本发明提供一种醇脱氢酶LC3及其基因和应用。该醇脱氢酶LC3的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明从雷氏乳酸杆菌中提取了醇脱氢酶基因lc3，并构建了基因工程菌株，实现了该醇脱氢酶基因lc3的异源表达，所产生的醇脱氢酶LC3具有优良的酶学特性。本发明还成功构建了含有葡萄糖脱氢酶gdh基因和醇脱氢酶基因lc3的共表达基因工程菌株，实现了葡萄糖脱氢酶和醇脱氢酶的共表达。本发明还将上述醇脱氢酶LC3及其基因工程菌株应用于生物酶法合成手性醇(R)‑4‑氯‑3羟基丁酸乙酯和其他手性醇类产品的生产中，具有底物浓度高、反应速率快、方便的特点。
本发明涉及分子生物学领域，尤其涉及一种预苯酸脱氢酶及其多克隆抗体。预苯酸脱氢酶的多克隆抗体的制备方法，包括步骤1)以氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的预苯酸脱氢酶为抗原，免疫小鼠制备抗血清；2)纯化抗血清得到预苯酸脱氢酶的多克隆抗体。本发明利用PCR技术在喜冷杆菌属Cryobacterium中扩增得到预苯酸脱氢酶基因，并通过基因工程技术得到Ecoli BL21‑pET21a‑PDG重组菌株，诱导表达重组菌株得到预苯酸脱氢酶蛋白，该蛋白具有较好的低温耐受，而且以预苯酸脱氢酶为抗原成功得到预苯酸脱氢酶的多克隆抗体，该多克隆抗体能够准确检测预苯酸脱氢酶。
本发明公开了一种亮氨酸脱氢酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了编码该亮氨酸脱氢酶的基因。本发明提供了与目前已知的亮氨酸脱氢酶来源不同的一种新型脱氢酶。本发明以Bacillus coagulans基因组为基础，克隆其亮氨酸脱氢酶基因ldh，该核苷酸序列如SEQ ID NO.1，编码亮氨酸脱氢酶。亮氨酸脱氢酶在催化羰基不对称还原制备光学纯氨基酸及其衍生物具有非常大的优势。同时，本发明还提供了制备、分离、纯化具有耐热型亮氨酸脱氢酶活性的方法。
