本发明公开了一种低温耐盐耐产物抑制的β‑N‑乙酰葡糖胺酶,β‑N‑乙酰葡糖胺酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;制备方法包括:包含β‑N‑乙酰葡糖胺酶基因jb10nagA的重组载体,重组载体为pEasy‑E2‑jb10nagA,将乙酰葡糖胺酶基因插入到表达载体中,使核苷酸序列与表达调控序列相连接,用重组载体转化宿主细胞,得重组菌株;培养重组菌株,诱导重组β‑N‑乙酰葡糖胺酶JB10NagA表达;回收所表达的β‑N‑乙酰葡糖胺酶JB10NagA。本发明的β‑N‑乙酰葡糖胺酶可应用于海产品加工、生物燃料、医学、功能性食品等行业。