本发明涉及DNA聚合酶。特别地，本发明涉及基于嗜冷芽孢杆菌来源DNA聚合酶的DNA聚合酶。本发明提供分离的DNA聚合酶或其酶活性片段，所述DNA聚合酶包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列或包含与SEQ ID NO:1至少70％相同的氨基酸序列。本发明还提供了包含编码DNA聚合酶的核苷酸序列的核酸分子。本发明还提供了核苷酸聚合方法和扩增核酸的方法，其中使用DNA聚合酶或其酶活性片段。
本申请提供一种组合物，其包含重组DNA聚合酶与3’‑酯化核苷酸类似物。所述重组DNA聚合酶的氨基酸序列与9°N DNA聚合酶(SEQ ID NO:1)有至少90％的同源性，且所述重组DNA聚合酶包含在对应于9°NDNA聚合酶氨基酸残基141与143位置的至少二个突变。本申请还提供一种重组DNA聚合酶。所述重组DNA聚合酶的氨基酸序列与9°N‑IIIDNA聚合酶(SEQ ID NO:3)有至少90％的同源性，且该重组DNA聚合酶包含在对应于9°N‑III DNA聚合酶氨基酸残基480与486位置一个或二个突变本申请还提供了一种进行聚合反应的方法。
本发明公开了一种多肽、嵌合聚合酶及其应用。该多肽具有如SEQ ID No.3所示的氨基酸序列。该嵌合聚合酶包括：噬菌体DNA聚合酶；上述多肽；连接噬菌体DNA聚合酶和上述多肽的连接肽。野生型的DNA聚合酶对高浓度盐的耐受性较差，在高氯化钠或氯化钾环境中，其活性急剧降低，无法得到预期的延生产物，而本发明所提供的多肽可以有效提高DNA聚合酶的耐盐性，在通过连接肽将其连接到DNA聚合酶上形成嵌合DNA聚合酶后，聚合酶的耐盐性有了很大的提升，可以适用于较高盐浓度下的扩增。
