本发明公开了一种ZIKV特异性检测靶序列、质粒标准分子及其核酸检测试剂盒,该质粒标准分子为含有具有碱基组成SEQ ID NO:1的检测靶序列。所述核酸检测试剂盒为:由SEQ ID NO:2‑5组成的核酸检测巢式PCR引物体系,由SEQ ID NO:7‑9组成的核酸检测荧光定量PCR引物体系及SEQ ID NO:6的逆转录引物。本发明成功构建了ZIKV特异性质粒标准分子及其PCR检测体系,为人群及媒介蚊虫野生种群ZIKV携带背景调研与诊断建立了简便、价廉、特异的核酸检测体系。
本发明用于生物检测技术领域,具体为一种基于核酸恒温扩增的日本脑炎检测试剂盒。本发明检测试剂盒包括引物组、扩增反应试剂、阳性质控以及阴性对照;引物组根据NCBI中日本脑炎病毒基因组包膜蛋白E基因片段SEQ ID NO.5设计,为SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.4所示;阳性对照为日本脑炎病毒假病毒,阴性对照为无核酸酶水。本发明利用链置换Bst DNA聚合酶和Mulv逆转录酶以及特殊发卡引物在恒温条件下构造特异性扩增元件,利用UDG酶去除气溶胶污染,实现核酸指数扩增,保证扩增的高度灵敏度和快速性。本发明检测试剂盒对日本脑炎病毒的检测灵敏度高、操作简便,成本低,假阳性率低,并大大提高日本脑炎病毒的检测速度。
本发明公开了一种对虾IHHNV核酸等温扩增检测试剂盒,该试剂盒包括内装研磨液的研磨液管、内装乙酸钠溶液的核酸提取液A管、内装无水乙醇的核酸提取液B管、内装质量浓度70%的乙醇溶液的核酸提取液C管、内装TE缓冲液的TE缓冲液管、内装尿嘧啶DNA糖基化酶的UNG酶管、内装LAMP反应液的LAMP反应液管、内装Bst DNA聚合酶的BstDNA聚合酶管、内装核酸染料SYBR Green I的显色剂管、内装对虾IHHNV阳性DNA的阳性对照核酸管和内装灭菌的双蒸水的阴性对照管。本发明还同时提供了利用上述检测试剂盒进行的检测对虾传染性皮下及造血器官坏死病毒的方法,该方法具有成本低、检测灵敏度高且易现场操作的特点。
本发明公开了一种DENV I‑III型通用特异性检测靶序列、质粒标准分子及其核酸检测试剂盒,所述质粒标准分子为含有具有碱基组成SEQ ID NO:1的检测靶序列。所述核酸检测试剂盒为:由SEQ ID NO:2‑5组成的核酸检测引物体系及SEQ ID NO:6的逆转录引物。本发明成功构建了DENV I‑III型特异性质粒标准分子及其PCR检测体系,为人群及媒介蚊虫野生种群DENV I‑III型携带背景调研与诊断建立了简便、价廉、特异的核酸检测体系。