本发明提供了一种糖基转移酶及其应用。糖基转移酶与SEQ ID NO:2相比包含选自以下一个或多个的残基位置处的氨基酸残基差异:第14位氨基酸为I;第189位氨基酸为L;第257位氨基酸为A、C、L、M、S或V;第265位氨基酸为E或A;第273位氨基酸为G;第302位氨基酸为G;第324位氨基酸为G;第347位氨基酸为G;第451位氨基酸为E;第455位氨基酸为D或C;并具有不低于如SEQ ID NO:2的氨基酸序列所示的糖基转移酶酶活性本发明的糖基转移酶的酶活高、稳定性好;将其用于制备甜菊糖苷时与糖基转移酶亲本相比,在催化活性方面有了明显的提高,转化率显著提升。本发明解决了糖基供体UDPG、ADPG价格昂贵的问题,也提供底物多种选择可能性。
本发明公开了一种表达鼠李糖糖基转移酶的重组大肠杆菌及其应用,属于基因工程技术与生物医药领域。将氨基酸序列如SEQ ID NO.6‑SEQ ID NO.10任一所示的鼠李糖糖基转移酶、文献报道具有C‑28位葡萄糖糖基转移酶UGT73AH1以及葡萄糖糖基转移酶UGT73C7或UGT73C8于大肠杆菌宿主发酵结果表明,本发明筛选的5个鼠李糖糖基转移酶均能发挥作用,并且在0.596min出现唯一新峰,且与积雪草苷标准品特征离子流一致。
本发明公开了一种珠子参糖基转移酶UGTPjm1基因及在制备人参皂苷Ro上的应用,珠子参糖基转移酶UGTPjm1基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。以竹节参皂苷IVa和糖基供体UDP‑葡萄糖为原料,在由珠子参糖基转移酶UGTPjm1基因编码得到的珠子参糖基转移酶的催化下,在竹节参皂苷IVa的C3位上的葡萄糖醛酸基团上再一次糖基化,生成人参皂苷Ro。珠子参糖基转移酶UGTPjm1基因作为人参皂苷Ro生物合成的关键基因,还可用于珠子参等植物育种研究。
本发明涉及生物医药领域,公开了一种葡萄糖基转移酶突变体及其编码基因、重组载体、重组菌株和酶制剂以及它们的应用。该葡萄糖基转移酶突变体为SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的R位进行点突变,并在其N端添加4‑8个组氨酸。制备天麻素的方法包括以下步骤:将葡萄糖基转移酶突变体与对羟基苯甲醇、二磷酸尿苷葡糖接触。本发明提供的葡萄糖基转移酶突变体,对于底物对羟基苯甲醇的特异性较高,进而使得对羟基苯甲醇转化成天麻素的转化率明显提高,具有较好的工业应用前景。