本发明公开一种植物来源启动子、表达载体及应用，涉及基因工程技术领域；本发明公开的植物来源的高表达启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示；其是对拟南芥原启动子的碱基进行了更改，在保持原启动子功能的基础上，又能够避免被限制性内切酶切开的问题；本发明创建的表达载体适用于单子叶和双子叶植物，解决了现有载体所采用的Ubiqutin启动子序列太长、不易转化及双子叶植物表达丰度低的问题，也解决了CaMV35S启动子单子叶植物表达丰度偏低以及潜在的安全性问题；本发明创造性的在ccdB毒性蛋白的两端，分别加入多克隆位点，既能够满足限制性内切酶的需要，也能有效的抑制载体的假阳性。
本发明提供了利用肿瘤特异性启动子介导的PE38KDEL基因表达质粒的构建方法及应用，属于基因靶向治疗肿瘤技术领域，所述PE38KDEL基因具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。本发明提供了一种含有所述PE38KDEL基因的重组质粒，所述重组质粒以pGL3‑Basic为原始质粒，在pGL3‑Basic的多克隆位点插入肿瘤特异性启动子，并利用PE38KDEL基因替换原荧光素酶基因；所述肿瘤特异性启动子为SERPINB3启动子或CEACAM6启动子。
本发明涉及生产透明质酸的方法，包括：(a)在有助于生产透明质酸的培养基中培养芽孢杆菌宿主细胞，其中芽孢杆菌细胞包含含有三联启动子的核酸构建体，三联启动子包含具有对应于SEQ ID NO：1的位置590的突变的变体amyL启动子，“-35”区域具有TTGACA序列和“-10”区域具有TATAAT序列的共有启动子和cryIIIA启动子，其中三联启动子的每个启动子序列可操作地与一个或多个涉及透明质酸生物合成的编码序列相连本发明也涉及包含核酸构建体的芽孢杆菌细胞，其中核酸构建体包含(i)含有具有对应于SEQ ID NO：1的位置590的突变的变体amyL启动子，“-35”区域具有TTGACA序列和“-10”区域具有TATAAT序列的共有启动子和cryIIIA启动子的三联启动子，其中三联启动子的每个启动子序列可操作地与该个或多个涉及透明质酸生物合成的编码序列相连。
本发明公开了植物过表达荧光素酶报告基因重组载体及构建方法、应用，涉及基因重构技术领域，所述重组载体含有pCAMBIA3301双元表达载体和插入片段；所述插入片段包括启动子、多克隆位点和荧光素酶报告基因；所述启动子的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID No.1所示；所述多克隆位点的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID No.2所示。本发明公开的重组载体解决了现有的pCAMBIA3301双元表达载体在用于过表达的时候，启动子后没有合适的酶切位点，每次插入目的基因均需要在其5’端引入CaMV35S启动子的问题，简化了目的基因的插入步骤
本发明公开了一种不受甘油和葡萄糖抑制的可诱导启动子及利用该启动子构建的毕赤酵母表达载体。所述启动子为FDH1基因启动子，所述FDH1基因启动子的序列如SEQ ID NO:1所示。利用FDH1基因启动子驱动外源基因转录的毕赤酵母表达载体包括胞内表达和胞外分泌型表达两种。本发明获得的FDH1基因启动子以及所构建的表达载体可以有效的提高外源蛋白在毕赤酵母中的表达，同时可以满足更多启动子的选择。
