一组GH10家族木聚糖酶的N‑糖基化突变体及其应用,对位于Loop区N141‑N153且处于GH10家族木聚糖酶基因序列保守区的相同氨基酸位点N147和A142进行定点突变,所述突变位点以4XX6为模板的N147位点,获得木聚糖酶突变体4XX6‑N147Q;以XYL10C∆N为模板的A142位点,获得木聚糖酶突变体XYL10C∆N‑A142N;其中木聚糖酶突变体4XX6‑N147Q的氨基酸序列如SEQID NO.3所示;木聚糖酶突变体XYL10C∆N‑A142N的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。综合分析发现Ala142位点构建的N‑糖基化具有促进GH10家族木聚糖酶热稳定性的作用。本发明对利用N‑糖基化改良GH10家族木聚糖酶的热稳定性具有重要的指导意义。
本发明涉及木聚糖酶HoXyn11A的S95T‑S164T突变体、编码该突变体的多核苷酸、重组载体、重组菌、制备该突变体的方法及该突变体的用途。其中,通过对氨基酸序列为SEQ ID No.3的木聚糖酶进行S95T‑S164T突变,获得木聚糖酶HoXyn11A的S95T‑S164T突变体。与野生型的木聚糖酶HoXyn11A相比,木聚糖酶HoXyn11A的S95T‑S164T突变体在保持木糖降解活性的同时,表现出良好的热稳定性。
本发明公开了一种扩张蛋白和木聚糖酶融合蛋白、其编码基因和应用。所述融合蛋白包括扩张蛋白EXCL和木聚糖酶XYN,EXCL位于融合蛋白的N端,XYN位于融合蛋白的C端;其中,扩张蛋白EXCL的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;木聚糖酶XYN的氨基酸序列如SEQ本发明采用基因工程技术构建了扩张蛋白和木聚糖酶融合酶,酶活力相较于天然木聚糖酶提高了1.3倍,并对木质纤维素具有吸附能力。
本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种高催化效率木聚糖酶XYN10B及其基因和应用。本发明提供了一种新的高催化效率木聚糖酶XYN10B,其具有如SEQ ID NO.1或2所示氨基酸序列,且本发明还提供了编码上述高催化效率木聚糖酶XYN10B的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3或本发明的木聚糖酶最适pH5.5,并在pH4.0~10.0范围内具有80%以上的酶活力;最适温度75℃,具有很高的催化效率为3710ml s-1mg-1。此外,木聚糖酶XYN10B可有效降解各种不同类型的木聚糖。因此,本木聚糖酶将在饲料和食品工业的应用中显示出其巨大的潜力。
本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种低温酸性木聚糖酶XYN10B及其基因和应用。本发明提供了一种新的低温酸性木聚糖酶XYN10B,其具有如SEQ ID NO.1或2所示氨基酸序列,且本发明还提供了编码上述低温酸性木聚糖酶XYN10B的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.4或5所示本发明的木聚糖酶最适pH3.5,并在pH2.5~4.5范围内具有50%以上的酶活力;在酸性范围内具有很好的pH稳定性;最适温度40℃,在低温下具有很高的活性,在0℃仍具有16%的活力。此外,木聚糖酶XYN10B可有效降解各种不同类型的木聚糖。因此,本木聚糖酶将在饲料工业的应用中显示出其巨大的潜力。
本发明属基因工程技术领域,具体涉及一种耐高温酸性木聚糖酶XYN10L2及其基因和应用。本发明的耐高温酸性木聚糖酶XYN10L2,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明提供的耐高温酸性木聚糖酶基因xyn10L2,编码权利要求1所述的耐高温酸性木聚糖酶XYN10L2,其碱基序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示。本发明还提供了包含上述耐高温酸性木聚糖酶基因xyn10L2的重组载体以及包含上述中温酸性木聚糖酶基因xyn10L2的重组菌株。本发明的木聚糖酶最适pH为4.0,在pH 2.0~7.0都具有较高的酶活性,pH稳定性好;具有良好的抵抗蛋白酶的能力;具有较好耐高温特性,可使其在需求高温环境的工业生产上应用。