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[发明专利]基于细胞分泌物筛选源细胞的方法、源细胞、细胞库及产品-CN202110445807.6在审
发明人：沈丹鹏;谢凡;於洪亮;王皓;王宏伟;宁廷鲁;王志强;齐念民 -专利权人：上海泉生生物科技有限公司
申请日： 2021-04-23 - 公布日： 2022-11-11 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种源细胞的筛选方法，将源细胞与免疫细胞共培养，其中，通过共培养后对免疫细胞分泌因子能力筛选源细胞。还公开了由该方法筛选的源细胞、细胞库及制成的产品。所述源细胞为干细胞，通过本方法筛选的源细胞，可以针对具体受者的疾病或病症选择相适应的源细胞进行治疗，因而相对于传统的方法，能够提高科学性、有效性。
基于细胞分泌物筛选方法产品

[发明专利]促进人脐带间充质干细胞增殖的方法和应用-CN201911421177.8在审
发明人：李志强;张娜;王钊林;郝子娟;燕小宁 -专利权人：上海林望生物科技有限公司
申请日： 2019-12-31 - 公布日： 2020-04-17 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养领域，尤其涉及一种促进人脐带间充质干细胞增殖的方法和应用。该方法包括以下步骤：S1：从人脐带组织中分离得到人脐带间充质干细胞；S2：从大鼠体内分离得到大鼠结肠成纤维细胞；S3：将所述人脐带间充质干细胞与所述大鼠结肠成纤维细胞用transwell培养小室和细胞培养板进行共培养，上室接种大鼠结肠成纤维细胞，下室接种人脐带间充质干细胞。本发明首次公开了采用大鼠结肠成纤维细胞与人脐带间充质干细胞共培养的方式以促进人脐带间充质干细胞增殖。该方法增殖后获得细胞更多，细胞活力和增殖能力强，培养至P18代后仍然保持良好的增殖能力，且能很好保持脐带间充质干细胞的形态和良好的干细胞特性。
促进脐带间充质干细胞增殖方法应用

[实用新型]共培养装置-CN202021010451.0有效
发明人：张罗;王成硕;王明;杨军;王阳;余辉 -专利权人：首都医科大学附属北京同仁医院;北京市耳鼻咽喉科研究所
申请日： 2020-06-04 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12M3/06 文献下载
摘要：一种共培养装置，包括盛有培养液A的培养室、盛有培养液B的培养皿和盛有呼吸道上皮细胞的培养小室，在培养皿底部有免疫细胞或微生物，培养皿中插有培养室，培养室中插有培养小室，培养小室底壁为孔径0.4微米的聚碳酸酯膜，培养室底壁为孔径0.1‑0.22微米的聚碳酸酯膜，培养液A为BEGM支气管上皮细胞培养基，培养液B为免疫细胞培养基或微生物培养基。呼吸道上皮细胞与免疫细胞或微生物共培养时，一方面培养室底壁在一定程度上限制了双侧培养液的扩散速度，可减缓培养液B与培养液A的互相混合速度，减小培养液B对呼吸道上皮细胞的不利影响；另一方面培养室底壁可完全阻止培养皿中微生物进入培养室，从而减小了培养皿中内容物对呼吸道上皮细胞的损害。
培养装置

[发明专利]一种通过固定化微生物共培养利用蔗糖异养培养微藻的方法-CN201710622909.4在审
发明人：王仕楷;汪旭;孙祥圣;田永婷 -专利权人：扬州大学
申请日： 2017-07-27 - 公布日： 2017-10-24 - 主分类号： C12N1/12 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种通过固定化微生物共培养利用蔗糖异养培养微藻的方法。该方法包括微生物细胞的固定化、配置培养基、先后在培养基接入微藻细胞含固定化微生物的微球、培养及细胞收集的步骤。本发明通过将具有胞外蔗糖酶分泌能力的微生物固定化后与微藻进行共培养，不仅解决了微藻难以利用蔗糖进行异养生长的问题，同时实现了现有共培养技术存在的藻‑菌难分离的问题，在有效提高微藻对蔗糖的利用效率的同时，实现了微藻的纯培养。使得微藻的异养培养可以利用比较低廉的有机碳源进行，同时实现了微藻细胞的纯培养，可广泛适用于各种藻基生物产品的生产过程中。
一种通过固定微生物培养利用蔗糖方法

[发明专利]肺纤维化体外模型的构建方法-CN202210442382.8有效
发明人：邹欢;朱宇;兰坚强;黄敏 -专利权人：创芯国际生物科技（广州）有限公司
申请日： 2022-04-25 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：类器官肺纤维化体外模型的构建方法，步骤包括：(1)获取肺组织，清洗、剪碎；(2)置于trypsin或IV型胶原酶中，摇晃消化获得细胞小团块；(3)用2倍HBSS终止消化，离心收集细胞沉淀；(4)进行红细胞裂解处理后，一部分细胞种胶，胶滴凝固后加入类器官培养基进行类器官培养，另一部分细胞用成纤维细胞培养基贴壁培养，获得成纤维细胞；(5)肺类器官纤维化模型的构建；(7)成纤维细胞‑肺类器官共培养体系的纤维化模型的构建；(8)成纤维细胞‑免疫细胞‑肺类器官共培养体系的纤维化模型的构建。
纤维化体外模型构建方法

[发明专利]一种诱导脐带间充质干细胞分化为类神经细胞的方法-CN201010124593.4无效
发明人：沈尊理;祝加学;秦金保 -专利权人：上海市第一人民医院
申请日： 2010-03-12 - 公布日： 2011-09-21 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明属于细胞生物学领域，涉及一种诱导脐带间充质干细胞分化为类神经细胞的方法。该方法将脐带间充质干细胞与许旺细胞用0.4μm孔径的Transwell小室隔离共培养，所用培养液为许旺细胞培养液；每三天全量或者半量换一次液，培养两周即可得到类神经细胞。本发明应用隔离共培养的方法，复合胶原酶和透明质酸酶混合后消化脐带可以大量分离脐带间充质细胞，经传代至第3代就可以获得高纯度的间充质干细胞。使脐带间充质干细胞诱导分化为了神经细胞，细胞分化率达到70％以上。其细胞表达NF-200，nestin，β-III-tubulin等神经细胞特异性标记率达到70～80％。
一种诱导脐带间充质干细胞化为神经细胞方法

[发明专利]干细胞免疫调节应用方法和设备-CN201080029802.5有效
发明人：赵勇 -专利权人：伊利诺伊大学理事会
申请日： 2010-12-08 - 公布日： 2012-05-23 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：该发明揭示了单个核细胞和/或淋巴细胞通过与干细胞共培养，来调节它们功能的方法和设备。该发明也披露了采用干细胞的免疫教育作用，纠正自身免疫反应细胞的功能紊乱机制，以治疗自身免疫性疾病和免疫紊乱相关的疾病，例如糖尿病。该发明的一个方面，揭示了生物反应器(干细胞教育器)调节淋巴细胞并抑制自身反应T细胞。该生物反应器包括一个培养室，这个培养室至少拥有一层带正电和/或疏水性表面的基材，一群干细胞贴壁附着在基材表面，一个将单个核细胞和/或淋巴细胞导入这个培养室的进口管道，和一个用于导出经过干细胞共培养处理过的单个核细胞和/或淋巴细胞的出口管道。
干细胞免疫调节应用方法设备

[发明专利]一种可降解人iPSCs源性视网膜神经支架及其制作方法-CN201510743010.9在审
发明人：葛坚;张海军;李康寯 -专利权人：中山大学中山眼科中心;山东百多安医疗器械有限公司
申请日： 2015-11-03 - 公布日： 2016-01-27 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：在与内眼形状相适应、网状、可降解的聚乳酸-羟基乙酸聚合物支架上包被基质胶Matrigel，形成Matrigel-PLGA内眼移植/细胞共培养支架，将人iPSc源性的3D视网膜的神经纤维层消化为单细胞，以该单细胞作为种子细胞接种至Matrigel-PLGA内眼移植/细胞共培养支架上，然后置于诱导分化培养基中进行培养，种子细胞在支架上定向分化成视网膜神经细胞，从而形成可降解人iPSCs源性视网膜神经支架，所述的诱导分化培养基为含有神经营养因子和维持浓度的视网膜分化营养液组成的培养基
一种降解 ipscs 视网膜神经支架及其制作方法

[发明专利]预防乙型肝炎病毒引发肝癌的方法-CN202010385183.9在审
发明人：胡宗强;李立;尹燕锋;颜春涛;张熙冰;江杰 -专利权人：胡宗强;李立;尹燕锋;颜春涛;张熙冰;江杰
申请日： 2020-05-09 - 公布日： 2020-08-21 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明涉及一种预防发病的方法，公开了一种预防乙型肝炎病毒引发肝癌的方法，具体步骤包括：外培养HBV感染阳性肝癌细胞和HBV感染阴性肝癌细胞，并分离两种细胞中的外泌体，采用qRT‑PCR检测外泌体中miR‑142‑3p的表达水平；培养HBV感染阳性肝癌细胞，并将培养上清与外周血T淋巴细胞进行共培养，采用qRT‑PCR检测miR‑142‑3p的表达情况；将T淋巴细胞与HBV感染阳性肝癌细胞进行共培养，然后将细胞进行分组处理本发明的实验方案得出HBV感染阳性肝癌细胞外泌体对肝癌的发生发展产生影响，因而可以根据该方法得到的结论合理预防乙型肝炎病毒引发肝癌。
预防乙型肝炎病毒引发肝癌方法

[发明专利]一种对肿瘤细胞具有高杀伤能力的复合型免疫细胞制备方法-CN202210577793.8在审
发明人：李久续;山口桥一郎 -专利权人：全球细胞控股（广州）有限公司
申请日： 2022-05-26 - 公布日： 2022-06-24 - 主分类号： C12N5/0784 文献下载
摘要：一种对肿瘤细胞具有高杀伤能力的复合型免疫细胞制备方法,其特征在于，包括如下步骤：步骤1，采集外周血并分离出单个核细胞，对分离出的单个核细胞进行培养，留取悬浮细胞和贴壁细胞；步骤2，通过所述贴壁细胞培养出成熟DC细胞；步骤3，通过所述悬浮细胞利用特定免疫细胞基础培养液进行接种以培养出特定免疫细胞培养体系；步骤4，向所述特定免疫细胞培养体系中加入在所述步骤2中获得的DC细胞进行共培养。
一种肿瘤细胞具有杀伤能力复合型免疫制备方法

[发明专利]人原代肝细胞与肝非实质细胞共培养方法-CN201310282851.5有效
发明人：胡康洪;周明;曹晓蓓 -专利权人：康珞生物科技（武汉）有限公司
申请日： 2013-07-08 - 公布日： 2014-01-15 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种人原代肝细胞与肝非实质细胞共培养方法，该方法是将新鲜的肝组织经暴露的血管用灌注溶液I和灌注溶液II冲洗干净；直至肝组织失去弹性消化完全；然后置于含有细胞洗液的培养皿中，筛选得到单细胞悬液；低密度接种到胶原包被的培养板或培养皿中培养，首先在生长因子的作用下形成100%融合度的单层共培养；最后置于加入含有2%DMSO的维持培养液培养；肝细胞堆积形成肝非实质细胞环绕、入侵生长的肝岛状结构。本发明利用常规的肝细胞分离技术，实现了长达120天的肝细胞体外长期培养与长达72天保持HBV易感性。并且该系统可发展为新的抗HBV药物筛选与评价平台，对抗病毒药物研究具有重要价值。
人原代肝细胞实质细胞培养方法

[发明专利]用于体外细胞共培养的力学加载流动腔装置-CN201010293367.9无效
发明人：樊瑜波;孙联文;杨肖;蒲放;贡向辉 -专利权人：北京航空航天大学
申请日： 2010-09-27 - 公布日： 2011-01-12 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种体外细胞共培养力学加载流动腔装置，包括：上流动腔；下流动腔；置于上和下流动腔之间的可渗透膜，用于把所述上和下流动腔分隔开来，可渗透膜的上下两表面可接种两种不同的细胞；通过第一流道与上流动腔相连通的第一灌流系统本发明中，可渗透膜的微孔允许共培养的两种细胞通过突触直接实现胞间连结，并且使互相渗透的上下两腔内灌流液保持渗流平衡，达到细胞因子垂直扩散。上下两腔可对膜两侧细胞分别施加流体剪切应力，可实现两种细胞在线共培养的同时分别施加剪切应力。本发明可在同一环境下体外共培养两种不同细胞，同时对两种细胞施加不同模式双剪切应力的流动腔装置。
用于体外细胞培养力学加载流动装置

[实用新型]一种组合式细胞共培养装置-CN201820702311.6有效
发明人：孙颖浩;董克勤;王超;彭广;鲁欣;黄海;孔德沛;高旭 -专利权人：上海长海医院
申请日： 2018-05-11 - 公布日： 2019-03-05 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种组合式细胞共培养装置，其包括：多细胞培养皿，所述多细胞培养皿内部底面上设有凸起的安装座，所述安装座上设有2～5个第一立柱插槽；若干载片，所述载片设有可拆卸的立柱，所述立柱插在所述第一立柱插槽中，所述载片平铺在所述多细胞培养皿中，各所述载片之间以及各所述载片与所述多细胞培养皿底面之间均留有间隙；以及皿盖，用于盖覆所述多细胞培养皿。本实用新型中，各所述载片相互分离，可分别承载细胞进行共培养，无需使用半透膜，可避免由于使用半透膜而引起的各种问题，而且共同培养的细胞生长于同一液体环境中的载片上，细胞分泌物接触更充分，变量控制更加容易，
细胞培养皿立柱细胞共培养装置本实用新型安装座半透膜组合式插槽载片传代细胞分泌物变量控制可拆卸的细胞生长液体环境染色底面皿盖平铺凸起承载细胞保存

[发明专利]一种生产嵌合抗原受体修饰的γδT细胞的方法-CN201810436500.8有效
发明人：李建强;王庆龙;王琳 -专利权人：河北森朗生物科技有限公司
申请日： 2018-05-09 - 公布日： 2020-02-14 - 主分类号： C12N5/0784 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产嵌合抗原受体修饰的γδT细胞的方法。本发明将靶向于FPP合成酶的shFPPS通过慢病毒载体转染K562细胞，下调了K562细胞中FPPS的表达量，构建了FPPS表达量降低的K562‑shFPPS细胞系。本发明将K562‑shFPPS细胞系加入γδT细胞培养体系中与γδT细胞进行共培养，发现K562‑shFPPS细胞系能促进γδT细胞的体外分化和扩增。本发明还将表达CAR的慢病毒载体加入含有该细胞系的γδT细胞培养体系中进行共培养，发现K562‑shFPPS细胞系还可以有效提高CAR基因的转染率。本发明提供的方案有效解决了大规模生产CAR‑γδT细胞的技术瓶颈，具有良好的应用前景。
慢病毒载体培养体系嵌合抗原修饰转染合成酶技术瓶颈体外分化有效解决表达量靶向构建扩增发现下调生产应用

[发明专利]一种诱导羊膜间充质干细胞分化为肝脏样细胞的方法-CN201410448790.X在审
发明人：阎影;林元楷;唐娜 -专利权人：阎影;林元楷;唐娜
申请日： 2014-09-05 - 公布日： 2016-08-24 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了一种诱导羊膜间充质干细胞分化为肝脏样细胞的方法，所述分化方法步骤为：将羊膜间充质干细胞种于培养瓶中，用正常培养液培养至其汇合度达到80‑90％；在培养液中加入25μmol/L的5‑氮胞苷，处理24小时；将细胞培养液更换为诱导培养液：IMEM基础培养基+2％FBS+20ng/ml HGF+20ng/ml FGF2+2.5mmol/L nicotinamide+10μmol/L SB431542，每隔2天换液，共7天；将细胞培养液更换为成熟培养液：IMEM+2％FBS+20ng/ml HGF+20ng/mlOSM+1μmol/L Dex，每隔两天换液，共14天。本发明诱导效率高，所述方法操作简单，可为临床提供很好地细胞来源。
一种诱导羊膜间充质干细胞化为肝脏细胞方法