑磷酸异构酶基因Pgi、烟酰胺磷酸核糖转移酶基因Nampt和PPP途径基因，其中所述PPP途径基因包括：葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶基因Zwf、6‑磷酸葡萄糖酸内酯酶基因Pgl、6‑磷酸葡糖酸脱氢酶基因Gnd、核糖‑5磷酸异构酶A基因RpiA、核糖‑5磷酸异构酶B基因RpiB、磷酸核糖焦磷酸激酶基因Prs；(2)将质粒转化至大肠杆菌中，筛选基因转化阳性菌株即得。本发明构建的重组大肠杆菌具有高效制备NMN能力，菌株性能优良，NMN制备简单。
生产 nmn 菌株及其构建方法应用

[发明专利]一种水稻基因定位克隆的新方法-CN201110350059.X无效
发明人：王松文;亓娜;孙津伟;张欣;施利利;丁德亮;崔晶 -专利权人：天津农学院
申请日： 2011-11-08 - 公布日： 2012-03-21 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：一种水稻基因定位克隆的新方法。1.构建基因定位群体。2.构建基因定位群体、作图群体、基因效应群体。3.以性状为导向，以区间作图为基本方法确定目标基因区。4.依据“Match”原理鉴定目标基因。5.建立多个群体用于鉴定基因效应。6.当紧密连锁的标记与基因的遗传距离为0.1-1cm时候选基因，进行功能互补实验在“基因组扫描”阶段减少了实验消耗，作图效率提高、定位基因的时程缩短。容易产生大的“次级群体”，更容易“逼近”目标基因。因为构建了基础群体，其群体多态性高，目标基因多，如果需要构建新的定位群体，可以通过衍生或重新构建新群体。适于定位、克隆多个基因。有利于揭示某些特定性状的基因作用，克隆一个或几个基因。
一种水稻基因定位克隆新方法

[发明专利]高效生物合成虾青素的集胞藻6803基因工程菌及构建方法及应用-CN201911215898.3有效
发明人：张卫文;刁进进;宋馨宇;陈磊 -专利权人：天津大学
申请日： 2019-12-02 - 公布日： 2022-11-08 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明公开了高效生物合成虾青素的集胞藻6803基因工程菌及构建方法及应用，构建方法为：扩增CrtWD和CrtZA基因；将pTZD与CrtWD基因构建pTZD‑WD；将pBA3031M与CrtZA基因构建pBA3031M‑ZA；并依次转入集胞藻6803中，得到工程菌WD‑ZA；扩增FBS基因，将pJAK与FBS构建pJAK‑FBS转入工程菌WD‑ZA中，得到WD‑ZA‑FBS；扩增基因dxs‑E和基因ispA‑E，构建操纵子片段dxs‑RBS‑ispA，将p0168与dxs‑RBS‑ispA片段构建p0168‑DI转入菌株WD‑ZA‑FBS中，本发明的工程菌最终虾青素的产量达29.6mg/g。
高效生物合成虾青素集胞藻 6803 基因工程构建方法应用

[发明专利]牛RORα基因的克隆、真核表达载体的构建及其应用-CN202211031385.9在审
发明人：陈华涛;秦新喜;刘薇;靳亚平;王逢博;杨王浩;赵泓淙;张粉丽 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2022-08-26 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明公开了牛RORα基因的克隆、真核表达载体的构建及其应用，属于基因的克隆、真核表达载体的构建技术领域，本发明提供的牛RORα基因的克隆、真核表达载体的构建及其应用，成功构建了牛RORα基因的真核表达载体，补充了牛RORα基因分子水平研究的空白，目前关于RORα基因功能的研究主要以小鼠和人类的基因和细胞为模型，我们成功构建了牛RORα基因的研究模型，确认了NCBI数据库中牛RORα基因预测序列(XM_024997674
ror 基因克隆表达载体构建及其应用

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