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[发明专利]一种胃间质瘤类器官培养基及培养方法-CN202210906986.3有效
发明人：兰坚强;朱宇;宋志文;井建玲;黄敏 -专利权人：创芯国际生物科技（广州）有限公司
申请日： 2022-07-29 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明涉及一种胃间质瘤类器官培养基及培养方法，包括基础细胞因子、特异性细胞因子、抑制剂、原代细胞抗生素和基质胶；按照终浓度组成，所述基础细胞因子包括：10‑100ng/ml的EGF，20‑500ng/ml500ng/ml的R‑spondin 1，20‑500ng/ml的Wnt3a；所述特异性细胞因子包括1‑50ng/ml的SCF，10‑200ng/ml的IGF‑1，1‑50ng/ml的CCBE1，所述原代细胞抗生素浓度为本发明培养基可以成功培养出胃间质瘤类器官，该类器官可以用于后续的药敏实验，可用于胃间质瘤组织的生理病理研究以及后续的基因治疗，为再生医学提供稳定的类器官研究材料。
一种间质器官培养基培养方法

[发明专利]流行性感冒原代地鼠肾细胞多价疫苗的制备方法-CN201010532036.6有效
发明人：李云英;王玉清;吴歧 -专利权人：深圳市孚沃德生物技术有限公司
申请日： 2006-08-11 - 公布日： 2011-07-06 - 主分类号： A61K39/145 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备流感疫苗的方法，包括步骤：a)将流感病毒原始毒种通过无特定病原鸡胚适应性传代，作为主代种子；b)原代地鼠肾细胞的制备及利用培养瓶或细胞生物反应器进行培养；c)用主代种子感染原代地鼠肾细胞，并进行适应性传代，直至得到病毒血凝效价不低于1∶640的毒种作为疫苗的工作种子；d)用工作种子感染原代地鼠肾细胞，进行病毒扩增，直至病毒血凝效价不低于1∶320为疫苗单价原液；e)疫苗单价原液经浓缩、原代地鼠肾细胞来源充足，易于大规模生产，制备的疫苗中不含对人或动物体具有致瘤性的可复制的DNA，安全性高。
流行性感冒地鼠细胞疫苗制备方法

[发明专利]体内外循环筛选法构建胰腺癌吉西他滨耐药细胞株模型的方法-CN201410081002.8在审
发明人：朱锦辉;劳昕元 -专利权人：朱锦辉
申请日： 2014-03-06 - 公布日： 2014-05-28 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种体内外循环筛选法构建胰腺癌吉西他滨耐药细胞株模型的方法，包括如下步骤：(1)细胞培养；(2)皮下移植；(3)胰腺癌模型组的构建；(4)化学治疗模型的构建；(5)取材；(6)采用酶消化法进行瘤体源性原代细胞培养采用体外细胞培养、体内诱导，重复循环筛选的方法，获得的耐药细胞具有与原代细胞相同的遗传特征，是理想的实验平台。
体内循环筛选构建胰腺癌耐药细胞株模型方法

[发明专利]抗CD4和趋化因子受体结构域复合物的抗体及其抵抗HIV感染的应用-CN97197024.6无效
发明人：王长怡 -专利权人：美国联合生物医学公司
申请日： 1997-06-03 - 公布日： 1999-09-01 - 主分类号： C12P21/08 文献下载
摘要：本发明涉及按照所述的方法及筛选步骤以能表达CD4的T淋巴细胞，例如外周血单核T细胞，胸腺细胞，脾细胞和白血病或淋巴瘤衍生的T细胞系例如HPB－ALL或SUP－T细胞作为免疫原生产的单克隆抗体。本发明单克隆抗体的特性在于其能在体内或体外中和人类免疫缺陷病毒(HIV)及相关的免疫缺陷病毒的原代分离物。此抗体是针对含有与趋化因子受体的结构域结合的CD4蛋白质的宿主细胞抗原复合物的，对第一型的HIV(HIV－1)所有分化体的原代分离物和第二型的HIV(HIV－2)及猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的原代分离物具有广泛的中和活性本发明也涉及筛选及制造此种抗体的方法，能分泌此类抗体的杂交瘤，含有此抗体的药物组合物和在灵长类，包括人类中，用此类抗体在接触病毒前后预防免疫缺陷病毒所造成的感染，此类抗体的原靶为可表达CD4的淋巴细胞。
cd4 因子受体结构复合物抗体及其抵抗 hiv 感染应用

[发明专利]从九节龙提取的三萜皂苷类抗胶质瘤化合物-CN200810150539.X有效
发明人：汤海峰;张淑瑜;王晓娟;田冶;文爱东;邱峰 -专利权人：中国人民解放军第四军医大学
申请日： 2008-08-04 - 公布日： 2008-12-31 - 主分类号： C07J63/00 文献下载
摘要：本发明公开了从九节龙提取的三萜皂苷类抗胶质瘤化合物，分子式为C₆₂H₉₉NaO₃₁，及其在治疗胶质瘤方面的应用。体外抗肿瘤试验表明，该化合物对U87MG、U251MG、BT325和SHG44四种人恶性胶质瘤细胞有明显的抑制作用，而不影响原代培养的人神经胶质细胞生长。本发明化合物可望成为治疗胶质瘤的药物。
九节龙提取皂苷胶质化合物

[发明专利]人套细胞淋巴瘤恶性克隆细胞株及其建立方法和应用-CN201910749122.3有效
发明人：唐君玲;张力;李晓明;邢宏运;周铁军;周仕霞;王季;马涛;韩丽英;周玉萍;王建英;王雪梅;吴洪燕;谭红梅;胡敏;汤计瑞;郭静;丁莉;刘丹;杜鹃 -专利权人：重庆医药高等专科学校附属第一医院
申请日： 2019-08-14 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明属于肿瘤细胞系建立的技术领域，具体涉及具有套细胞淋巴瘤重要异常发育分化阶段的肿瘤恶性克隆细胞系及其建立方法和应用。本发明提供一种含有早期恶性克隆的人套细胞淋巴瘤恶性克隆细胞株，命名为人套细胞淋巴瘤恶性克隆细胞株JeKo‑1‑spheroid，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号是C2018264。本发明以成熟的JeKo‑1‑parental细胞株为诱导对象采用连续培养自然纯化的方法获得了含有套细胞淋巴瘤主要恶性分化阶段的恶性克隆细胞株，所得细胞株与病人原代细胞高度吻合。
细胞淋巴瘤恶性克隆细胞株及其建立方法应用

[发明专利]一种促脑胶质瘤耐药的gaMSCs亚群的检测方法-CN202010559349.4在审
发明人：付朋;赵洪洋;薛冰洲;项炜;蔡晓立;熊南翔;姜晓兵;张方成;易东晔 -专利权人：华中科技大学同济医学院附属协和医院
申请日： 2020-06-18 - 公布日： 2020-10-23 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了提出一种促脑胶质瘤耐药的脑胶质细胞瘤相关间充质干细胞（gaMSCs）亚群的检测方法。本发明通过收集gaMSCs条件培养液培养的人胶质瘤细胞系U87及胶质瘤原代细胞（GBM‑1）并使用TMZ处理，再进行多种检测手段实现直观实验比对，来进行gaMSCs对脑胶质瘤化疗耐药性的评价。本发明的评价方法可以得出CD90低表达的gaMSCs亚群可通过分泌IL‑6促进脑胶质瘤细胞中FOXS1的表达，从而激活肿瘤细胞的上皮间充质转化(EMT)进程，形成对替莫唑胺的化疗耐药。本发明进一步明确了脑胶质瘤微环境促使肿瘤细胞化疗耐药的机制，同时为进一步针对脑胶质瘤的个性化治疗提供了新的思路和靶点。
一种胶质耐药 gamscs 检测方法

[发明专利]一种从九节龙提取的三萜皂苷类化合物-CN200810150538.5有效
发明人：汤海峰;张淑瑜;田冶;王晓娟;文爱东 -专利权人：中国人民解放军第四军医大学
申请日： 2008-08-04 - 公布日： 2009-03-11 - 主分类号： C07J63/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种从九节龙中提取的新的三萜皂苷类化合物，及其在治疗胶质瘤方面的应用。采用高分辨质谱和二维核磁共振谱等光谱技术，以及化学方法，确定了该化合物的化学结构。体外抗肿瘤试验表明，该化合物对U87MG、U251MG、BT325和SHG44四种人恶性胶质瘤细胞有明显的抑制作用，而不影响原代培养的人神经胶质细胞生长。本发明可望成为治疗胶质瘤的药物。
一种九节龙提取皂苷化合物

[发明专利]人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型建立的方法-CN201410225860.5无效
发明人：颜登国;张东兴;龚慧 -专利权人：贵阳医学院附属医院
申请日： 2014-05-26 - 公布日： 2014-08-13 - 主分类号： A61D7/00 文献下载
摘要：本发明提供一种人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型建立的方法，该方法包括从从刚离体的大肠癌标本上切取肿瘤边缘鱼肉样的无坏死肿瘤组织；将该肿瘤组织剪成0.8-1.3mm³的小块后，进行原代移植与传代移植，最终通过传代移植的瘤模型来研究个体特异性，如某一个体对化疗药物或放射治疗的敏感性。
人大肠癌皮下移植模型建立方法

[发明专利]一种胶质瘤干细胞体外培养方法、培养基-CN201910432308.6在审
发明人：王文元;谭淼;罗芳 -专利权人：苏州海苗生物科技有限公司
申请日： 2019-05-23 - 公布日： 2020-11-24 - 主分类号： C12N5/095 文献下载
摘要：本发明提供一种胶质瘤干细胞体外分离培养的方法及培养基，其方法步骤包括：第一步：将细胞瘤组织加入PBS缓冲液；去除血块及坏死细胞，剪碎至糜状；第二步：加入Accutase溶液，使组织块消化呈细胞悬液；第三步：加入GC胶质瘤瘤细胞培养基进行混匀，终止消化；并细胞悬液经滤网(BD)过滤，获得单细胞悬液；第四步：加入PBS再次重悬沉淀，洗涤细胞，除去酶溶液；第五步：加入红细胞裂解液裂解红细胞，弃上清，加入PBS洗涤细胞沉淀以除去红细胞裂解液；第六步：各加入NXFS胶质瘤干细胞培养基至Laminin包被的6孔细胞板进行瘤干细胞原代培养。能够得到80％左右纯度的胶质瘤干细胞以上。
一种胶质干细胞体外培养方法培养基

[发明专利]原发替莫唑胺及贝伐珠单抗耐药的胶质母细胞瘤细胞系及其构建方法和应用-CN201310491849.9有效
发明人：李文斌;江涛;康勋;丁卫;邱晓光;白雪佳;陈静;石蕊 -专利权人：李文斌;江涛;康勋
申请日： 2013-10-18 - 公布日： 2014-01-22 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明公开了原发替莫唑胺及贝伐珠单抗耐药的胶质母细胞瘤细胞系及其构建方法和应用。本发明通过临床筛选，获得原发替莫唑胺及贝伐珠单抗耐药的胶质母细胞患者的组织标本，通过酶消化法，原代培养肿瘤细胞，连续传代至五十代，获得一株原发替莫唑胺及贝伐珠单抗耐药的胶质母细胞瘤细胞系，其微生物保藏编号为本发明胶质母细胞瘤细胞系性状稳定，能够稳定遗传，对于替莫唑胺和贝伐珠单抗均具有较高的耐受性，其细胞增殖周期为48h左右，具有较强的侵袭性和致瘤性。本发明所建立的胶质母细胞瘤细胞系在筛选治疗胶质母细胞瘤的药物以及研究胶质母细胞瘤的致病机理等方面具有重要的应用前景。
原发替莫唑胺贝伐珠单抗耐药胶质细胞细胞系及其构建方法应用

[发明专利]一种3D共培养4种细胞体外建立人血脑屏障模型的方法-CN202111676266.4在审
发明人：王婷 -专利权人：广州市第一人民医院（广州消化疾病中心、广州医科大学附属市一人民医院、华南理工大学附属第二医院）
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明的健康血脑屏障细胞模型为将4种细胞共培养得到；所述4种细胞为：人原代微血管内皮细胞hpBEC、人原代周细胞hpPs(有或无下调PDGFRβ基因)、人原代星形胶质细胞hpA和人神经母细胞瘤细胞系SH‑SY5Y
一种培养细胞体外建立血脑屏障模型方法

[发明专利]一种组织保存液-CN201810555694.3有效
发明人：刘思文;蔡娅;段荣燕;蔡娜 -专利权人：湖南赛奥维生物技术有限公司
申请日： 2018-06-01 - 公布日： 2021-12-24 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：与常规保存液相比，使用该保存液的PDX模型成瘤率大大增加，肿瘤利用率大大提升，成瘤和原代细胞培养时间显著缩短。并且，使用该方法可以增强脊索瘤样本的活性，从而使得脊索瘤PDX模型实验的成本降低，能够使更多患者通过PDX模型进行肿瘤的精准医疗，从而提高脊索瘤治愈的可能。
一种组织保存

[发明专利]一种靶向GDNF基因启动子II区内增强子II的dsRNA及其应用-CN202010259258.9有效
发明人：张宝乐;高殿帅;韩笑;刘捷;高擎 -专利权人：徐州医科大学
申请日： 2020-04-03 - 公布日： 2020-10-23 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明所述的dsRNA可在制备抑制星形胶质母细胞瘤的药物和制备抑制星形胶质母细胞瘤迁移和侵袭的药物中应用。该dsRNA能特异性地显著降低人U251星形胶质母细胞瘤细胞中GDNF基因的转录水平，根据其序列包装的慢病毒Lenti‑E还显著降低了U251细胞的细胞增殖、迁移和侵袭能力，但对人正常原代星形胶质细胞HA没有影响；说明该dsRNA具有一定治疗胶质母细胞瘤的临床应用价值。
一种靶向 gdnf 基因启动子 ii 区内增强 dsrna 及其应用

[发明专利]人颈静脉球副神经节瘤永生化细胞株及其应用-CN202010407137.4有效
发明人：吴皓;汪照炎;王志刚;陈洪赛 -专利权人：上海交通大学医学院附属第九人民医院
申请日： 2020-05-14 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了人颈静脉球副神经节瘤永生化细胞株，其保藏号为：CGMCC NO.19664，细胞株分类命名为人颈静脉球副神经节瘤永生化细胞株。本发明的细胞株是第一例来源于人的颈静脉球副神经节瘤细胞株。存在SDHB基因的突变，能够模拟实际中人SDHB基因突变背景的颈静脉球副神经节瘤表型。获得的细胞的基因型背景一致，无杂质细胞混杂，较原代细胞更适合基础实验，且适合推广。
颈静脉神经节永生细胞株及其应用