本发明涉及分子生物学技术领域,具体公开了马链球菌兽疫亚种的实时荧光定量PCR检测引物、方法与应用。本发明的马链球菌兽疫亚种的实时荧光定量PCR检测引物,其核苷酸序列如SEQ ID No.1‑2所示。以该引物进行马链球菌兽疫亚种的荧光定量PCR检测,特异性好、敏感度较高、成本低且快速,可用于大量样品检测。
本发明公开了一种转基因大豆MON89788品系的实时荧光PCR检测引物探针、试剂盒及方法。本发明的实时荧光PCR检测引物包括正向引物和反向引物,正向引物的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示,反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;本发明的实时荧光PCR检测探针为:MON89788本发明针对大豆MON89788品系的特点设计了效果优异的引物探针、优化了检测方法,检测效率非常高,本发明的实时荧光PCR检测方法经验证具有较高的特异性、灵敏性以及可重复性,能够满足口岸对于转基因大豆检得快
本发明公开了一种猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型多重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法,设计合成出引物,利用引物检测猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型的多重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法,包括提取样品的DNA后,利用SYBR Green I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。本发明的有益效果是能够同时有效诊断和检测出猪伪狂犬病毒、猪细小病毒与猪圆环病毒2型三种病毒,不能检测出非特异的猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒,有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别与诊断,并且具有的较好敏感性
本发明提供了一种用于鉴别流产嗜性衣原体的实时荧光定量PCR检测引物对和探针,所述引物对的序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.2所示;所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示,所述探针5’端标记荧光基团,3’端标记荧光淬灭基团。本发明还提供了用于鉴别流产嗜性衣原体的实时荧光定量PCR检测试剂盒与检测方法,该试剂盒包括所示引物对和探针。本发明针对特有基因区域L3‑b的保守序列设计了一套特异性PCR引物和TaqMan探针,建立了流产嗜性衣原体TaqMan实时荧光定量PCR鉴别检测试剂盒,特异性良好,灵敏度高,仅能检测流产嗜性衣原体,而不能检测家畜衣原体和其他非流产嗜性衣原体病原
本发明公开了禾谷缢管蚜实时荧光定量PCR检测用的内参基因及其扩增引物和应用。本发明利用荧光定量PCR技术建立了禾谷缢管蚜在不同试验条件下内参基因的筛选方法,最终筛选出EF‑1α、β‑actin、AK、TATA、GAPDH、GST、RPL13、RPS6、RPS18、18S或28S基因适宜作为禾谷缢管蚜实时荧光定量PCR检测用的内参基因。本发明进一步设计扩增所述内参基因的特异性定量引物,建立基于SYBR Green I染料技术的RT‑PCR方法,为研究禾谷缢管蚜功能基因或不同发育时期、不同地理种群、不同身体部位、不同翅型基因表达或不同处理条件下基因表达提供了准确和灵敏的实时荧光定量PCR检测方法。